Abstract
Bakgrunn
M2 pyruvat kinase (M2PK) er et oncoprotein skilles ut av kolorektal kreft i avføring. Denne første rapporten om riktigheten av en rask krakk test i deteksjon av tykktarmskreft (CRC).
Mål
For å bestemme sensitiviteten, spesifisitet og positiv og negativ prediktiv verdi av en rask , pasientnær krakk test M2 PK- den M2PK Hurtig.
Metoder
Fortløpende tilfeller av endoskopisk diagnostisert og histologisk påvist CRC ble rekruttert. Avføring ble samlet av pasienter og testet med Immunokromatografisk M2PK Hurtigtest (Schebo Biotech AC, Giessen, Tyskland). Kontrollene ble fortløpende valgt fra pasienter uten vesentlig kolorektal eller gastrointestinal sykdom gjennomgår koloskopi. CRC ble iscenesatt i henhold til AJCC iscenesette anvisningen (7
th Edition) og plasseringen av svulsten definert som proksimale eller distale.
Resultater
sensitivitet, spesifisitet, positiv prediktiv verdi, negativ prediktiv verdi og total nøyaktighet var: 93%, 97,5%, 94,9%, henholdsvis 96,5% og 96,0%. Den positive prediktive verdien for proksimale svulster var betydelig lavere sammenlignet med distal svulster. Ingen forskjeller ble sett mellom de ulike stadier av svulsten.
Konklusjoner
M2-PK Rask, rask, er point-of-care test en meget nøyaktig test i deteksjon av CRC. Det er lett og praktisk å utføre og et nyttig diagnostisk test for påvisning av CRC i en klinisk praksis innstilling
Citation. Sithambaram S, Hilmi jeg, Goh KL (2015) diagnostisk nøyaktighet av M2 pyruvatkinasepåviser Kort Krakk Test- A Rapid Kontor baserte analysen test for påvisning av tykktarmskreft. PLoS ONE 10 (7): e0131616. doi: 10,1371 /journal.pone.0131616
Redaktør: Lanjing Zhang, University Medical Center of Princeton /Rutgers Robert Wood Johnson Medical School, USA
mottatt: 17 januar 2015; Godkjent: 03.06.2015; Publisert: 09.07.2015
Copyright: © 2015 Sithambaram et al. Dette er en åpen tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet: All relevant data er i avisen og dens saksdokumenter filer
Finansiering:. studien ble finansiert av Alere Company. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Krakk testene som har blitt mye brukt i detectionand screening av tykktarmskreft (CRC) er basert på testing for okkult blod i avføring. De guaic baserte tester har vært i bruk i alongtime men lider av den ulempe at en høy falsk positiv resultdue av den iboende natur av den test som er avhengig av den oksidative kapasiteten til guaicsubstrate. Generelt guaic basert fekal okkult tester har limitedsensitivity og spesifisitet. I en studie, følsomheten av guaiac basert test (HemoccultSensa) var 79,4% og spesifisiteten var 86,7% [1]. Den guiac test er upraktisk å utføre som pasienter må gå på en begrenset diett flere dager før testen som inkluderer å unngå ulike typer mat som kan forårsake falsk peroksydasereaksjonen eller er antioksidanter og NSAIDs og acetylsalisylsyre. Disse problemer er blitt overvunnet ved den nyere fecal Immunokjemisk test (FIT) som detekterer globin-delen av humanhemoglobin. Globin som oppstår fra øvre mage-tarmkanalen blir raskt nedbrutt av fordøyelsesenzymer. Derfor disse test arehighly selektiv for okkult blødning av tykk- og opprinnelse. Følsomheten av FIT for påvisning av CRC er omtrent 70-90% [2-6].
