Abstract
Bakgrunn
For å forbedre utfallet av pasienter med ikke-småcellet lungekreft (NSCLC), en biomarkør som kan forutsi effekten av kjemoterapi er nødvendig. Hensikten med denne studien var å vurdere rollen til EGFR mutasjoner og ERCC1 i å forutsi effekten av platina-basert kjemoterapi og utfallet av pasienter med NSCLC.
Metoder
Vi gjennomførte en retrospektiv studie å analysere forholdet mellom EGFR mutasjoner eller ERCC1 uttrykk og progresjonsfri overlevelse (PFS) hos pasienter med NSCLC som fikk platinumbasert kjemoterapi. EGFR mutasjonstatus ble bestemt ved anvendelse av peptid-nukleinsyre-låst nukleinsyre polymerase chain reaction klemme metode, og immunhistokjemi ble anvendt for å undersøke ekspresjon av ERCC1 i tumorprøver oppnådd fra pasienter.
Resultatene
Blant de NSCLC pasienter som fikk platinumbasert kjemoterapi, var median PFS var signifikant bedre hos dem som aldri hadde røykt og de med ekson 19 sletting, og median total overlevelse (OS) var signifikant bedre hos dem som aldri hadde røykt, de med ekson 19 sletting, og kvinner. Cox regresjonsanalyse viste at ekson 19 sletting og har aldri røkt var signifikant assosiert med både PFS og OS. Delsett analyse viste en signifikant sammenheng mellom ERCC1 uttrykk og EGFR mutasjon, og ERCC1-negative pasienter med exon 19 delesjon hadde en lengre PFS enn de andre pasientene; ERCC1-positive pasienter uten ekson 19 sletting hadde en kortere PFS enn de andre pasientene.
Konklusjoner
Våre resultater tyder på at blant NSCLC pasienter som fikk platinumbasert kjemoterapi, de med ekson 19 sletting ha en lengre PFS og OS. Våre funn tyder på at platina-basert kjemoterapi er mer effektivt mot ERCC1-negative og ekson 19-positiv NSCLC
Citation. Yamashita F, Azuma K, Yoshida T, Yamada K, Kawahara A, Hattori S, et al . (2013) prognostisk verdi av EGFR mutasjon og ERCC1 hos pasienter med ikke-småcellet lungekreft Gjennomgår platinabasert kjemoterapi. PLoS ONE åtte (8): e71356. doi: 10,1371 /journal.pone.0071356
Redaktør: Karl X. Chai, University of Central Florida, USA
mottatt: 16 april 2013; Godkjent: 28 juni 2013; Publisert: 05.08.2013
Copyright: © 2013 Yamashita et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Denne studien ble støttet av Fukuoka Foundation for god helse, Japan (https://www.sukoken.or.jp/). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet. Ingen ekstra ekstern finansiering mottatt for denne studien
Konkurrerende interesser:. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Lungekreft er den ledende årsak til kreft dødsfall. verdensomspennende [1]. Epidermal vekstfaktor-reseptor (EGFR) er ansett for å være en viktig molekylære mål i lungecancerterapi. Somatiske aktive mutasjoner av
EGFR
genet har blitt identifisert som en viktig faktor for den kliniske responsen på EGFR tyrosinkinasehemmere (TKI) som gefitinib og erlotinib hos pasienter med NSCLC. De fleste av disse mutasjoner forekommer i eksoner 19 til 21, som koder for tyrosinkinase-domene av reseptoren, og det vanligste er slettinger i exon 19 (for eksempel delE746-A750) og den L858R punktmutasjon i exon 21. Disse mutasjoner er funnet mer ofte i kvinnelige pasienter, hos personer som aldri har røykt, og hos pasienter med østasiatisk etnisitet [2] – [5]. Prospektive kliniske studier av EGFR-TKI behandling for NSCLC pasienter med aktiverende EGFR mutasjoner, som delE746-A750 (ekson 19) og L858R (ekson 21), har vist høye responsrater kliniske på ca 80% [4] – [7]. I IPASS studie som sammenligner gefitinib med carboplatin og paclitaxel som førstelinjebehandling hos asiatiske pasienter, NSCLC pasienter med EGFR mutasjon hadde en høyere svarprosent enn pasienter uten EGFR mutasjoner når de mottok carboplatin og paclitaxel. Effekten av platina-basert kjemoterapi var bedre hos pasienter som var positive for EGFR mutasjon enn i de som var negative [8]. Disse resultatene tyder på at NSCLC pasienter med EGFR mutasjoner kan ha en tendens til å svare på cytotoksiske regimer som platina-basert kjemoterapi. Enkelte forskere har rapportert at pasienter med EGFR mutasjoner svare på konvensjonell kjemoterapi [9] – [13]. Imidlertid har de mekanismer som ligger til grunn for disse responser på kjemoterapi forble uklart.
