Abstract
Bakgrunn
Uttrykk av RNA- bindingsmotiv protein 3 (RBM3) er blitt vist å korrelere med gunstige clinicopathological parametere og prognose i en rekke kreftsykdommer. Hensikten med denne studien var å undersøke uttrykk og prognostisk evne RBM3 hos pasienter med testikkelkreft ikke-seminomatøs bakterie celle svulster (NSGCT).
Pasienter og metoder
Immunhistokjemisk RBM3 uttrykk ble analysert i microarray med svulster fra 206 pasienter. Chi-kvadrat test ble brukt for å analysere sammenhenger mellom RBM3 uttrykk og clinicopathological parametere. Kaplan-Meier analyse ble brukt for å vurdere effekten av RBM3 uttrykk på kreftspesifikk overlevelse (CSS) og svikt overlevelse (FFS). Cox regresjon proporsjonal farer modeller ble brukt til å estimere den relative risikoen for svikt.
Resultater
I hele kullet, var det en signifikant sammenheng mellom klinisk stadium (
p = 0
.
044
) og RBM3 uttrykk. Svak RBM3 uttrykk korrelert med en betydelig redusert FFS [79,3% versus 90,4% (
p = 0
.
019
)] og CSS [87,5% versus 97,3% (
p = 0
.
047
)]. For pasienter med metastatisk sykdom (
n = 88
), ble signifikante assosiasjoner funnet mellom RBM3 uttrykk og IGCCC gruppe (
p = 0
.
007
). FFS var signifikant dårligere for pasienter med lav tumor-spesifikke RBM3 uttrykk [59,3% versus 79,0% (
p = 0
.
013
)], og denne foreningen forble viktig i en multivariat modell for pasienter med metastatisk sykdom (HR = 3,67, 95% KI 1,14, 11,89).
Konklusjon
lav RBM3 uttrykk er en uavhengig prediktor for behandlingssvikt i metastatisk NSGCT, i forhold til den prognostiske faktorer som inngår i International Germ Cell Consensus Klassifisering (IGCCC). Disse funnene tyder på at RBM3 kan være en potensiell biomarkør for behandling stratifisering av pasienter med metastatisk ikke-seminomatøs bakterie celle svulster, og derfor fortjener ytterligere validering
Citation. Olofsson SE, NODIN B, Gaber A, Eberhard J, Uhlen M, Jirström K, et al. (2015) Lav RBM3 Protein Expression korrelerer med klinisk stadium, Prognostic Klassifisering og økt risiko for behandlingssvikt i Testicular Non-seminomatøs Germ Cell Cancer. PLoS ONE 10 (3): e0121300. doi: 10,1371 /journal.pone.0121300
Academic Redaktør: Yuan-Soon Ho, Taipei Medical University, TAIWAN
mottatt: 04.12.2014; Godkjent: 29 januar 2015; Publisert: 26 mars 2015
Copyright: © 2015 Olofsson et al. Dette er en åpen tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet: All relevant data er i avisen og dens saksdokumenter filer
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av Landstinget Kronoberg til SEO, Knut og Alice Wallenberg-stiftelsen til KJ, og Lunds universitet det medisinske fakultet og universitetssykehus stipend til MJ. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser. JE og KJ er co-oppfinnerne av to patenter knyttet til bruk av RBM3 som en prognostisk biomarkør i testikkelkreft: 1) RBM3 protein i testiklene kreftdiagnostikk og prognostics EU Patent no. (EP) 2396659, validert i Danmark, Frankrike, Irland, Nederlands, Sveits, Storbritannia, Sverige og Tyskland. Australia Patent no. (AU) 2010212769. Det er søkt patent i Japan (2011-549603), Canada (2749349) og USA (13/210809). 2) Prediksjon av respons til platina-basert terapi. EU Patent no. (EP) 2396660, validert i Danmark, Frankrike, Irland, Nederlands, Sveits, Storbritannia, Sverige og Tyskland. Australia Patent no. (AU) 2010212772, USA Patent no. (US) 8.747.910. Det er patenter i Brasil (PI1008875-0), Hong Kong (12.107.047,4), Japan (2011-549604), Canada (2.749.350) og Kina (201080007960,0). Dette endrer ikke forfatternes tilslutning til alle PLoS ONE politikk på deling av data og materiale. De resterende Forfatterne har erklært at noen konkurrerende interesser eksisterer.