M2-pyruvat kinase (M2-PK) er et isoenzym av pyruvat kinase, som er et nøkkelenzym i glykolysen der det katalyserer omdannelsen av fosfoenolpyruvat til pyruvat. Dette isoenzym er vanligvis en høyaktiv, tetramer form. Men i tumorvev, ved eksponering av oncoproteiner, M2-PK omdannes til en mindre aktiv dimerisk form, en endring som er nødvendig for tumor metabolismen [7]. M2-PK er ikke spesifikk for en hvilken som helst tumor og er blitt rapportert å bli funnet i forskjellige krefttyper, inkludert nyre, spiserøret, mave, bukspyttkjertel, kolorektal, lunge, eggstokk og brystkreft [8] .M2-PK er blitt funnet i blod og avføring i ulike kreftformer, og dermed blitt brukt i kreft screening eller påvisning og oppfølging for å oppdage tilbakefall.
i CRC, kan tumor M2-PK er utgytt i colonic lumen andtherefore påvises i avføring av pasientene. Dette danner grunnlaget for M2-PK krakk test. Bruken av M2-PK test krakk ble først rapportert av Hardt et al i 2003 whenthe forfatterne rapporterte kvantifisering av M2 PK nivåer i avføring, og foreslo at det kan være nyttig i CRC-screening [9] Siden da har flere valideringsstudier har nå blitt utført ; hovedsakelig på vestlige pasienter og vist seg å ha en ganske høy sensitivitet og spesifisitet.
Nylig en nyere versjon av M2-PK Test- den raske kontoret basert kvalitativ test-M2PK Hurtig ble introdusert for klinisk bruk. Dette er den første studien som validere M2PK Hurtig for påvisning av CRC.The Hensikten med denne studien er å finne den diagnostiske nøyaktigheten av M2-PK Hurtig krakk test i deteksjon av CRC.
Metoder
Dette er en kasus-kontrollstudie som ble gjennomført ved University of Malaya Medical Centre (UMMC) fromJanuary 2013 til desember 2013. Godkjenning for studien var spesielt hentet fra Institutional Review Board av sykehus: etikkutvalg av UMMC og studien ble utført i henhold til ICH-GCP retningslinjene. En pakningsvedlegg og en skriftlig samtykkeskjema, som er standard policy, ble godkjent av komiteen. Studien tar sikte på og prosedyrer ble forklart i detaljerte til alle deltakerne. Pakningsvedlegget og skriftlig samtykke ble gitt til alle deltakere. Alle skriftlige samtykkeerklæringer innhentet ble holdt i journalen filer av hver pasient.
Fortløpende pasienter med CRC histologisk bekreftet på koloskopi og biopsi ble rekruttert til studien. Den casesconsisted av pasienter som gjennomgår CRC screening (asymptomatisk) eller pasienter som presenteres med symptomer og tegn på CRC (tenesmus, endring i avføringsmønster, PR blø og vekttap). Kontrollene besto av påfølgende pasienter som hadde gjennomgått screening koloskopi uten tegn til CRC, adenomasnor dysplasi og wereotherwise sunt. Kontrollpersoner som hadde noen klinisk mistanke om GI svulst var excluded.The rekruttering forholdet mellom saker og kontroller var 1: 2. Diagnosen CRC ble bekreftet på biopsier og resected kirurgiske prøver som sendes til histopathologicalexamination.CRC pasienter ble subcategorized ifølge svulst plassering og iscenesettelse. For iscenesettelse, ble det amerikanske Joint Committee on Cancer (AJCC) klassifikasjon basert på CT scan og på operative funn brukt. Tumor plassering ble kategorisert som enten proksimale (cecum, ascendingcolon, hepaticflexure, tverrgående tykktarmen og milten flexure) eller distal (synkende kolon, sigmoidcolon, endetarm og anal kanalen).
Innsamling av avføring prøven og testing for M2-PK
krakk testing for M2PK ble utført av en enkelt opplært personell som var blindet for resultatene av colonoscopy.Stools var samlet enten før koloskopi og tarm forberedelse ble utført eller minst en uke etter koloskopi . «Frisk» avføringsprøver ble testet så snart oppsamlet. Dersom testingen ikke var mulig, ble avføringsprøver holdt på 4
0 C i kjøleskapet for ikke lenger enn 24 timer.
Testing for M2-PK protein i avføringen av pasientene ble utført ved hjelp den raske, poenget med omsorg, ble M2-PKQuickTest (ScheBoBiotech AG, Giessen, Tyskland) .Thetest utført i henhold til produsentens anvisninger. Tolkningen basert på utseendet av båndene i test (T) og kontroll (C) områder av strimmelen når et solubilisert avføringsprøven er plassert. Den M2PK Quick-testen er en Immunokromatografisk hurtigtest. Når M2PK proteinet er til stede i avføringen, reagerer det med et monoklonalt antistoff bundet til gullpartikler og danner en gull-merket kompleks, kalt antistoff-M2PK kompleks. Dette komplekset er så vandrer langs membranen og nådde Test linjen (T) som har andre monoklonalt antistoff vil binde seg til dette antistoffet-M2PK kompleks, og deretter utvikle en rosa farge linje på T.