På den annen side er ERCC1 en komponent av nukleotid-excision reparasjon veien, noe som er viktig for reparasjon av platina-DNA-addukter og er forbundet med motstand til platina-basert kjemoterapi [13]. Noen kliniske studier har vist at overekspresjon av ERCC1 har en tendens til å være assosiert med resistens overfor platinabasert kjemoterapi [14] – [15]. Tidligere rapporterte vi også at ERCC1 uttrykk estimeres ved immunhistokjemi var en uavhengig prognostisk faktor når det gjelder både proression overlevelse (PFS) og total overlevelse (OS) hos pasienter med NSCLC tilbakefall som hadde fått platinumbasert kjemoterapi [16]. Totalt sett NSCLC pasienter med et lavt nivå av ERCC1 hadde lengre overlevelse etter platinabasert kjemoterapi enn de med et høyt nivå av ERCC1. Gandara et al. har rapportert en signifikant sammenheng mellom EGFR mutasjon og et lavt nivå av ERCC1 mRNA i NSCLC-tumorprøver [17]. Disse viktige funn bedt oss om å undersøke sammenhenger mellom EGFR mutasjoner og ERCC1 i NSCLC pasienter som fikk platinumbasert kjemoterapi. Vi gjennomførte en retrospektiv studie for å vurdere nytten av EGFR mutasjon som en prediktor for effekt av platina-basert kjemoterapi og utfallet av pasienter med NSCLC. Videre har vi brukt immunhistokjemi for å undersøke ekspresjon av ERCC1 i tumorprøver fra NSCLC pasienter som får platinabasert kjemoterapi, og analyseres forholdet mellom ERCC1 og EGFR-mutasjoner i tumorer og overlevelsestiden for å bestemme hvorvidt eller ikke ekspresjonen av disse molekylene kan bli brukt å forutsi PFS og OS.
Materialer og metoder
NSCLC pasienter og behandling
Denne retrospektive studien inkluderte tilfeller av histologisk eller cytologisk diagnostisert NSCLC, som ble avansert (stadium IIIB eller IV) eller tilbakevendende ved førstegangsdiagnose. Vi screenet 206 NSCLC pasienter som ble behandlet med gefitinib eller erlotinib mellom september 2002 og mars 2011 kl Kurume universitetssykehus. Blant disse pasientene 103 fikk platina-basert kjemoterapi og EGFR-TKI. Behandlingen ble videreført til utseendet av uakseptable bivirkninger, sykdomsprogresjon eller død, eller tilbaketrekking fra studien. Klinisk informasjon om hvert tilfelle ble innhentet fra de medisinske poster; parametere inkludert kjønn, alder, Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) performance status (PS), tumorhistologi, scene, røykestatus, og antall tidligere kjemoterapi kurs. Pasient egenskapene som er anført inkludert kjønn, alder, PS, tumorhistologi, sykdom stadium, postoperativ tilbakefall av sykdommen, røyking historie, tidligere kjemoterapi, og type EGFR mutasjon.
tumorrespons ble undersøkt av computertomografi og evaluert i henhold til Response evalueringskriterier i solide tumorer (RECIST). Response ble bekreftet minst 4 uker (for en fullstendig eller delvis respons) eller 6 uker (for stabil sykdom) etter at den først ble dokumentert. Denne studien ble godkjent av Institutional Review Board of Kurume University.