Innledning
Siden introduksjonen av cisplatin i behandlingen av testikkelkreft (TC), mer enn 95% av pasientene helbredet. For pasienter uten noen bevis for metastatisk sykdom, dvs. klinisk stadium I (CS I), nærmer overlevelse 100% [1, 2]. The International Germ Cell Consensus Klassifisering (IGCCC) for ikke-seminomatøs bakterie celle svulster (NSGCT) [3] brukes til å klassifisere pasienter med metastatisk sykdom i tre grupper med god, middels eller dårlig prognose, basert på kliniske parametre stede før behandlingen ( S1 tabell). I en meta-analyse, utført i 2005, anslår fem-års overlevelse for pasienter med god prognose var 94%, middels prognose 83% og 71% i dårlig prognose gruppen [4]. Flertallet av pasientene er unge til diagnose, og det er derfor viktig å unngå langvarig sykelighet som kan resultere fra TC behandling. Derfor, selv om enkelte clinicopathological faktorer har vist seg å være av verdi å veilede behandling, er det et klart behov for ytterligere prognostiske markører for å bedre skille mellom pasienter med høy risiko og lav risiko sykdom [5]. I CS I pasienter, risikofaktorer for okkult metastatisk sykdom er vaskulær /lymfatisk invasjon, proliferasjonsrate 70% og mer enn 50% embryonal karsinom [6]. Immunhistokjemisk vurdering av tumor proliferasjon ved hjelp av MIB-1 (Ki-67-reseptor) kan brukes til å identifisere pasienter i CS I med lav risiko for tilbakefall. MIB-1 antistoff kan også brukes i diagnostisering av NSGCT [6].
Lav uttrykk for RNA bindende motiv protein 3 (RBM3) har vist seg å korrelere med en dårligere prognose i flere store kreftformer, f.eks bryst, eggstokk, prostata, kolorektal, blærekreft og føflekkreft [7-12]. RBM3 uttrykket har også vist seg å korrelere med følsomhet til platina-basert kjemoterapi i eggstokkreft in vivo og in vitro [8, 13]. I gonadene, har RBM3 blitt funnet å bli uttrykt i Sertoli-celler, men ikke kjønnsceller, av sædkanaler [14]. Hensikten med denne studien var å undersøke uttrykk og prognostisk betydning av RBM3 i NSGCT. I denne artikkelen har vi ikke undersøkt diagnostisk virkningen av RBM3 uttrykk.
Materialer og metoder
Pasienter
Alle voksne pasienter diagnostisert med testikkelkreft NSGCT i Sør-Sverige Helseregion mellom 1 juli 1995 og 31. desember 2007 i hvem kliniske data var tilgjengelig, ble inkludert i denne studien. Overlevelsen status av alle pasienter ble kontrollert mot folkeregisteret i 2012. Pasientene ble behandlet i henhold til protokoller SWENOTECA (svensk-norsk testikkelkreft Group) IV (metastatisk sykdom) og SWENOTECA III og VI (ikke-metastatisk sykdom) [ ,,,0],15]. Den SWENOTECA database inneholder detaljert informasjon om tumorstadium, prognostisk klassifisering, behandling, kort- samt langtidsbehandling giftighet og oppfølging data 10 år etter diagnose.
Etikk erklæringen
All EU og nasjonale regler og krav til håndtering av humane prøver har blitt fullt ut oppfylt i løpet av gjennomføringen av dette prosjektet; dvs. beslutning nei. 1110-1194 /EF av Europaparlamentet og Rådet (OJL126 18,5,94), Helsinkideklarasjonen om etiske prinsipper for medisinsk forskning som omfatter mennesker, og EU-rådet konvensjon om menneskerettigheter og biomedisin. Studien ble godkjent av av Etisk komité av Universitetet i Lund (ref nr 386/99), der komiteen fravikes behovet for samtykke annet enn ved muligheten til å velge bort.