Stard Retningslinjer
undersøkelsen ble rapportert i henhold til standarder for rapportering av diagnostisk nøyaktighet studier retningslinjer.
Statistisk analyse
Statistisk analyse ble gjort ved hjelp av SPSS versjon 16 for Windows (SPSS Inc, Chicago , Illinois). For grunnlinjen demografi, ble Student t-test og Chi-kvadrat test brukes der det er aktuelt. Følsomhet, spesifisitet og positiv og negativ prediktiv verdi av den raske serologi-testen ble beregnet mot gullstandarden for diagnostisering av CRC basert på histologisk bekreftelse. 95% konfidensintervall (CI) ble beregnet for andeler av disse verdiene.
Resultater
Ett hundre og femten pasienter ble diagnostisert til å ha CRCduring perioden av studien. Imidlertid krakk samplescollected hensiktsmessig ble oppnådd fra kun 100 pasienter og testet for M2-PK protein. Likeledes ble avføringsprøver spurt fra 213 forsøkspersoner med normal koloskopi, men bare 200 tilfeller ble riktig samlet og testet for M2-PK protein (fig 1).
baseline demografi av kreft og kontrollsaker er oppsummert i tabell 1. det var flere kinesere i kreft gruppen sammenlignet med de andre to viktigste etniske løp i Malaysia, malayer og indere. Dette er i tråd med data fra den malaysiske nasjonalKreftRegisteret som viser høyest forekomst av CRC er blant de kinesiske etniske gruppen. Det var ingen signifikante forskjeller i gjennomsnittsalder og kjønnsfordeling blant sakene og kontrollene.
sensitivitet, spesifisitet, positiv prediktiv verdi, negativ prediktiv verdi og generelle nøyaktigheten av M2-PK test var følgende; 93%, 97,5%, 94,9% henholdsvis 96,5% og 96,0% (tabell 2). I de 5 pasientene med en falsk positiv M2-PK test, en gastroskopi, en gjentakelse koloskopi og grunnleggende laboratorieprøver ble utført som alle ble funnet å være negative.
Sub-analyse basert på tumor plassering og iscenesettelse
diagnostisk nøyaktighet av testene i henhold til tumor plassering. Av de 100 pasientene, 87 var distale svulster og 13 var proksimale. Følsomhet, spesifisitet, positiv prediktiv verdi og negativ prediktiv verdi av M2-PK test i henhold til tumor sted er oppsummert i Tabell 3. Det var nosignificant forskjeller når det gjelder spesifisitet, negativ prediktiv verdi og generelle nøyaktigheten av testen. Thesensitivity var tallmessig lavere, men bare den positive prediktive verdien var betydelig lavere for proksimale enn distale svulster (p = 0,010).
sensitivitet, spesifisitet, positiv prediktiv verdi og negativ prediktiv verdi av M2- PK test i henhold til tumor stagingis oppsummert i Tabell 4. det var nosignificant forskjeller når det gjelder følsomhet, spesifisitet, positiv og negativ prediktiv verdi og nøyaktighet av M2-PK test for de ulike kreftstadier.
diskusjon
M2-PK fecal test er en roman test i deteksjon av CRC. Som proliferatingtumour celler skur M2-PK lett fra overflaten av tumoren, vil denne testen tillate oss å pålitelig detektere kreft fra mage-tarmkanalen
To typer av fekal M2-PK test finnes:. En kvantitativ test ELISAbased laboratorietest og aqualitativepoint omsorg Immunokromatografisk test. Et kontor-baserte, pasientnær test for krakk påvisning er ikke så praktisk som en lignende test for blodprøver som resultat som ikke vil være umiddelbart tilgjengelig. Avføring vil vanligvis måtte hentes på en egen anledning og vanligvis hjemme. Imidlertid gjør denne testen opptatt lege i klinisk praksis for å utføre testen på egen klinikk med resultater som er tilgjengelig nesten så snart som avføringsprøven er submitted.On annen side krever en kvantitativ test avføringen sampleto sendes til en brønn nokså utstyrt laboratorium med en ELISA-leser og withtrained personell, som krever flere timer før resultater kan oppnås.
