Abstract
Nylig, ETS-relaterte genet (
ERG
) genet rearrangements, fosfatase tensin homolog (
PTEN
) slettinger og
EGFR
familie avvik ble karakterisert som potensielle biomarkører for prostatakreft (PCA) pasientbehandling. Selv
ERG
genet omorganisering har blitt identifisert i ca 50% av lokaliserte prostata kreft i vestlige land, forblir den prognostiske betydningen av denne kritiske molekylære hendelsen ukjent hos kinesiske pasienter. Ved hjelp av fluorescens in situ hybridisering (FISH) og immunhistokjemi, vi evaluert
ERG
,
PTEN Hotell og
EGFR
familie avvik i en kohort av 224 kinesiske prostatakreftpasienter diagnostisert i transuretral reseksjon av prostata (TUR-P). Overall,
ERG
omorganisering ble påvist i 23,2% (44/190) tilfeller, hvorav 54,5% (24/44) viste sletting av 5’end av
ERG
.
PTEN
sletting ble identifisert i 10,8% (19/176) tilfeller. Forsterkning av
EGFR Hotell og
HER2
gener var til stede i 1,1% (2/178) og 5,8% (10/173) av tilfellene, henholdsvis. Signifikant korrelasjon mellom
ERG
omorganisering og
PTEN
sletting ble identifisert i denne kohorten.
EGFR Hotell og
HER2
avvik forekom oftere hos PCas uten
ERG
omorganisering enn hos dem med
ERG
omorganisering, selv om dette nådde ikke statistisk signifikans . Overall,
ERG
omorganisering ble assosiert med pre-operative PSA-verdier (P = 0,038) og kreft-relaterte dødsfall (P = 0,02), men ikke med alder, klinisk T scenen, Gleason score, eller ki- 67 merking indeks (LI). Spesielt, multivariat analyse inkludert kjente prognostiske markører avslørt
ERG
omorganisering var en uavhengig prognostisk faktor (P = 0,022). I tillegg
ERG
omorganisering status ble nyttig for å identifisere pasienter med dårlig prognose fra PCa gruppen med lav Ki-67 LI. I sammendraget, rapporterte vi at
ERG
omorganisering ble assosiert med kreft-relaterte dødsfall i kinesiske PCA pasienter. Fastsettelse av
ERG
omorganisering status tillater lagdeling av PCA pasienter i ulike overlevelses kategorier
Citation. Qi M, Yang X, Zhang F, Lin T, Sun X, Li Y, et al. (2014)
ERG
Omorganisering er assosiert med prostatakreft relaterte dødsfall i kinesiske prostatakreftpasienter. PLoS ONE 9 (2): e84959. doi: 10,1371 /journal.pone.0084959
Redaktør: Jindan Yu, Northwestern University, USA
mottatt: 15 august 2013; Godkjent: 20 november 2013; Publisert: 07.02.2014
Copyright: © 2014 Qi et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Denne forskningen ble støttet av Natural Science Foundation National of China (tilskudds tall 81072110 og 81171951); Stiftelsen Forsknings of Health Department of Shandong (tilskudd nummer 2011HZ037). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Prostatakreft (PCA) er en heterogen sykdom med en variabel naturhistorie [1], [2]. Det er anslått at bare en liten brøkdel av pasientene lider av potensielt livstruende sykdom som krever aggressiv behandling. Foreløpig kan de etablerte prognostiske faktorer (Gleason score, patologisk stadium og serum prostata-spesifikt antigen (PSA)) ikke nøyaktig skille klinisk aggressiv PCas fra klinisk lat seg [3], [4]. Dermed er nye prognostiske biomarkører sterkt behov for PCa pasientbehandling.
Nylig, tilbakevendende Genfusjonene involverer ETS familien av transkripsjonsfaktorer,
ERG
,
ETV1
,
ETV4
,
ETV5 Hotell og
ELK4
, smeltet til androgen-regulert gen
TMPRSS2
eller andre oppstrøms partnere, har blitt identifisert i de fleste PCas i vestlige land, [5] – [8]. Blant disse avvikene,
ERG
omorganisering, som hovedsakelig resultater fra
TMPRSS2-ERG
fusjon, er mest utbredt og forekommer hos ca 50% av lokaliserte PCas [8]. Som
TMPRSS2 Hotell og
ERG
ligger ~3 Mb hverandre på kromosom 21, omorganisering mellom dem skjer enten gjennom innsetting eller av en interstitiell sletting (Edel) [6].
