Abstract
Mål
caspase-8 (CASP8) spiller en sentral rolle i apoptotiske sti og avvikende regulering av denne veien kan føre til kreft. Tidligere studier som undersøker sammenhengen mellom CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme og endetarmskreft (CRC) risiko viste noe svar. Vi utførte en meta-analyse av alle tilgjengelige studier for å undersøke denne foreningen.
Metoder
Alle studier publisert frem til oktober 2013 på sammenhengen mellom CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme og CRC risiko ble identifisert ved å søke elektroniske databaser PubMed, EMBASE og Cochrane-biblioteket. Sammenhengen mellom CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme og CRC risikoen ble vurdert ved odds ratio (ORS) sammen med sine 95% konfidensintervall (CIS).
Resultater
Seks studier med 6325 saker og 6,842 kontroller ble inkludert i meta-analyse. Vi observerte at CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme var signifikant korrelert med CRC risiko når alle studiene ble samlet inn i meta-analyse (ins /del vs. ins /ins: OR = 0,890, 95% KI 0,821 til 0,964,
P
= 0,004; del /del + ins /del vs. ins /ins: OR = 0,899, 95% KI 0,833 til 0,970,
P
= 0,006). I lagdelte analyser av etnisitet, kilde av kontroll, og kvalitetspoeng, ble signifikant sammenheng observert i asiater (ins /del vs. ins /ins: OR = 0,862, 95% KI 0,761 til 0,977,
P
= 0,020 ; del /del + ins /del vs. ins /ins: OR = 0,845, 95% KI 0,749 til 0,953,
P
= 0.006), populasjonsbaserte studier (ins /del vs. ins /ins: OR = 0,890, 95% KI 0,813 til 0,975,
P
= 0,012; del /del + ins /del vs. ins /ins: OR = 0,901, 95% KI 0,827 til 0,982,
P
= 0,018), og høy kvalitet studier. Men i subgruppeanalyse i henhold til kreft stedet, var ingen signifikant sammenheng oppdaget.
Konklusjoner
Den nåværende meta-analyse antyder at CASP8 er en kandidat genet for CRC mottakelighet. De CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme kan spille en beskyttende rolle i CRC utvikling spesielt blant asiater. Videre store og godt designede studier er nødvendig for å bekrefte denne tilknytningen
Citation. Peng Q, Lao X, Tang W, Chen Z, Li R, Wang J et al. (2014) CASP8 -652 6N Del Polymorphism Bidrar til tykktarmskreft Følsomhet: Bevis fra en meta-analyse. PLoS ONE 9 (2): e87925. doi: 10,1371 /journal.pone.0087925
Redaktør: Gayle E. Woloschak, Northwestern University Feinberg School of Medicine, USA
mottatt: 06.12.2013; Godkjent: 31 desember 2013; Publisert: 03.02.2014
Copyright: © 2014 Peng et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Arbeidet beskrevet i denne artikkelen ble støttet av National Natural Science Foundation (nr 81260302). Den Funder hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
tykktarms~~POS=TRUNC kreft~~POS=HEADCOMP (CRC) er den nest vanligste diagnosen kreft med over 1,2 millioner nye tilfeller og 608,700 dødsfall i 2008 [1], [2]. Den høyeste forekomsten av CRC er funnet i Australia, Europa og Nord-Amerika. I tillegg er forekomsten av CRC raskt økende i en rekke land i Øst-Asia, som for eksempel Kina [2]. Utvikling og progresjon av CRC medfører uregulert epitelcelleproliferasjon grunn av en rekke av akkumulert genetisk endring [3]. Bevis har vist at langvarig overlevelse av slike genetisk ustabile kolorektal epitelceller, som fører til slutt til sin endelige malign transformasjon, er forbundet med progressiv hemming av apoptose. Genetisk polymorfisme for genene som kontrollerer cellesyklusen eller apoptose er blitt funnet å modulere risiko for humane maligniteter [4], [5].
Caspase-8 (CASP8) er en viktig regulator av apoptose. Det er en apikal protease av ytre apoptose bane som spiller en viktig rolle i forsvarsmekanisme mot hyper-spredning og tumorigenesis [6]. Den menneskelige CASP8 genet kartlagt til kromosom 2q33-34, er 30 kb i lengde og inneholder minst 11 eksoner [7]. Det var minst 474 enkeltnukleotidpolymorfi i CASP8 genet i henhold til dbSNP database (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/SNP), inkludert den hyppigst forekommende CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme (rs3834129 ). Det ble rapportert at CASP8 -652 6N ins /del promoter variant ødelegge det bindende element for stimulerende protein 1 og redusere ekspresjonen av CASP8, noe som resulterer i en reduksjon i den apoptose reaktivitet av T-lymfocytter ved stimulering av kreftceller [8]. Derfor er det biologisk rimelig til hypoteser en potensiell sammenheng mellom CASP8 -652 6N ins /del polymorfi og kreftformer.