DNA Extraction og PNA-LNA PCR Clamp analysen
For
EGFR
mutasjon analyse, peptic nucleic syre låst nukleinsyre (PNA-LNA) polymerase kjedereaksjon (PCR) klemme-metoden ble tatt i bruk, ved bruk av protokollene som er beskrevet tidligere [18]. Spesifikke PNA-LNA probe sett for to mutasjoner områder, ekson 19 (delE746-A750) og ekson 21 (L858R), ble utviklet og disse dekkes 90% av
EGFR
mutasjoner tidligere rapportert i Japan. I korte trekk, ble genomisk DNA renset fra parafininnstøpte vev ved hjelp av en QIAamp DNA Micro-sett (QIAGEN). PCR-primere ansatt ble syntetisert av Invitrogen Inc. PNA klem primere og LNA mutante prober ble kjøpt fra FASMEC (Kanagawa, Japan) og IDT (Coralville, IA), henholdsvis. PNA-LNA PCR-klemme-analyse ble utført ved hjelp av SDS-7500 System (Applied Biosystems). Ekson-sekvenser for EGFR kinase domene ble forsterket av nestet PCR ved bruk av en spesifikk primer.
Immunhistokjemisk Evaluering av parafin-embedded tumorvev
Tilstrekkelig vevsprøver var tilgjengelig for 51 av disse pasientene og utsatt for ERCC1 gjenkjenning, som rapportert tidligere [16]. Vevsprøver ble fiksert i 10% nøytral-bufret formalin og innstøpt i parafin. Parafinsnitt ble deretter kuttet med en tykkelse på 4 um, som er montert på belagte glassplater, og merket med et antistoff mot ERCC1 (klon 8F1, Neomarkers, Fremont, CA). Etter at delene hadde blitt deparaffinized i xylen og dehydrert i en gradert etanol-serien, ble endogen peroxydaseaktivitet blokkert med H
2o
2 i metanol. For ERCC1 farging ble hentet antigener ved oppvarming i sitronsyre (pH 6,0) i 10 minutter. Seksjoner ble inkubert med blokkeringsløsning (10% Block Ace; Yukijirushi, Tokyo, Japan) og deretter omsatt med anti-ERCC1 monoklonalt antistoff. Etter at overskudd av antistoff var blitt vasket ut med PBS, ble prøvene inkubert med pepperrot peroksidase (HRP) -merket geite-anti-mus eller anti-kanin-antistoff (Nichirei, Tokyo, Japan) i 60 min. Reaksjonen ble visualisert ved bruk av 3,3 «diaminobenzidin (DAB) som et substrat (DAKO, Glostrup, Danmark), og objektglassene ble motfarget med hematoksylin. Hvert snitt var varmebehandlet ved hjelp av Target Retrieval løsning, pH 9,0 (DAKO, Glostrup, Danmark) i 30 min, og inkubert med antistoff ved 4 ° C over natten. ERCC1 atom uttrykk ble klassifisert i fire kategorier: 0 poeng, ingen farging på alle 10% av tumorceller; scorer 1+, svak /knapt merkbar delvis atom ekspresjon i 10% av tumorceller; ballen 2 +, svak til moderat farging av hele kjernen i 10% av tumorceller; og scorer 3+ = sterk farging av hele kjernen i 10% av tumorcellene. Omfanget av immunhistokjemi farging for ERCC1 ble definert som følger: scorene til 1+, 2+ og 3+ ble betraktet som positiv, og en score fra 0 ble ansett som negativt. Alle IHC studier ble vurdert av to IHC-erfarne observatører som var uvitende om forholdene for pasientene (AK og MK).