TMPRSS2-ERG
fusjon fører til overuttrykk av ERG, som kan spille en avgjørende rolle ved PCA utvikling [8]. Til dags dato, den prognostiske betydningen av
ERG
omorganisering ved PCA fortsatt kontroversielt. Selv om flere studier har indikert at
ERG
omorganisering ensidige dårligere prognose [9] – [12], mens andre enten funnet en gunstig prognostisk forening [13] – [17] eller ingen assosiasjon med klinisk utfall [18] – [20]. Av notatet, de fleste av disse dataene er fra kaukasiske pasienter i vestlige land. Selv om den nye data foreslo tydelig forekomst av
ERG
omorganisering i PCas mellom ulike etniske grupper [21], [22], er overlevelsesanalyse av
ERG
avvik sjeldne i asiatiske populasjoner.
PTEN plakater (fosfatase og tensin homolog slettet på kromosom 10) er en nøkkel tumorsuppressorgen ved PCA [23]. Sletting av
PTEN
forekommer i 20-70% av PCas og har vært knyttet til rask tumorprogresjon og tidlig tilbakefall [24]. Tidligere har vi og andre rapporterte signifikant sammenheng mellom
PTEN
sletting og
ERG
omorganisering både i lokal og metastatisk PCas [25]. Nye kliniske data har antydet at
PTEN
sletting og
ERG
omorganisering kunne brukes til prognostisk lagdeling av PCA pasienter [26].
epidermal vekstfaktor reseptor (
EGFR
) og
HER2
hører til
EGFR
familie og er kjent for å regulere celledeling, differensiering, angiogenese, og overlevelse. Forsterkning og over-uttrykk for
EGFR Hotell og
HER2
har blitt beskrevet ved PCA og assosiert med kreft progresjon, dårlig prognose eller utvikling av androgen uavhengighet [27]. Likevel så langt, koblingen mellom
ERG
omorganisering og genetiske avvik av
EGFR Hotell og
HER2
fortsatt uklart.
Ki-67 LI er en klassisk markør proliferasjon og har blitt funnet å være en prediktor for utfall for PCA pasienter behandlet med radikal prostatektomi [28], [29] eller radioterapi. Ki-67 har dukket opp som en av de globale prediktive markører for behandlingsresultat i PCA pasienter.
Hensikten med denne studien var å undersøke om
ERG
omorganisering var assosiert med en mer aggressiv fenotype av PCa. Heri vi systematisk preget frekvens og prognostisk betydning av
ERG
omorganisering i en stor kohort av kinesiske PCA pasienter (n 200). Vi videre stilling til om
ERG
omorganisering kan benyttes som en prognostisk indikator og gi ytterligere verdi i prognostisk analyse. I tillegg er forholdet mellom
ERG
genet omorganisering med andre molekylære markører, inkludert
PTEN
sletting og genetiske avvik av
EGFR Hotell og
HER2, etter var også undersøkt.