I løpet av de siste to tiårene, flere molekylære epidemiologiske studier har evaluert sammenhengen mellom CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme og CRC risiko, men resultatene forblir kontroversielle og mangelfulle. For genetiske assosiasjons case-control studier som kontrollerer kandidat polymorfismer, er utvalgsstørrelsen en viktig innflytelse faktor for studier nøyaktighet. Liten utvalgsstørrelse kan være for lite strøm til å utforske en ekte sammenslutninger av beskjeden effekt [9], spesielt for kompleks multifaktoriell sykdom som CRC. Ved å kombinere data fra alle utvalgte studier av meta-analyse har den fordel av å øke statistisk styrke og å redusere tilfeldige feil og oppnå presise estimater for noen potensielle genetiske forbindelser. Derfor, i denne studien, har vi gjennomført en kvantitativ metaanalyse inkludert alle kvalifiserte studier. Dette er, så vidt vi vet, den første omfattende meta-analyse av genetiske studier på sammenhengen mellom CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme og CRC risiko.
Materialer og metoder
Søkestrategi
Et litteratursøk i PubMed, Embase og Cochrane bibliotekdatabaser ble utført ved bruk av de samlede søkeord: «CASP8», «Caspase8», «polymorfisme», «genetikk», «tykktarmskreft», «endetarmskreft» og « tykktarmskreft». Den siste søk ble gjort i oktober 2013 uten språkbegrensninger. Andre artikler ble identifisert gjennom referansene sitert i den første serien av artikler valgt. Artikler som inngår i meta-analysen var i alle språk, med mennesker, publisert i primærlitteraturen og hadde ingen åpenbare overlapping av pasienter med andre studier. Blant overlappende rapporter, bare de studier med mer informasjon om opprinnelsen til saker /kontroller ble beholdt. Studien ble utført i henhold til forslag fra Meta-analyse av observasjonsstudier i epidemiologi gruppe (MOOSE) [10]
Utvalgskriteriene
Følgende kriterier ble brukt for å inkludere publiserte studier. ( i) Case-control studier som evaluerte sammenhengen mellom CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme og CRC risiko; (Ii) tilstrekkelige genotype dataene ble presentert for å beregne odds ratio (ORS) og 95% konfidensintervall (95% CIS); (Iii) kontrollpopulasjon inneholdt ikke maligne tumorpasienter. Viktigste årsakene til utelukkelse av studiene var (i) vurdering, eller meta-analyse, eller brev, eller en kommentar; (Ii) duplisert studier, eller studier uten rådata vi trenger; og (iii) studier som fokuserte på HNPCC eller FAP. Familiebaserte studier av stamtavler med flere berørte tilfeller per familie ble også ekskludert, fordi deres analyse er basert på leddhensyn.
Data utvinning
To forfattere (Qiliu Peng og Xianjun Lao) uavhengig vurdert og hentet data fra alle kvalifiserte studier. For å sikre nøyaktigheten av den ekstraherte informasjon, de to forfattere kontrollert dataene utvinning resultatene og nådde enighet om alle av dataene uttrukket. Hvis forskjellige resultater ble generert, ville de sjekke dataene igjen og ha en diskusjon for å komme til enighet. Hvis disse to forfatterne ikke kunne komme til en enighet, ble en annen forfatter (Weizhong Tang) konsultert for å løse tvisten og en endelig beslutning ble fattet av flertallet av stemmene. Data hentet fra utvalgte studier inkludert førsteforfatter, årstall, opprinnelsesland, etnisitet, genotyping metode, matchende kriterier, kilde av kontroll, CRC diagnose kriterier, totalt antall tilfeller og kontroller og genotypefrekvensene saker og kontroller. Etnisk bakgrunn ble kategorisert som kaukasiske, og asiatiske. Kreft plassering ble delt inn i tykktarmskreft og endetarmskreft, og ble i tillegg registrert for stratifisert analyse.
Kvalitetspoeng vurdering
Kvaliteten på utvalgte studier ble vurdert uavhengig av to forfattere (Qiliu Peng og Xianjun Lao) i henhold til et sett av forhåndsdefinerte kriterier (Tabell 1) basert på omfanget av Thakkinstian et al. [11]. De reviderte kriterier dekke representativitet tilfeller kilde av kontroller, konstatering av CRC, total utvalgsstørrelse, kvalitetskontroll av genotyping metoder, og Hardy-Weinberg likevekt (HWE) i kontrollpopulasjonen. Uenighet ble løst ved konsensus. Poeng varierte fra 0 (lavest) til 10 (høyest). Artikler med score lik eller mindre enn seks ble betraktet som «lav kvalitet» studier, mens de med score høyere enn 6 ble vurdert «høy kvalitet» studier.