Statistical Analysis
Vi brukte Fishers eksakte test for å vurdere betydningen av relasjoner mellom EGFR mutasjonsstatus og andre pasientkarakteristika. For EGFR-TKI behandling, ble PFS beregnet fra datoen for oppstart av EGFR-TKI frem til dato for sykdomsprogresjon. For platinabaserte kjemoterapi behandlinger, ble PFS beregnet fra datoen for oppstart av platina-basert kjemoterapi frem til dato for sykdomsprogresjon. OS ble definert som perioden fra datoen for oppstart av platina-basert kjemoterapi frem til dato for død. Pasienter uten sykdomsprogresjon og som fortsatt var i live, ble behandlet som sensurert på sitt siste kontakt for analyse av PFS og OS, henholdsvis. Overlevelseskurver for PFS og OS ble beregnet ved Kaplan-Meier-metoden, og forskjellen mellom kurvene for pasienter med og uten EGFR mutasjoner ble evaluert ved log-rank test. Den Cox modellen ble brukt til å undersøke hvorvidt EGFR mutasjon var assosiert med PFS eller OS selv etter justering for andre prognostiske faktorer. Alle testene var tosidig, og forskjeller på
P
0,05 ble ansett som statistisk signifikant. Statistisk analyse ble utført med JMP versjon 10.0.0 og SAS versjon 9.2 programvare (SAS Institute, Cary, NC).
Resultater
Relasjoner mellom EGFR mutasjoner og pasientkarakteristika
de kliniske karakteristika for de 103 pasientene er vist i tabell 1. Alle pasientene fikk platinabasert kjemoterapi og hadde en god PS (0-1). EGFR mutasjoner ble identifisert i 46 pasienter. Med hensyn til den type
EGFR
mutasjon, 26 pasienter hadde delesjoner i exon 19, og 20 pasienter hadde L858R missense mutasjon i exon 21. Femti-seks pasienter var kvinner og 51 var aldri røykt; median alder av pasientene totalt var 63 (range, 33 til 78) år. Åtti-ni pasienter hadde adenokarsinom. Platinaforbindelser ble brukt for førstelinje kjemoterapi i de fleste (99/103) av pasientene. På den andre hender, 4 pasienter fikk gefitinib som et første linje kjemoterapi etterfulgt av platinaforbindelser som andrelinje kjemoterapi. Kjemoterapiregimer besto av karboplatin-paklitaxel hos 55 pasienter, karboplatin-gemcitabin i 12, karboplatin-pemetrexed i fire, karboplatin-vinorelbin i 1, cisplatin-vinorelbin i 18, cisplatin-docetaxel i fire, cisplatin-gemcitabin i fire, cisplatin- vinorelbin-gemcitabin i tre, cisplatin-pemetrexed i en, og cisplatin-etoposid i 1. median antall kjemoterapi sykluser var tre (range 1-4). I EGFR mutasjons-positive gruppe, 17 pasienter (36,9%) opprettholdes en delvis respons (PR), 25 (54,3%) opprettholdes stabil sykdom (SD), og 4 (8,8%) opprettholdes progressiv sykdom (PD), mens i EGFR mutasjon-negative gruppen, 10 pasienter (17,5%) opprettholdt en PR, 28 (49,1%) opprettholdt SD, og 19 (32,2%) opprettholdt PD. Kvinne kjønn (P = 0,072), tumorrespons (p = 0,005), og gefitinib behandling (P 0,001) var signifikant hyppigere i gruppen av pasienter med EGFR mutasjoner, mens andre egenskaper viste ingen inter-gruppeforskjeller (tabell 1) .
Survival Analysis
median oppfølgingstid var 565 (range 31-3367) dager. Blant 103 NSCLC pasienter som fikk platinumbasert kjemoterapi, 101 led sykdomsprogresjon og 73 døde. For EGFR-TKI behandling, var median PFS var signifikant lenger i EGFR mutasjonspositive enn i EGFR mutasjon-negative tilfeller (P 0,001, P 0,001) (Fig. 1A og 1B), mens det var ingen signifikant forskjell i median OS mellom de to gruppene (
P
= 0,126, p = 0,122), henholdsvis.