Material
pasientene ble identifisert i SWENOTECA databasen og de tilsvarende lysbilder og formalinfiksert blokker parafininnstøpte vev ble hentet fra patologi arkiver. Før vev micro array (TMA) bygging, alle tilgjengelige haematoxylin og eosin farget lysbilder fra hvert tilfelle ble re-evaluert av en bord-sertifisert patologen (KJ). Det totale antallet histologiske subtyper så vel som deres estimerte proporsjoner ble betegnet. Uavhengig av antallet av histologiske komponenter, ble et standard sett av 4x1mm kjerner tatt fra hver invasive svulster i en proporsjonal måte, dekker opp til 3 forskjellige komponenter. I tillegg ble det 2×1 mm kjerner samplet fra områder med intratubular bakterie celle neoplasier (ITGCN) fra 127 saker og tilstøtende, godartet-vises testikkel fra 49 tilfeller. En semi-automatisert arraying enheten ble brukt (TMArrayer, patologi Devices, Inc, Westminster, MD, USA). For immunhistokjemisk analyse av RBM3, 4 mikrometer TMA-partiene var automatisk forbehandlet (deparaffinization, rehydrering og epitop gjenfinning) ved hjelp av PT-link system (DAKO, København, Danmark) og deretter farget i en Techmate 500 (DAKO, København, Danmark ) med musen monoklonalt RBM3 antistoff, klone CL0296, produkt-ID AMAb90655, Atlas antistoffer AB, Stockholm, Sverige (formely kjent som AAb030038, Atlas antistoffer, Stockholm, Sverige) fortynnet 1: 5000. Antistoffet er blitt validert i tidligere studier [8, 10]. For vurdering av atom RBM3 uttrykk, ble begge brøkdel av positive celler og fargeintensitet tas hensyn til hvert vev kjerne ved hjelp av en semikvantitativ scoring system, der den estimerte andelen celler med atom RBM3 uttrykk ble registrert som atomfraksjon (NF) og kategorisert i fire grupper, nemlig 0 (0-1%), 1 (2-25%), 2 (26-50%), 3 (51-75%), 4 (mer enn 75%) og det kjernefysiske fargeintensitet ( NI) betegnet som 0 = negativ 1 = mild, 2 = middels, 3 = sterk intensitet. En kombinert atom poengsum (NS) fra NFxNI, som hadde et område fra 0 til 12, ble deretter konstruert. Cytoplasmatisk fargeintensitet ble betegnet som 0 = negativ, 1 = mild og 2 = moderat sterk, og brøkdel av positive celler ikke tatt hensyn til. Den farging ble evaluert av to uavhengige observatører (KJ, SEO) som var blindet for kliniske og resultatdata.
endepunkter og statistiske metoder
RBM3 uttrykk (intensitet × fraksjon) ble dikotomisert til svak vs sterk bruker klassifisering og regresjon treet (CRT) analyse [16]. Chi-kvadrat og Mann-Whitney U tester ble brukt for sammenligning mellom clinicopathological egenskaper og RBM3 uttrykk. Behandlingssvikt ble definert som tilbakefall etter behandling for metastatisk sykdom, tilbakefall for pasienter i CS jeg mottar adjuvant kjemoterapi, finne aktiv kreft ved kirurgi etter kjemoterapi eller død fra NSGCT. En kontralateral tumor ble ikke ansett som et tilbakefall. Unnlatelse overlevelse (FFS) ble definert som tiden fra orchiectomy til behandlingssvikt eller på annen måte sensurert ved siste oppfølging (FU) eller død av andre årsaker. Total overlevelse (OS) ble definert som tiden fra orchiectomy til døden fra eventuelle årsaker eller på annen måte sensurert endelig FU. Kreft spesifikk overlevelse (CSS) ble definert som tiden fra orchiectomy til døden fra NSGCT eller behandling eller på annen måte sensurert endelig FU eller død av andre årsaker. Tid til tilbakefall ble definert, for sykdomsfrie pasienter som tiden fra slutten av behandlingen til tilbakefall og sensurert ved siste FU eller død av andre årsaker. Overlevelse og kumulativ insidens kurver for de ovennevnte punktene ble estimert ved hjelp av Kaplan-Meier metoden og log-rank tester ble brukt for sammenligninger. Cox regresjon proporsjonal farer modeller ble brukt til å estimere den relative risikoen for svikt i både uni- og multivariabel analyse. En p-verdi på 0,05 ble betraktet som signifikant og alle testene var tosidig. Alle statistiske analyser ble utført ved hjelp av IBM SPSS statistikk versjon 20.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).