Materialer og metoder
pasienter
totalt 224 PCA pasienter som gjennomgikk tumorreseksjon etter transuretral reseksjon av prostata (TUR-P) ble inkludert i vår studie. Tumormålinger ble tatt av Qilu Hospital of Shandong University (Jinan, Kina), ble The Affiliated Hospital of Qingdao University (Qingdao, Kina) og Liaocheng General Hospital (Liaocheng, Kina) mellom 2003 og 2011. Alle disse pasientene innlagt på sykehus på grunn av symptomer på nedre veier urinveisobstruksjon. Åttifem PCA pasientene i studien hadde transrectal ultralyd
–
guidet prostatabiopsi og 63,5% (54/85) tilfeller hadde randsone kreft som utvidet til overgangssonen. Ingen av pasientene fikk preoperativ stråling eller androgen deprivasjon terapi. Anti-androgen Flutamide terapi ble fulgt etter kirurgi og oppfølgingsdata var tilgjengelig for 190 pasienter, alt fra 3 til 147 måneder (gjennomsnittlig 47 måneder). Fordi antall ikke-PCA dødsfall (n = 17) var begrenset i denne kohorten, prostata kreft-relaterte dødsfall nærmet totaldødelighet. De kliniske og patologiske kjennetegn ved 190 PCA tilfeller i vår kohort er oppsummert i tabell 1. Tre microarray (TMA) ble satt sammen ved hjelp av en manuell vev arrayer; for hvert tilfelle ble to kjerner (1,0 mm i diameter) tatt fra hver representative tumor fokus og morfologi ble verifisert ved tre patologer (M.Q., B.H. og X.Y.). En 4 mikrometer seksjon skjema hver TMA ble farget med H E for å bekrefte tilstedeværelse av tumor i PCA tilfeller. Detaljert klinisk og patologisk profil ble hentet fra pasientjournaler og vedlikeholdes på en sikker relasjonsdatabase med TMA data. Informerte skriftlig samtykke ble innhentet fra PCA pasienter og denne studien ble godkjent av Institutional Review Board ved School of Medicine of Shandong University og lokale etikk.
Fluorescence
in situ
Hybridisering (FISH)
En tidligere beskrevet dual-color inter break-apart FISH analysen ble utført for å påvise
ERG
omorganisering [25]. Bakterie kunstige kromosomer (BACS) ble oppnådd fra (Oakland, California) den BacPac Resource Center, og sonder RP11-95I21 (5 «til
ERG
) og RP11-476D17 (3′ til
ERG
) ble fremstilt som beskrevet [25]. Integriteten og riktig lokalisering av alle prober ble verifisert ved hybridisering til metafase sprer av normale perifere lymfocytter. For å oppdage
PTEN
sletting, de kommersielt tilgjengelige DNA-prober for cytoband 10q23 (Spectrum Orange
PTEN
locus-spesifikk probe) og region 10p11.1-q11.1 (Spectrum Grønn cent av kromosom 10 probe) (LSI
PTEN Twitter /CEP 10; Vysis Inc. Des Plaines, IL, USA) for kromosom identifikasjon ble utnyttet.
PTEN
genomisk probe strekker seg over 368 kb og 166 kb starter fra 5′-enden av genet og strekker seg 98 kb forbi 3′-enden av genet. Vurdering av
EGFR Hotell og
HER2
genet avvik ble utført ved hjelp av GLP
EGFR Twitter /CSP 7 probe og GLP
HER2 Twitter /CSP17, henholdsvis (GP Medical Technologies, Beijing, Kina).
Interphase FISH ble utført som tidligere beskrevet [25], [30]. Lysbilder ble undersøkt ved hjelp av en ImagingZ1 mikroskop (Carl Zeiss, Oberkochen, Tyskland). FISH signalene ble scoret manuelt (100 × olje nedsenking) i morfologisk intakte og ikke-overlappende kjerner av to patologer (B.H., og M.Q.), og minst 50 kreftceller fra hvert område ble registrert. Kreft områder med svært svak eller ingen signaler ble registrert som utilstrekkelig hybridisert. Tilfeller mangler svulstvev i alt to kjerner ble ekskludert.
For å validere sletting av
PTEN Hotell og forsterkning av
EGFR Hotell og
HER2
, vi benyttet en tidligere dokumentert metode med mindre endring [25], [31]. I korthet basert på hybridisering i fem kontroll kjerner (data ikke vist), hemizygous delesjon av
PTEN
-genet ble betegnet som 50% kjerner (gjennomsnitt ± standardavvik 3 i ikke-neoplastiske kontroller) inneholdende enten en signal av locus sonde og ≥2 signalene fra referansesonden (absolutt sletting), eller to signaler med locus sonde og ≥4 signalene fra referanse-probe (relativ sletting). Homozygot delesjon av
PTEN
ble utstilt ved samtidig mangelen på begge
PTEN
locus signaler og tilstedeværelsen av styresignaler i 30% av cellene. Prøvene ble vurdert forsterket for
EGFR
når 10% av kreftceller vises enten
EGFR
: CEP 7 ratio 2 eller utallige trange klynger for signaler om locus sonde (3-5copies ).