Forskjeller i progresjonsfri overlevelse og total overlevelse mellom undergrupper ble analysert ved log-rank test. A, B: For EGFR-TKI behandling, var median PFS var signifikant lenger i EGFR-mutasjon positiv enn i EGFR mutasjon-negative pasienter (P 0,001, P 0,001) C: Blant pasienter med NSCLC som fikk platinabasert kjemoterapi, median PFS var signifikant bedre for de med EGFR mutasjoner enn for de uten. D: Blant pasienter med NSCLC som fikk platinumbasert kjemoterapi, var median PFS var signifikant bedre for de med ekson 19 sletting eller L858R
Blant pasienter med NSCLC som fikk platinumbasert kjemoterapi, medianen. PFS var signifikant bedre for de som aldri hadde røykt (P = 0,003) og for de med ekson 19 sletting eller L858R (P = 0,040) (fig. 1C og fig. 1 D). Men PFS var ikke assosiert med andre faktorer, som for eksempel alder, kjønn, histologi, stadium, og EGFR-TKI behandling (tabell 2). Også blant pasienter med NSCLC som fikk platinumbasert kjemoterapi, var median OS var betydelig bedre for kvinnelige pasienter (p = 0,020), pasienter som aldri hadde røkt (P = 0,03), pasienter med stadium IV eller tilbakevendende sykdom (P = 0.010) og pasienter med exon 19 delesjon (P = 0,028). Men OS ikke forbundet med andre faktorer, som alder, histologi, og EGFR-TKI behandling (Table2). Til slutt, Cox regresjonsanalyse, inkludert faktorer vist å være signifikant assosiert med PFS eller OS ved log-rank test, viste at EGFR mutasjon og røykestatus (som aldri har røkt) var signifikant assosiert med PFS (P = 0,036 for heterogenitet blant ekson 19 sletting, L858R og vill type; P = 0,024 for røykestatus med hazard ratio (HR) 0,427 og 95% konfidensintervall (KI) 0,213 til 0,892). Ved parvis sammenligning i forhold til villtypen, pasienter med exon delesjon 19 hadde signifikant lengre PFS enn de med villtype (HR, 0,566; 95% CI, 0,340 til 0,911;
P
= 0019), mens pasienter med L858R ikke har vesentlig lengre PFS (HR, 1,073; 95% CI, 0,621 til 1,780) (tabell 3). For OS, ble tilsvarende resultater oppnådd: EGFR mutasjon var signifikant assosiert med OS (P = 0,010 for heterogenitet) og røykestatus var nær statistisk signifikans (P = 0.082, HR, 0,523; 95% CI, 0,256 til 1,086). Pasienter med exon 19 sletting hadde betydelig lengre OS at de med villtype (HR, 0,452; 95% CI, 0,242 til 0,811;
P
= 0007), mens de med L858R ikke (HR, 1,176; 95% CI, 0,628 til 2,100, P = 0,600) (tabell 4).
Immunhistokjemisk Vurdering av ERCC1 og korrelasjon mellom ERCC1 og Survival
Tilstrekkelig svulst prøver var tilgjengelig fra 51 av disse pasientene, og ble utsatt for ERCC1 deteksjon. Ekspresjon av ERCC1 ble bestemt ved immunohistokjemi (fig. 2A). Ekspresjon av ERCC1-proteinet ble påvist i kjernen av kreftceller. Tabell 5 viser forholdet mellom ERCC1 ekspresjon og andre clinicopathologic faktorer. Nuclear uttrykk for ERCC1 ble klassifisert i fire kategorier. Tjuetre pasientene hadde 0 poeng, 12 hadde poengsum 1+, 8 hadde poengsum 2+, og 8 hadde poengsum 3+ (median 1). Fordi median ERCC1 uttrykk poengsum er scorer 1+, ble scorene til 1+, 2+ og 3+ betraktes som positive og score på 0 som negative. ERCC1 uttrykk var positiv i 28 pasienter og negative i 23. ERCC1 uttrykk var signifikant korrelert med EGFR mutasjon (P = 0,030) (Fig. 2B), men ikke med andre faktorer, inkludert alder (
P
= 1,000) , sex (
P
= 1,000), histologi (
P
= 1,000), røykestatus (
P
= 0,773), eller respons på kjemoterapi (
P
= 0,374)