Resultater
Pasient egenskaper
Mellom 1 juli 1995 og 31 desember 2007 et totalt antall på 300 voksne pasienter ble diagnostisert med testikkelkreft NSGCT i Sør-Sverige helseregionen. I 219 pasienter, kliniske data var tilgjengelig i SWENOTECA databasen på tidspunktet for datauttrekk
Tretten (6%) tilfeller ble ekskludert fra studien.; fire pasienter som startet kjemoterapi før orkiektomi, tre tilfeller med manglende vevsblokker og seks tilfeller med en utilstrekkelig mengde vev tilgjengelig for analyse. Av de 206 inkluderte pasienter, 118 (57%) hadde klinisk stadium 1 (CSI) sykdom og 88 (43%) metastatisk sykdom. Pasient egenskaper, behandlingsrelaterte data, og overlevelsesdata er presentert i tabell 1. Hos pasienter med metastatisk sykdom ved diagnose (CSII-IV og forhøyet markør bare (Mk +)), ble 73% klassifisert som å ha god prognose, 15% middels prognose og 12% dårlig prognose i henhold til IGCCC. Median FU for overlevende pasienter (
n = 193
) var 76 måneder (variasjon 3-167). Den 5-årige OS var 96,0% for alle pasienter. Tretten pasienter døde under oppfølging, seks på grunn av progressiv sykdom og to på grunn av behandlingen. Fem pasienter døde av andre årsaker uten tegn på NSGCT. Det var 14 tilbakefall, seks pasienter med metastatisk sykdom i komplett remisjon etter kjemoterapi og kirurgi (
n =
61, 69%) og åtte pasienter med CS jeg sykdom hvorav tre etter adjuvant kjemoterapi. Tjue pasienter med CS Jeg sykdom hadde behandlingssvikt, 14 med vital kreft i prøven etter operasjonen, fem tilbakefall og døde på grunn av progresjon av sykdommen. Tre pasienter med CS Jeg sykdom hadde et tilbakefall etter adjuvant behandling hvorav ett døde senere på testikkelkreft.
RBM3 uttrykk
Prøve immunhistokjemiske bilder er vist i figur 1.
case 1-kolonne 1: atrofisk testikkel; kolonne 2-4: embryonal karsinom med negativ RBM3 uttrykk (merk positive stromal lymfocytter). Tilfelle 2-kolonne 1: intratubular bakterie celle neoplasier (ITGCN); kolonne 2-4: embryonal karsinom med 10% seminom (kolonne 2) med beste scorer 12 og verste scorer 2. Sak 3-kolonne en normal testikkel; kolonne 2-4: svulst med komponenter av embryonal karsinom, umoden teratom og plommesekken svulst med beste score 12 og verste scorer 8. Sak 4-kolonne en normal testikkel; kolonne 2-4: svulst med dominerende seminomatøs histologi (~ 80%) blandes med teratom (ikke representert i TMA), beste scorer 12 og dårligste poeng 8.
I normal testikkel, ble RBM3 uttrykt i svak til moderat intensitet i spermatogonier og negativ i spermatocytter. I intratubular bakterie celle neoplasier (ITGCN), ble RBM3 uttrykt med sterk intensitet i de aller fleste av neoplastiske celler. I testikkel bakterie celletumor (TGCT), ble RBM3 uttrykt i forskjellige intensiteter og fraksjoner, hovedsakelig i kjernen, men også i cytoplasma, med en spesielt sterk ekspresjon i seminomatøs komponenter.
Fordelingen av RBM3 uttrykk for mener, høyeste og laveste poengsum er vist i figur 2. Det var en signifikant forskjell i gjennomsnittlig score på RBM3 uttrykk mellom svulster fra pasienter i CS i og CS II-IV, Mk + i alle tre kategorier (fig 2D-2F). Den laveste poengsummen viste best korrelasjon til clinicopathological parametre (data ikke vist), og har derfor blitt brukt i følgende statistiske analyser CRT analyse foreslått en cutoff punktet NS 0.5 for å fastslå den optimale prognostisk virkningen av RBM3 uttrykk på FFS og NS 2.5 for CSS (S1 fig). Lav RBM3 uttrykket var forbundet med en betydelig dårligere FFS [79,3% versus 90,4% (
p = 0
.
019
)] (Fig 3C og S2 Table) og CSS [87,5% versus 97,3 % (
p = 0
.