EGFR
kopitall vinning ble definert som et lavt kopitall økning på grunn av kromosom 7 polysomy. Tilsvarende prøver ble vurdert forsterket for
HER2
når 10% av kreftceller vises enten
HER2
: CEP 17 ratio 2 eller utallige trange klynger for signaler om locus sonden (3 -5copies).
HER2
kopitall gevinster ble definert som et lavt kopiantall økning på grunn av kromosom 17 polysomy. Representant FISH bilder av
ERG
omorganisering ble vist i Figur 1. Figur 2A og 2B demonstrert representative tilfeller med
PTEN
sletting samt
HER2
forsterkning.
(A) Skjematisk kart over «
TMPRSS2
« og «
ERG
« posisjon på 21q22.2-22.3. T og C orientere mot telomeric og centromeric regioner, henholdsvis. BACS ligger 5 «og 3» til
ERG
ble brukt som prober for inter FISH. Kromosom koordinater er fra mars 2006 build av det menneskelige genom med UCSC Genome Browser.
TMPRSS2 Hotell og
ERG
loci er atskilt med ca 3 Mb. (B) FISH ble utført ved hjelp av BACS som indikert med den tilsvarende fluorescerende etiketten på formalinfiksert parafin-vevssnitt for innbrudd hverandre FISH av
ERG
genet. (B F),
ERG
omorganisering positive (translokasjon) tilfelle viste ett par split 5 «og 3» signaler. (D G),
ERG
omorganisering positive (med sletting) tilfelle viste tap av en grønn merket probe 5 «til
ERG
(A1. -A3) FISH bilder av angret, hemizygous og homozygot
PTEN
sletting ved PCA. A1,
PTEN
sletting negative tilfelle viste begge de parede røde signaler (10q23 /
PTEN
locus) og grønne signaler i kreftceller. A2, Representant tilfelle med
PTEN
hemizygous sletting viste en rød signaler og par grønne signaler i kreftceller. A3, Representant tilfelle med
PTEN
homozygot delesjon viste fravær av røde signaler, men beholdt par grønne signaler. For alle analyser, ble minst 50 kreftcellekjerner evaluert. (B1-B3) Påvisning av HER2 uttrykk ved IHC og FISH ved PCA. B1, FISH analyse av representative saken uten
HER2
forsterkning. B2, FISH analyse av saken med
HER2
forsterkning. B3, viser HER2 IHC-farging fullstendig membranøs reaktiviteten av sterk intensitet (3+) i tumorceller (opprinnelig forstørrelse x 200). (C1-C3) Ki-67 farging av IHC i PCA celler. C1, ingen farging (0) av Ki-67 i tumorceller. C2, Low Ki-67 (LI 10%) atom positivitet i tumorceller. C3, High Ki-67 (LI≥10%) atom positivitet i tumorceller.
Immunohistochemistry
Immunohistochemistry (IHC) for PTEN, EGFR og HER2 ble utført ved hjelp av en polymer basert metode (EnvisionTM + Dual Link System-HRP). Kilder og fortynninger av primære antistoffer var som følger: anti-PTEN (cellesignalisering, 1:100), anti-EGFR (DAKO, 1:500), anti-HER2 (DAKO, 1:500) og anti-Ki67-antistoff (DAKO , 1:100). Seksjoner fra TMA (4 um) ble deparaffinized og fremstilt ved suksessive passeringer gjennom xylen og grad av konsentrasjon av etanol som rutinemessig prosedyre, deretter antigener ble hentet av trykkoker å bruke en citratbuffer (0,01 M), i 8 minutter 120 ° C. Endogen peroksidaseaktivitet ble blokkert ved inkubasjon med 0,3% hydrogenperoksid-løsning i 15 min. Vevssnittene ble inkubert over natten ved 4 ° C med primære antistoffer. Etter vasking i PBS ble delene behandlet med EnvisionTM + Dual Link System-HRP-reagens ved romtemperatur i 30 min. 3, 3′-diaminobenzidintetrahydroklorid ble anvendt som kromogen i 3 minutter og vevssnittene ble motfarget med hematoksylin.