A:. uttrykk for ERCC1 ble vurdert ved immunhistokjemi. Ekspresjon av ERCC1 protein ble påvist i kjernen av kreftceller (X400). B: Kaplan-Meier overlevelseskurver ifølge ERCC1 uttrykk poengsum. C:. ERCC1-negative pasienter med exon 19 sletting hadde lenger PFS enn de andre, og ERCC1-positive pasienter uten ekson 19 sletting hadde kortere PFS enn de andre
Median PFS var signifikant bedre hos pasienter som aldri hadde røkt (P = 0,027) og hos pasienter som var ERCC1-negative (P = 0,039), mens det var relatert til andre faktorer, som for eksempel alder, kjønn, histologi, og EGFR mutasjon (tabell 6). Median OS var signifikant bedre hos pasienter med adenokarsinom (P = 0,014) og pasienter som aldri hadde røkt (P = 0,040), mens det var relatert til andre faktorer som alder, EGFR mutasjon, og ERCC1 (tabell 6). Figur 2C viser Kaplan-Meier plott konstruert ved hjelp av en kombinasjon av ERCC1 uttrykk og EGFR status. Pasienter med exon 19 sletting og lav ERCC1 uttrykk viste lenger PFS, mens de uten ekson 19 sletting og viser høy uttrykk for ERCC1 hadde kortere PFS. Vi undersøkte effekten av mutasjonsstatus og ERCC1 samtidig ved hjelp av Cox regresjon justert for faktorer som hadde vist seg å være signifikant assosiert med PFS eller OS ved log-rank test. Cox regresjonsanalyse viste at EGFR mutasjon og røykestatus (har aldri røkt) var signifikant assosiert med PFS (P = 0,045 for heterogenitet blant ekson 19 sletting, L858R og vill type; P = 0,013 for røyking). Parvise sammenligningen i forhold til villtype, viste at pasienter med exon delesjon 19 hadde signifikant lengre PFS enn de med villtype (HR, 0,484; 95% CI, 0,227 til 0,984;
P
= 0,045), mens pasienter med L858R ikke har vesentlig lengre PFS (HR, 1.050, 95% KI, 0,486 til 2,163, P = 0,897) (tabell 7). Som foreslått av figur 2C, Cox regresjon viste at ERCC1-negative pasienter med exon 19 sletting hatt lenger PFS, mens ERCC1-positive pasienter uten ekson 19 sletting hadde kortere PFS enn de andre. På den annen side ble ingen ERCC1 ekspresjon eller mutasjon status signifikant assosiert med OS. Cox regresjonsanalyse, inkludert faktorer vist å være signifikant assosiert med OS ved log-rank test, avslørte at han hadde aldri røkt og ha adenokarsinom var signifikant assosiert med OS (P = 0,021 for røykestatus, P = 0,047 for histologi). Men ingen signifikante assosiasjoner var tydelig for ERCC1 og EGFR mutasjonsstatus (tabell 8).
Diskusjoner
prospektive kliniske studier av EGFR-TKI behandling for NSCLC pasienter med aktiverende EGFR mutasjoner, som delE746-A750 (ekson 19) og L858R (ekson 21), har vist høye responsrater kliniske på ca 80%. Randomiserte kliniske studier for å sammenligne effekten av EGFR-TKI eller platinabaserte forbindelser som førstelinje kjemoterapi for pasienter med NSCLC husing EGFR mutasjoner [4] – [7] har vist at NSCLC pasienter med EGFR mutasjoner viser en dramatisk reaksjon på EGFR TKI og en lengre PFS enn de uten
EGFR
mutasjoner. Sammenfallende med disse resultatene, vår nåværende studie viste at median PFS var signifikant lenger i EGFR mutasjonspositive enn i EGFR mutasjon-negative pasienter. I IPASS studien, NSCLC pasienter med EGFR mutasjon viste en høyere svarprosent enn pasienter uten EGFR mutasjon når de mottok carboplatin og paclitaxel. Men PFS var ikke forskjellig mellom NSCLC pasienter med og uten EGFR mutasjoner som fikk cytostatika [8]. Disse resultatene tyder på at NSCLC pasienter med EGFR mutasjoner kan ha en tendens til