047
)] (S2 tabell). I hele kullet, lav RBM3 uttrykk (NS = 0,5) ble observert hos 16 (7,8%) tilfeller, og det var en signifikant sammenheng mellom klinisk stadium (
p = 0
044
) og RBM3 ekspresjon (tabell 2). Ingen signifikante sammenhenger ble funnet mellom alder, CS jeg mot CS I og RBM3 uttrykk. Cytoplasmatiske RBM3 uttrykk var ikke forbundet med noen clinicopathological faktorer.
(A) gjennomsnittsskår, (B) høyest score og (C) lavest poengsum. RBM3 farging fordeling i henhold til CS I og CS 1 på (D) gjennomsnittsskår, (E) høyest score og (F) lavest poengsum. Boksplott viser de fem statistikk (minimum, første kvartil, median, tredje kvartil, og maksimum). P-verdier refererer til Mann Whitney U test for sammenligning av medianverdier.
(A) 118 pasienter med klinisk stadium 1, (B) 88 pasienter med metastatisk sykdom og (C) 206 pasienter med klinisk stadium i til IV og Mk +.
klinisk stadium i
for pasienter i CSI det var ingen signifikante assosiasjoner funnet mellom RBM3 uttrykk og resultatet (figur 3A og S2 Table).
klinisk stadium II-IV, Mk +
Det var en signifikant sammenheng mellom RBM3 uttrykk og IGCCC (
p = 0
.
007
), kombinert svulst markør status (
p = 0
.
001
), og med β-humant choriongonadotropin (HCG) nivå (
p = 0
.
010
) (tabell 2), men ikke med nivåer av α-fetoprotein (AFP) (
p = 0
.
127
), laktat dehydrogenase (LDH) (
p = 0
.
088
) eller tilstedeværelsen av ikke-lunge visceral metastase (NPVM) (
p = 0
.
148
). FFS var betydelig dårligere for tilfeller med lav tumor-spesifikke RBM3 uttrykk [59,3% versus 79,0% (
p = 0
.
013
)] (Fig 3B og S2 tabell). Angå CSS, denne forskjellen var ikke signifikant [88,9% versus 93,6% (
p = 0
.
618
)] (S2 tabell). I en multivariat modell; inkludert tumor markør nivå og tilstedeværelse av NPVM eller ikke; Denne risikoen høyde forble signifikant (HR = 4,35; 95% CI 1,28, 14,13), når tumormarkører ble analysert som avhengige variabler (tabell 3). Men når tumormarkører ble kategorisert ved hjelp av cut-poeng i IGCCC, forble bare AFP nivå som en betydelig prognostisk markør. Når det kombineres med IGCCC grupper i en multivariat modell, ble RBM3 uttrykk ikke signifikant assosiert med høyere risiko for behandlingssvikt (HR = 2,62, 95% KI 0,67, 10,31). (Tabell 4)
diskusjon
Våre resultater viser at RBM3 uttrykk er oppregulert i testikkel carcinoma in situ (CIS) sammenlignet med normal testikkel og uttrykk i ulike fraksjoner og intensiteter i TGCT, med det høyeste uttrykk i seminomatøs komponenter. Hos pasienter med metastatisk sykdom, redusert RBM3 ekspresjon korrelerte signifikant med den etablerte prognoseverktøyet (IGCCC), kombinert tumor markør status og β-HCG nivå, så vel som en betydelig kortere tid til behandlingssvikt. Videre i en multivariabel Cox regresjonsmodell, inkludert prognostiske faktorer som brukes i IGCCC modell, lav RBM3 uttrykk var en uavhengig prediktor for behandlingssvikt, når tumormarkører (AFP, HCG og LDH) ble ført som kontinuerlige variabler. RBM3 har vist seg å være en prognostisk biomarkør i flere kreftformer, f.eks urothelial kreft [12], brystkreft [7], kolorektal kreft [10], prostatakreft [9], spiserøret og gastrisk adenokarsinom [18] og eggstokk-kreft [8]. Videre har RBM3 uttrykk vist seg å korrelere med følsomhet for cisplatin behandling i eggstokkreft in vitro
[8] Hotell. I foreliggende serie, lav ekspresjon av RBM3 var en prediktor for økt risiko for behandlingssvikt hos pasienter med metastatisk NSGCT, og man kunne hypotese at RBM3 kan være en prediktor for følsomhet overfor cisplatin-basert behandling også i denne type kreft. Men hvis RBM3 var bare knyttet til cisplatin følsomhet, ville man ha forventet en høyere risiko for tilbakefall hos pasienter med CS1 og lav RBM3, mottar adjuvant BEP, som ikke ble observert.
