Type-A amino smørsyre reseptorer (GABARs) er de største aktørene i rask hemmende synaptisk overføring i den menneskelige hjerne. Disse reseptorer tilhører en superfamilie av pentamere ligand-gated ionekanaler som de Cys-loop-reseptorer. En reduksjon i GABAR signaliserer stasjoner hyperaktive nevrologiske lidelser som søvnløshet, angst og epilepsi. Her rapporterer vi den første X-ray struktur av en GABAR, menneske b3 homo pentamer, co-krystallisert med en roman agonist, benzamidine.
Det første vi fant at signalstoffet bindende lomme av GABARs ligger mellom ECDs. Som benzamidin er kjent som en meget potent serin-protease-inhibitor, derivater av disse er i kliniske studier for forhindring av blodkoagulasjon. Den benzamidine benzyl ring er stablet mellom sidekjedene Phe 200 og Tyr 62, der som sin amidinium gruppe danner hydrogenbindinger med Glu 155 sidekjeden.
Men gitt thatGABARb3 agonister slik som histamin handling i stedet som forsterkere av hetero GABARs, kan karakterisering av benzamidinderivater som positive modulatorer gir nye muligheter i utvikling av legemidler. Endelig har vi også identifisert til glykosyleringsstedet i GABAR.
Dette arbeidet gir et rasjonelt grunnlag for å forstå hvordan flere humane sykdoms mutasjoner påvirker GABAR montering, glykosylering og agonist bindende, samt signaloverføring og gating prosesser .
Som svar på hormon og stress, den cAMP respons element bindende protein (CREB) -regulated transkripsjonen coactivator 1 (CRTC1) er montert. C1 /M2 oncoprotein induserer unormal uttrykk for CREB og HAKK målgener. Her rapporterer vi en gevinst-of-funksjon aktiviteten til C1 /M2 oncoprotein som retter sine interaksjoner med myelocytomatosis onkogen (MYC) proteiner og aktivere MYC transkripsjons mål, inkludert cellevekst og metabolisme, overlevelse, og tumorigenesis.
For det første, anvendte vi en cellebasert funksjonell skjerm og fant at C1 /M2 coactivator aktivert MYC pathway. Dette ble bekreftet av co-immunoprecipitation.
Neste, vi undersøke hvilken rolle CRTC1 og M2 kompleks i HAKK veien. Humane tumorer har kombinert aktivering av MYC og CREB veier. MYC oncoprotein er overuttrykt i over 50% av alle krefttilfeller. Vi konstruerer en rekke slettinger å trekke ned interaksjonspartnere. Dette viser at domenet innenfor MAML2 som kreves for å kommunisere med hakk, og det er fraværende i C1 /M2-fusjonsprotein. Vi har også identifisert gener som reguleres av C1 /M2 med en Dox-induserbar transgen system.
Dette arbeidet antyder at protein interaksjon kan også være tydelig i andre oncoprotein fusjoner. Og at forbindelser rettet mot C1 /M2-MYC interaksjon representerer en attraktiv strategi for utvikling kreftbehandling i tumorer skjuler trans.