M2PK kvantitative testen har vært mye testet og har vist en følsomhet som strekker seg 73-97% og spesifisitet 78,6 til 100,0 % [10-17]. (Tabell 5). Men til dags dato har det ikke vært noen validering av den raske pleie M2-PK Rask krakk test og vår studie isthefirst rapportert studien. I vår erfaring, Vihar funnet den raske M2-PK fecal test for å være en svært nøyaktig test med en samlet diagnostisk nøyaktighet på 96% med en sensitivitet på 93% og en spesifisitet på 97,5% .Vi fant at testen er enkel og praktisk å utføre med minimal håndtering av avføring. Testen kan utføres ganske raskt (innen 10 min), og resultatene basert på kolorimetriske endringer med utseendet av vertikale band, lett å lese.
Vår studie har også vist at testen er svært nøyaktig uansett av fasen av tumor, selv om dette er i motsetning til andre studier. For eksempel, Shastri og kolleger fant en signifikant høyere andel av pasienter med Dukes C og D kreft (89,5%) sammenlignet med Dukes A og B kreft (63,9%) som har en positiv kvantitativ M2-PK test [17]. Dette er basert på en forhåndsdefinert cut-off-nivået av 4 U /ml, som er det samme snitt av verdien som brukes i vår hurtig kvalitativ test. I vår studie ser det også at testen er svært nøyaktig uavhengig av svulst plassering selv om følsomheten ser ut til å være noe lavere i proksimale sammenlignet med distal tumors.However, tallene for hver svulst stadium i vår studie er små med vide konfidensintervall, og resultatene må derfor tolkes med forsiktighet.
Hvordan har M2PK test utført i deteksjon av CRC? I vårt tilfelle kontroll studie har vi inkludert pasienter med overt CRC og ikke har pasienter withvery tidlig CRC begrenset til slimhinnen. Saker med kolorektal adenom ble ikke inkludert i studien. I en ganske stor screeningundersøkelse i en tysk populasjon, ved hjelp av laboratoriebaserte EISA-analyse og ser spesielt på kolorektale adenomer, krakk M2-PK viste en lav sensitivitet på bare 22% og 23% for avansert og ikke-advancedadenomas (tidlig og mellomprodukt) henholdsvis selv om en spesifisitet på 82% ble rapportert [18]. Tilsvarende i et nederlandsk studie av Mulder et al, med en mindre prøve størrelse, fant forfatterne følsomhet på 27% og 29% for avansert og ikke langt fremskredet adenomasrespectively med en spesifisitet på 90% [15]. I en annen tysk studie av Shastri et al, følsomheten for påvisning av store adenomer (definert som er større enn 1 cm) ble 44,4% for proksimale lesjoner og 50,0% for fjerntliggende lesjoner [17] .Derfor, vises M2-PK å ha begrenset rolle i å detektere ikke avanserte og avanserte adenomer.
det andre punktet å vurdere var at både symptomatiske og asymptomatiske pasienter ble rekruttert til studien som ble fortløpende funnet å ha CRC. Det er ikke klart hvorvidt M2-PK test vil ha lignende diagnostisk nøyaktighet i et rent asymptomatiske som en del av en CRC screening program som man kunne hevde at symptomatiske pasienter krever en koloskopi uansett. Men i et utviklingsland som for eksempel Malaysia hvor endoskopiske tjenester fortsatt begrenset, kan det hende at M2-PK test tillate risiko stratifisering i form av behov og timing for koloskopi.