En foreslått mekanisme handling for RBM3 er at det kan fremme tumordannelse i tidlige stadier av kreft ved å påvirke DDR (DNA skade reparasjon) og sjekkpunkt integritet, og dermed senke terskelen for valg av flere ondartede kloner [8, 13] og en gang en invasiv tumor er etablert, høye nivåer av RBM3 kan påvirke genomisk stabilitet og dermed kjemoterapi følsomhet. I andre typer av tumorer, har RBM3 uttrykk blitt funnet å være oppregulert ved preinvasive og cancervev [9, 19, 20]. I denne studien, alle prøver tatt fra in-situ komponenter viste høy RBM3 uttrykk. CIS har vist seg å være meget følsomme for radioterapi, som gir endelig kur [5, 21, 22]. En mulig hypotese er at i de fleste testiklene bakterie celle svulster, DDR systemet er praktisk talt ikke er aktivert og intakte og derved kan bidra til sensitiviteten til kjemoterapeutiske midler som platina og til radioterapi. Langs denne linje, ble RBM3 uttrykk funnet å være særlig høy i komponenter av seminomatøs histologi, som er blant de mest følsomme for radioterapi [22]. Men som RBM3 uttrykk korrelert med tumorstadium og HCG nivå, RBM3 kan også være relatert til hemming av tumorvekst og formidling, gjennom mekanismer fortsatt ukjente. Videre funksjonelle studier er nødvendig, og fra et klinisk perspektiv, ville det være av interesse å undersøke RBM3 uttrykk i metastaser etter postchemotherapy kirurgi, hvor en lav RBM3 uttrykk skulle tilsi redusert cisplatin følsomhet.
IGCCC diskriminerer mellom godt, middels og dårlig prognose pasienter med metastatisk testikkelkreft. Den er basert på primærsete, tumor markør nivå og tilstedeværelse av NPVM eller ikke. Bruken av denne klassifiseringen er å veilede beslutninger behandling for den enkelte pasient med den hensikt å optimalisere overlevelse og redusere toksisitet. Ofte er mellomliggende-og dårlig-risiko pasienter samles sammen og behandlet med liknende protokoller [23, 24]. Derfor er det et klart behov for nye biomarkører, for en mer nøyaktig identifisering av de pasientene få fra mer intensiv behandling på forhånd, slik som doseintensivering eller høydose kjemoterapi (HDCT) med stamcellestøtte. Våre data tyder på at RBM3 uttrykk kan gi ytterligere prognostisk informasjon som for svulst markør nivå og mønster av metastaser. Når det kombineres med IGCCC i en multivariabel modell, RBM3 ikke klarte å legge betydelig prognostisk informasjon. Dette kan skyldes det faktum at plasma tumor markør nivåer (HCG, AFP og LDH) er kategorisk i IGCCC, og benyttet som kontinuerlige variabler i vår analyse. For optimal bruk av RBM3 i en prognostisk modell, kan andre cut-off grenser for plasma tumormarkører må brukes.
Til sammen våre funn tyder på at RBM3 kan være en potensiell biomarkør for behandling stratifisering av pasienter med metastatisk ikke-seminomatøs bakterie celle svulster, og derfor fortjener ytterligere validering.
Hjelpemiddel Informasjon
S1 fig. CRT analyse
CRT-analyse for (A) svikt overlevelse og (B) kreftspesifikk overlevelse
doi:.. 10,1371 /journal.pone.0121300.s001 plakater (TIF)
S1 Table. . IGCCCG prognostisk iscenesettelse system
International Germ Cell Cancer Collaborative Gruppe prognostisk staging system for metastatisk ikke-seminomatøs bakterie celle kreft
doi:. 10,1371 /journal.pone.0121300.s002 plakater (docx)
S2 Bord. 5-års FFS og 5-års CSS av pasientkarakteristika og RBM3 uttrykk
doi:. 10,1371 /journal.pone.0121300.s003 plakater (docx)
Takk
forfatterne ønsker å takke medlemmene av SWENOTECA for å gi kliniske data.