å svare på cytotoksiske midler så som platinabaserte forbindelser. I samsvar med disse resultatene, fant vi også at NSCLC pasienter som hadde EGFR mutasjoner hadde en høyere svarprosent enn pasienter uten EGFR mutasjoner (36,9% vs 17,5%). Lin og Kalikaki et al. har rapportert at NSCLC pasienter som hadde EGFR mutasjoner viser en bedre respons på kjemoterapi, mens andre forskere har rapportert at forekomsten av EGFR mutasjoner ikke er korrelert med kjemoterapi respons [9] – [13]. Vi undersøkte sammenhengen mellom EGFR mutasjon og overlevelse, og fant at median PFS og OS var signifikant lengre hos pasienter med ekson 19 sletting som fikk platinumbasert kjemoterapi. Videre Cox regresjonsanalyse viste at EGFR mutasjon var signifikant assosiert med PFS og OS. Det har vært noen uenighet blant forskere med hensyn til sammenhengen mellom EGFR mutasjonsstatus og overlevelse etter konvensjonell kjemoterapi. Hotta et al. vist at EGFR mutasjon påvirket PFS, mens andre forskere funnet noen slik sammenheng [9] – [13]. To tidligere studier har indikert at NSCLC pasienter som hadde ekson 19 slettinger synes å være den mest responsive til EGFR-TKI [19] – [20]. Våre funn favorisere tolkningen at kjemoterapi er mer effektivt for pasienter som havnen EGFR mutasjon enn for de som er negative. Ytterligere undersøkelser for å bekrefte hvorvidt eller ikke EGFR mutasjon kan være prediktive for responsen til cytotoksiske midler.
For å forbedre prognosen for pasienter med NSCLC, en biomarkør som kan forutsi effekten av kjemoterapi er nødvendig. ERCC1 er en komponent av nukleotid-excision reparasjon veien, noe som er viktig for reparasjon av platina-DNA-addukter. Tidligere studier har vist at overekspresjon av ERCC1 en tendens til å være korrelert med motstand til platina-basert kjemoterapi [14] – [15]. NSCLC pasienter med lavt uttrykk for ERCC1 vise lengre overlevelse etter platinabasert kjemoterapi enn de som viser en høy ERCC1 uttrykk. Gandara et al. undersøkt sammenhengen mellom ERFR mutasjon og ERCC1 mRNA nivåer i 1207 NSCLC tumorprøver, og rapporterte at svulster som bærer aktiverende EGFR mutasjoner var mer sannsynlig å uttrykke lave nivåer av ERCC1 mRNA [17]. Re et al. rapporterte også at prøvene som bærer EGFR mutasjoner var sannsynlighet for å ha lav ekspresjon av ERCC1 [21], og Lee et al., ved hjelp av immunhistokjemi, funnet en signifikant korrelasjon mellom EGFR-mutasjon og lave nivåer av ERCC1 i tumorceller [22]. Etter avtale med disse resultatene, fant vi en signifikant sammenheng mellom ERCC1 uttrykk og EGFR mutasjon (P = 0,030). Selv om sammenhengen mellom EGFR mutasjon og ERCC1 har vært uklar, kan det bli postulert at en nedsatt kapasitet for DNA-reparasjon og syntese kan være korrelert med økt genom ustabilitet og tumor mutasjoner [23] – [24]. Oksidativt DNA skade og reparasjon bidra til utvikling av ulike menneskelige sykdommer, inkludert maligne [25]. I tidligere studier har vi vist at aktiverende mutasjoner av EGFR i NSCLC er nært assosiert med en redusert evne til å reparere DNA-skade indusert av 8-hydroksy-2′-deoksyguanosin (8-OHdG). En mulig mekanisme der 8-OHdG påvirker EGFR mutasjoner i NSCLC kan være svikt i basen excision reparasjonsprosessen for eliminering av oksidert DNA, noe som resulterer i styrking av EGFR mutasjoner og fremming av lunge kreftutvikling [25]. Det gjenstår å bli ytterligere studert hvordan ERCC1 kan påvirke mutasjoner av EGFR-genet i lungekreft.