En annen problemfaktor i klinisk praksis vil være tilstedeværelsen av samtidig betennelse i tykktarmen. Positive tester har også blitt rapportert hos pasienter med inflammatorisk tarmsykdom, som utgjør en «falsk positiv» test. I en liten gruppe pasienter, Mulder etal viste at i IBD pasienter, M2-PK testen var positiv i 15 av 19 (78,9%) [15]. I en studie av Walkoniak og kolleger, nivået av M2-PK var ganske signifikant høyere hos pasienter med pouchitt følgende ileo-anal anastomose for ulcerøs kolitt [19]. I en annen multisenterstudie, opptil 88% av pasienter med ulcerøs kolitt og Crohns sykdom hadde forhøyede M2-PK nivåer [20]. I en populasjon hvor IBD er ikke uvanlig, kan disse funnene negere mot bruk av denne testen for påvisning av CRC. I en studie fra nabo Indonesia, hadde forfatterne rapporterte verdien av M2-PK positive tester for å påvise kreft hos pasienter med IBD, infeksiøs kolitt og amebic kolitt [21]. Men det var ingen omtale av M2-PK nivå eller antall av «falske positive» tester hos disse pasientene i fravær av cancer.A prospektive studien å studere nøyaktigheten av denne testen over hele spekteret av tarmsykdom i klinisk praksis vil være viktig og vil gi oss mulighet til å bedre definere sin rolle i screening av CRCs.Finally, tilstedeværelse av avføring M2-PK betyr ikke nødvendigvis indikerer tilstedeværelse av CRC alene og omsorg bør tas for å utelukke sykdom i øvre mage-tarmkanalen og i den pancreatico galletreet.
den mest brukte krakk test for screening for CRC forbli fekal okkult baserte tester og det har vært studier som sammenligner nøyaktigheten av M2-PK forhold til disse testene. Sammenlignet med guaic basert FOBT for påvisning av CR adenomer, en meta-analyse av Tonus et al sammenslåing av selskapets resultater fra 4 studier viste signifikant bedre oppklaringsprosenten med M2PK test for adenomer både mindre og morethan1cm i størrelse [22]. Den kvantitative M2-PK test har blitt sammenlignet med den nyere immunkjemiske fekal okkult blod testing. Shastri et al viste at følsomheten av både iFOBT og M2-PK test var svært like for tidlig stadium samt avansert CRC [17]. I en annen studie ble M2-PK krakk test sammenlignes med to iFOBT tester for påvisning av adenomer og viste igjen tilsvarende diagnostisk treffsikkerhet med alle 3 tester som viser en lav sensitivitet på 28-40% [15] .Derfor er M2-PK test et levedyktig alternativ til tilgjengelige fekal okkult blod tester.
Men som den viktigste nytten av avføring basert testing er for screening i en asymptomatisk befolkningen, bør en fremtidig studie planlegges for å se på sensitivitet, spesifisitet og total nøyaktighet av den raske punkt ofcare M2-PK test i en screening befolkning og sammenligne den med den raske punktet av omsorg (kvalitativ) FIT. En annen mulighet ville være bruk av begge tester i kombinasjon, selv om kostnadseffektiviteten av denne strategien må bestemmes. En studie av Leen på al [23] fant at tillegg av den kvantitative M2-PK test til standard FIT oppdaget flere adenomer på et tidligere stadium
Konklusjoner
M2-PKQuick, rapidpoint -av-omsorg test som har vist seg å være en meget nøyaktig test i deteksjon av CRC. Det er lett og praktisk å utføre i et legekontor. Det er absolutt en nyttig diagnostisk test for påvisning av CRCin en klinisk praksis setting.
Hjelpemiddel Informasjon
S1 Sjekkliste. Stard sjekkliste for rapportering av studier av diagnostisk nøyaktighet
doi: 10,1371 /journal.pone.0131616.s001 plakater (docx)
Takk
Alere gitt økonomisk støtte og forsyning av testsett. Spesiell takk til Mr Joachim Hevler, International Medical Director, Alerefor teknisk støtte og generelle råd. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet. Vi ønsker å erkjenne hjelp av DrAusama av kolorektal kirurgi med hjelp i samlingen av saker og Ms SashikalaMayakrisnan (vitenskapelig assistent) for datainnsamling og avføring testing.