farging av EGFR og HER2 ble semikvantitativt evaluert basert på intensiteten av membranen reaktivitet etter den opprinnelige DAKO Herceptest kriteriene med en terskel på 10% immunopositive celler. Poengsystemet ble beskrevet andre steder [27]. Evaluering av PTEN var basert på den cytoplasmatiske fargeintensitet; tumorene ble delt inn i tre kategorier som tidligere beskrevet [25]. Grad 2 viste økt eller lik fargeintensitet sammenlignet med tilsvarende normalt vev; klasse 1 hadde redusert fargeintensitet og grad 0 demonstrerte fullstendig fravær av farging. Ki-67-merkeindeksen (LI) ble definert som den fraksjon av tumorceller som viser en hvilken som helst kjernefysisk Ki-67 immunoreaktivitet og er å betrakte som høy når 10% eller flere av de tumor kjerner var farget. For dette formål ble 100-200 tumorcellene analysert for hvert enkelt tilfelle. Representative immunhistokjemiske bilder av Ki-67 ble vist i figur 2C.
Statistical Analysis
Statistiske analyser ble utført ved hjelp av statistikkprogrammet for samfunnsvitenskap, versjon 19.0 (SPSS), med et signifikansnivå på 0,05 (to-halet sannsynlighet). Pearsons χ2 test og Fishers eksakte test ble brukt for å vurdere sammenhengen mellom
ERG
omorganisering og klinisk-patologisk variabler samt andre molekylære avvik. Kaplan-Meier analyse ble benyttet for å vurdere den prognostiske verdien av
ERG
omorganisering i PCA pasienter. Den prognostiske verdien av
ERG
omorganisering ble videre bestemt i univariable og multivariabel analyse, inkludert PSA-verdier på diagnose, Gleason score, klinisk tumorstadium, fjernmetastaser, Ki-67 LI og
EGFR
familie gen avvik.
Resultater
Frekvens av
ERG
Omorganisering,
PTEN
Sletting og
EGFR
Familie avvik
Totalt
ERG
ble omorganisert i 23,2% (44/190) av kinesisk PCA pasienter, hvorav 54,5% (24/44) demonstrerte sletting av 5’end av
ERG
. Interessant, to av disse 24 tilfellene påvist to eksemplarer av 3 «-
ERG
signaler, noe som tyder duplisering av
ERG
omorganisering.
PTEN
sletting ble identifisert i 10,8% (19/176) av tilfellene, med hemizygous og homozygot slettinger til stede i 12 av 19 (63,2%) og 7 av 19 (36,8%) tilfeller, henholdsvis. Forsterkning av
HER2
ble identifisert i 10 av 173 (5,8%) svulster og polysomy av kromosom 17 ble registrert i 41 av 173 (23,8%) tilfeller. Derimot, bare to av 178 (1,1%) tilfeller viste forsterkning av
EGFR
med polysomy av kromosom 7 er til stede i 18 av 178 (10,1%) svulster.
Relasjoner mellom
ERG
omorganisering og Clinicopathologic variabler
ERG
genet omorganisering ble signifikant assosiert med preoperativ PSA nivåer i PCA pasienter (p = 0,038) (tabell 2). Forekomsten av
ERG
omorganisering var signifikant lavere hos pasienter med lav PSA nivå ( 4 ng /ml) sammenlignet med de som har middels eller høy PSA nivåer. Men ingen signifikant korrelasjon ble identifisert mellom
ERG
omorganisering og alder, Gleason score, klinisk T scenen, eller fjernmetastaser ved diagnosetidspunktet.
Association of
ERG
omorganisering med andre molekylære markører
Som sletting av
PTEN Hotell og presiseringer av
EGFR Hotell og
HER2
er relevante genomiske avvik i PCA vi neste utforsket sammenslutning av
ERG
omorganisering med disse molekylære hendelser i vår kohort. Som vist i tabell 2,
ERG
omorganisering var til stede i omtrent 63,2% (12/19) av PCA pasienter med
PTEN
sletting (hemizygous eller homozygot). Likeledes
PTEN
sletting forekom oftere i saker som næret
ERG
omorganisering (30,8%, 12/39) sammenlignet med de
ERG
omorganisering negative tilfeller (5,1% , 7/137). Totalt sett en signifikant sammenheng mellom
PTEN
sletting og
ERG
omorganisering ble observert i kinesisk PCa kohort (P = 0,0008). Av notatet, 46/182 (25,2%) PCA tilfeller avdekket redusert PTEN protein uttrykk ved immunhistokjemi. Samsvar mellom
PTEN
status sletting og PTEN protein uttrykk ble også identifisert i vår kohort (data ikke vist).