Vi har undersøkt sammenhengen mellom PFS eller OS og EGFR mutasjon og ERCC1, og fant at median PFS var signifikant lengre hos pasienter som var ERCC1-negative (P = 0,039). Som tidligere studier har vist, NSCLC pasienter som er negative for ERCC1 vise lenger PFS [16]. Selv om vår Cox regresjonsanalyse viste ingen signifikant effekt av ERCC1 status på PFS eller OS, dette var en retrospektiv studie og antall pasienter var for liten til å bevise noen signifikante sammenhenger. Delsett analyse viste at ERCC1-negative pasienter med exon 19 sletting hadde lenger PFS enn de andre, mens ERCC1-positive pasienter uten ekson 19 sletting hadde kortere PFS enn de andre. Interessant, Gandara et al. funnet at kreftformer med ekson 19 strykninger hadde en tendens til å uttrykke lave nivåer av ERCC1 enn kreft med villtype eller L858R [17]. Disse funnene tyder på at median PFS og OS er betydelig bedre hos pasienter som ekson 19 sletting som mottar platinabasert kjemoterapi. To tidligere studier har indikert at NSCLC pasienter som hadde ekson 19 slettinger synes å være den mest responsive til EGFR-TKI [19] – [20]. Videre prospektive kliniske studier med NSCLC pasienter som OPTIMAL og EURTAC, har vist at exon19 pasienter har en gunstigere risikoforhold enn de med exon21 mutasjoner. På den annen side, prospektive kliniske studier av EGFR-TKI behandling for NSCLC pasienter med
EGFR
mutasjoner, som NEJ002 og WJTOG3405, har ikke vist forskjeller i respons mellom pasienter som hadde exon19 og exon21 mutasjoner. Vurderer denne situasjonen, er det fortsatt uavklart om EGFR exon19 slettinger er representerer en generelt positiv prognostisk faktor, uavhengig kjemoterapi ansatt. Vi favorisere tolkning som platina-basert kjemoterapi er mer effektivt mot ERCC1-negative og ekson 19-positiv NSCLC.
Mens de fleste NSCLC pasienter med
EGFR
mutasjoner ha nytte av behandling med EGFR-TKI, deres kliniske effekten av EGFR-TKI skiller mellom slike pasienter, og nesten alle personer hvert utvikle resistens mot disse stoffene. Ervervet resistens til EGFR-målrettede medikamenter er en av de største hindringer for ytterligere forbedring av kliniske resultater i dette feltet. Farging for ERCC1 kan være nyttig for stratifisering NSCLC pasienter for personlig chemotherapies. Fordi immunhistokjemisk påvisning av ERCC1 protein er enkelt og gjennomførbart i en klinisk setting, kan våre funn være allment gjeldende i denne sammenheng. Vår studie antyder potensielt lovende behandlingstilbud for NSCLC pasienter som opplever tilbakefall etter EGFR-TKI behandling.
Det var begrensninger i denne studien. Først antall pasienter inkludert var relativt liten. Sekund, den retrospektive natur studien ikke gir mulighet for en standardisert mål på PFS. For det tredje har vi tatt i peptid nukleinsyre (PNA) -locked nukleinsyre (LNA) PCR klemme metode for å identifisere de EGFR mutasjoner. Denne metoden er i stand til å detektere 11 forskjellige mutasjoner i nærvær av en 100- til 1000-ganger villtype-EGFR bakgrunn [16]. Disse mutasjoner 11 står for 95% av alle EGFR mutasjoner som finnes i japanske pasienter, noe som tyder på at de resterende 5% ikke kan oppdages av PNA-LNA PCR-klemme-metoden [21]. Derfor er det mulig noen pasienter hvor mutasjoner ikke ble oppdaget faktisk kan ha næret mutasjoner.
I konklusjonen, har vi funnet ut at ekson 19 sletting er assosiert med en lengre PFS hos NSCLC pasienter som fikk platinumbasert kjemoterapi. Våre funn tyder på at platina-basert kjemoterapi er mer effektivt mot ERCC1-negative og ekson 19-positiv NSCLC. Videre studier er garantert å avklare den kliniske nytten av immunhistokjemisk analyse av ERCC1 for bestemmelse av den optimale kreft terapeutiske regimet bruker EGFR-targeting narkotika.