Forsterkning av
EGFR
ble identifisert bare i to PCA tilfeller begge var negative for
ERG
omorganisering. Tilsvarende 9 av 10 (90,0%) PCA tilfeller med
HER2
forsterkning var fraværende for
ERG
omorganisering.
ERG
omorganisering var oftere til stede i PCA tilfeller uten
HER2
forsterkning (34/163, 20,9%) enn i
HER2
-amplified tumorer (1/10, 10,0 %) (p = 0,149).
Immunohistokjemiske overexpressions av EGFR og HER2 ble identifisert i 17,6% (31/176) og 6,0% (11/181) av tilfellene, henholdsvis. HER2 protein overekspresjon var signifikant korrelert til forsterkning av
HER2 product: (P 0,01). Imidlertid var det ingen korrelasjon mellom EGFR-protein ekspresjon og genamplifikasjon (data ikke vist).
ERG
omorganisering ble verken forbundet med EGFR eller HER2 protein uttrykk.
Survival Analyse av
ERG
Omorganisering i forhold til kreftrelaterte dødsfall
For å finne ut om tilstedeværelse av
ERG
omorganisering var en prognostisk faktor for PCA vi sammenlignet kreftrelatert dødelighet mellom pasienter med og uten
ERG
omorganisering. På grunnlag av Kaplan-Meier overlevelsesestimater, gruppen av pasienter med
ERG
omorganisering hadde en mye større dødelighet enn pasienter som manglet genet omorganisering (P = 0,02) (figur 3).
de kreftrelatert overlevelse ble sammenlignet mellom pasienter med og uten
ERG
omorganisering hjelp av log-rank test.
ERG
omorganisering status viste seg å være en betydelig prognostisk prediktor for prostatakreft relatert overlevelse [HR (95% CI): 3,368 (1,261 til 8,955), P = 0,015] i univariat analyse (tabell 3). PSA verdier ved diagnose (P = 0,009), Gleason score (P 0,001), klinisk tumor stadium (P = 0,011), fjernmetastaser (P = 0,006), Ki-67 LI (P = 0,002),
EGFR
forsterkning (P = 0,023), og
HER2
forsterkning (P = 0,001) ble også signifikant relatert til kreft-relaterte overlevelse i univariat analyse. Spesielt, i en multivariat analyse som inkluderte kjente prognostiske markører,
ERG
omorganisering status forble en signifikant prediktor (P = 0,022) med en hasardratio på 2,099 (95% KI: 1,112 til 3,962) (tabell 3).
Prognostic Relevans av
ERG
omorganisering og Ki-67 LI
Vi neste fastslått om å kombinere markører ytterligere forbedret prognostisk verdi. Siden Ki-67 er en kjent sterk prognosticator ved PCA og har uavhengig prediktiv verdi for kreftrelatert overlevelse i vår årsklasse, vi direkte har sammenlignet prognostiske effekten av
ERG
omorganisering og Ki-67 LI i kombinasjon. For denne analysen, gruppert vi all kreft i henhold til deres
ERG
status (ikke omdisponeres vs. omorganiseres) og Ki-67 Etikett indeksen status (LI 10% vs LI 10%). Cox regresjonsanalyser ble derfor gjennomført ved hjelp av gruppen med lav Ki-67 LI og ingen
ERG
avvik som referanse. Som vist i figur 4, den største gruppen, som omfattet de som ikke hadde noen
ERG
omleiring og lav Ki-67 LI, hadde en større kreft-relaterte overlevelse sammenlignet med de tre andre gruppene. Spesielt, undergruppe av pasienter med
ERG
omorganisering og høy Ki-67 LI hadde den verste kreftrelatert overlevelse.
Pasientene ble fordelt etter
ERG
omorganisering og Ki -67 LI i kombinasjon og log-rank test ble utført.
Vi videre fastslått om
ERG
omorganisering status kan brukes til å forbedre risikovurderingen av PCA pasienter med lav Ki-67 LI. Kaplan-Meier analyse viste at
ERG
omorganisering status var en prognostisk faktor i gruppen av pasienter med lav Ki-67 LI (P = 0,019) (figur 5A). Median overlevelse av PCA pasienter med og uten
ERG
omorganisering var 69 og 89 måneder, henholdsvis. Men
ERG
omorganisering status mistet sin prediktiv verdi av utfallet i de med høy Ki-67 LI (figur 5B). I motsetning
ERG
omorganisering status ikke var nyttig i å identifisere høyrisiko PCA pasienter med lav Gleason score (data ikke vist)
(A) lav ki-67 LI (. 10 %) undergruppe, (B) høy ki-67 LI (≥10%) undergruppe
Diskusjoner
Dette er en av de største serie PCA pasienter (n . 200) rapportert så langt i Kina analysere
ERG
omorganisering. Vår kohorten består av menn behandlet med TUR-P og alt av pasienter hadde symptomer på nedre veier urinveisobstruksjon, derfor representerer en utvalgt undergruppe av klinisk anerkjent PCas. Pasientene med tilfeldige PCas ble ekskludert fra studien. Selv om stadig flere PSA-screed PCA pasienter har blitt identifisert i vestlige land, er det begrensede data vedrørende klinisk fenotype eller naturhistorie i PCa. Av notatet, vår kohort inkludert en undergruppe av pasienter med høy klasse PCas. Dette skilte seg fra de fleste vestlige pasienter som ble funnet å ha PCa grunn av PSA screening og ble ofte behandlet med radikal prostatektomi.
Totalt hyppigheten av
ERG
omorganisering var 23,2% i vår kohort og dette var sammenlignbart med det som tidligere er rapportert av Mao et al [21] og Ren et al [32] i kinesisk pca pasienter. I tråd med disse funnene, Kimura et al [17] og Lee et al [33] rapporterte forekomsten av
TMPRSS2-ERG
genet fusjon var 16,3% (15/92) på japansk og 20,9% (53 /254) i koreansk PCA pasienter. Tidligere Mosquera et al [34] oppdaget
TMPRSS2-ERG
fusion i 100 kaukasiske og ikke-kaukasiske PCA pasienter som gjennomgår prostata biopsi. De rapporterte at forekomsten var signifikant forskjellig i kaukasiere (44/85, 52%) og i ikke-hvite (2/15, 13%). Nå nylig, ved hjelp av en flerfarget FISH analyse, Magi-Galluzzi et al [35] fant at
TMPRSS2 Anmeldelser –
ERG
genet fusjon var til stede i 50% (21/42) av kaukasiere, 31,3 % (20/64) av afrikansk-amerikanere og 15,9% (7/44) av japansk (P = 0,003). Kollektivt, disse studiene fremhevet den lave forekomsten av
TMPRSS2-ERG
Genfusjonene i PCA pasienter i Asia sammenlignet med vestlige land og denne ulikheten i det minste delvis et resultat av ulik genetisk bakgrunn i stedet for effekten av livsstil eller kosthold. Av notatet, kan forskjellen også reflektere tidligere funn om at fusjon er mindre vanlig i overgangssonen svulster (som de fleste svulster funnet i TUR-P prøver) enn i perifere sone svulster [17], [36], [37]. I tillegg kan kohort design og vurdering av multifokaliteten ha konsekvenser for
ERG
omorganisering frekvens [38].
Så langt
ERG
omorganisering ved PCA forblir den prognostiske betydningen av motstridende. En rekke retrospektive studier som søkte en sammenheng mellom
TMPRSS2-ERG Hotell og utfallet følgende PSA skjermet radikal prostatektomi ga blandede resultater. Flere publiserte studier har vist at PCA pasienter med
TMPRSS2-ERG
genet fusjon tillagt en høyere risiko for tilbakefall, mens andre rapporterte en signifikant sammenheng med en gunstig prognose eller en null forhold til kliniske utfall. Blant pasienter behandlet med vaktsom venter,
TMPRSS2-ERG
syntes å være forbundet med dårligere utfall. I en meta-analyse inkludert 227 menn diagnostisert med TUR-P, menn med fusion-positive tumorer var 1,37 (95% CI, 0.53-3.51) ganger så stor sjanse for å oppleve fjernmetastaser eller dø fra PCa som de negative for fusjon [18 ]. Avvik i rapportert prognostisk betydning av
ERG
rearrangements kan skyldes kohort design (multifokaliteten og sone opprinnelse av svulsten), fusion påvisning teknikk, og er også ansvarlig for å det primære endepunktet for studien (dvs. biokjemisk tilbakefall, total overlevelse). Derfor er ytterligere standardiserte studier er nødvendig for å løse dette problemet. I denne studien fant vi at
ERG
omorganisering var signifikant forbundet med prostata kreft-relaterte dødsfall i kinesiske PCA pasienter. Enda viktigere,
ERG
omorganisering ble foreslått å være en uavhengig prediktor for total overlevelse i multivariate analyser. Det er bemerkelsesverdig at biokjemisk tilbakefall er et upresist prediktor for prostatakreft død. Selv om PSA kan tjene som et surrogat endepunkt for total overlevelse, vil flertallet av menn med PSA biokjemisk svikt dør av andre årsaker. Ward et al fant at i en befolkning på 3897 radikal prostatektomi pasienter, kun 8,3% av menn med PSA biokjemisk svikt døde av PCa [39]. Derfor prostata kreft-relaterte dødsfall som det primære endepunktet kan være mer pålitelig for prognostisk analyse. Totalt våre data støttet ideen om at hvis venstre ubehandlet eller mangel på initial terapi,
TMPRSS2-ERG
PCa vil kjøre en mer aggressiv klinisk forløp enn fusion-negativ kreft.
Til dags dato, Ki-67 har blitt mye brukt som en prognostisk biomarkør i malignitet inkludert PCa. Sin egen prediktiv verdi for PCa relatert overlevelse har blitt bekreftet i vår studie. I tråd med Antonarakis rapport [40], ingen signifikant sammenheng mellom
ERG
omorganisering og Ki-67 LI status ble identifisert. En forklaring er at
ERG
omorganisering har ulik effekt på spredning og invasjon
in vitro
henholdsvis Ki-67 er en velkjent spredning markør [41] – [43]. Derimot, i 2008, Tomlins et al rapporterte at veksling av
ERG
genuttrykk betydelig innvirkning invasjon
in vitro
men har ingen effekt på celleproliferasjon [41]. Men når stratifisering for Ki-67 status,
ERG
omorganisering var en prognostisk faktor for kreftrelatert overlevelse bare i PCA pasienter med lav Ki-67 LI. En stor klinisk utfordring ved PCA ledelsen er manglende evne til lett å skille lat fra aggressive svulster hos pasienter som presenterer med lav Gleason grad, lavt tumor volum eller lavt Ki-67 LI. Våre data antydet at fastsettelse av
ERG
omorganisering status kan være nyttig i lagdeling av PCA pasienter med lav Ki-67 LI i ulike overlevelses kategorier.
Selv om genet fusjon er en viktig molekylær hendelse ved PCA utvikling og
TMPRSS2-ERG
fusjon kan indusere høy klasse prostata neoplasi (HGPIN), er det ikke tilstrekkelig til å generere en fullstendig forvandlet fenotype
in vitro Hotell og
in vivo product: [ ,,,0],41], [44]. Flere uavhengige grupper har foreslått
ERG
kan samarbeide med andre genetiske avvik for å fremme PCa utvikling og progresjon, slik som
PTEN
haploinsufficiency, forbedret androgen reseptor (AR) signal-, overekspresjon av SOX9 og avvikende phosphoinositide 3-kinase (PI3K) pathway [45] – [47]. Nå nylig,
TMPRSS2-ERG
ble vist å megle Epitelial til Mesenchymale Transition (EMT) gjennom induksjon av WNT signalveien via FZD4 samt ZEB1 /ZEB2 akse [48], [49]. Tidligere har vi og andre foreslo signifikant sammenheng mellom
PTEN
sletting og
ERG
omorganisering både i lokal og metastatisk PCas i vestlige land.