Statistisk analyse
styrke assosiasjonen mellom CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme og CRC risikoen ble vurdert ved odds ratio (ORS) med 95% konfidensintervall (cIS). Betydningen av den samlede ELLER ble bestemt ved Z-test og en
p
verdi på mindre enn 0,05 ble betraktet som signifikant. Foreningen av CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme og CRC risiko ble vurdert ved hjelp av additive modeller (del /del vs. ins /ins og ins /del vs. ins /ins), recessiv modell (del /del vs. ins /del + ins /ins) og dominerende modellen (del /del + ins /del vs. ins /ins). Heterogenitet blant studiene ble sjekket av en chi-kvadrat-baserte Q-test [12]. Et
P
Q
verdi som er mindre enn 0,10 for Q-testen viser en tilstedeværelse av heterogenitet blant studier, og så tilfeldig effekt-modellen (DerSimonian og Laird metode) ble anvendt for meta-analysen [1. 3]. Ellers ble det faste effekt-modell (den Mantel-Haenszel metode) benyttes [14]. For å utforske kildene til heterogenitet mellom studier, utførte vi subgruppeanalyser og Galbraith plotter analyse. Subgruppeanalyser ble utført av etnisitet, kreft beliggenhet, kilde av kontroll, og kvalitetspoeng. Sensitivitetsanalyse ble utført ved sekvensiell utelatelse av enkelte studier for å vurdere robustheten av resultatene. Publikasjonsskjevhet ble evaluert ved hjelp av en trakt tomt og Egger er regresjon asymmetri test [15]. Hvis publikasjonsskjevhet eksisterte, Duval og Tweedie ikke-parametrisk «trim og fylle» metoden ble brukt til å justere for det [16]. Fordelingen av genotyper i kontrollpopulasjon ble testet for HWE ved hjelp av en godhet-of-fit Chi-square-test. Alle analyser ble utført ved hjelp av Stata programvare, versjon 12.0 (Stata Corp., College Station, TX). Alle
p
verdiene var tosidig. For å sikre påliteligheten og nøyaktigheten av resultatene, to forfattere kom inn data i de statistiske programmer uavhengig av hverandre med samme resultat.
Resultater
Studie egenskaper
Basert på søkekriteriene, åtte studier som er relevante for rollen CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme på CRC mottakelighet ble identifisert. To av disse artiklene ble ekskludert: en var et brev [17], en ikke presentere tilstrekkelige data for å beregne OR og 95% CI [18]. Manuelt søk av referanser sitert i publiserte studier avdekket ingen flere artikler. Som et resultat ble et totalt seks relevante studier inneholdende 6,325 tilfeller og 6,842 kontroller er inkludert i meta-analyse [8], [19], [20], [21], [22], [23] (fig S1) . Tabell 2 viser de viktigste kjennetegnene på disse studiene. Blant disse publikasjonene, to ble utført i kaukasiske kings [20], [21], og fire ble utført i asiatiske nedstigningen [8], [19], [22], [23]. Tre var populasjonsbaserte studier [8], [21], [22] og tre ble sykehus-baserte studier [19], [20], [23]. To av disse studiene [19], [22] presenteres CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme genotype fordelinger etter kreft plassering (tykktarmskreft og endetarmskreft). Sakene ble histologisk eller patologisk bekreftet som CRC i fire studier [19], [20], [22], [23]. Kontrollene var hovedsakelig sunn eller sykehusbasert populasjoner og matchet med alder og kjønn. Genotypen distribusjoner i kontrollene av alle studier var i samsvar med HWE.
Meta-analyse
Som vist i tabell 3, Vi fant ut at CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme var signifikant korrelert med redusert CRC risiko når alle studiene ble samlet inn i meta-analyse (ins /del vs. ins /ins: OR = 0,890, 95% KI 0,821 til 0,964,
P
= 0,004; del /del + ins /del vs. ins /ins: OR = 0,899, 95% KI 0,833 til 0,970,
P
= 0,006). I subgruppeanalyse etnisitet, betydelig redusert CRC risiko ble funnet i asiatiske populasjoner (ins /del vs. ins /ins: OR = 0,862, 95% KI 0,761 til 0,977,
P
= 0,020, figur 1; del /del + ins /del vs. ins /ins: OR = 0,845, 95% KI 0,749 til 0,953,
P
= 0,006, figur 2), men ikke i kaukasiske populasjoner. I stratifisert analyse ifølge kilden av kontroll, betydelig redusert CRC risiko ble funnet i populasjonsbaserte studier (ins /del vs. ins /ins: OR = 0,890, 95% KI 0,813 til 0,975,
P
= 0,012 ; del /del + ins /del vs. ins /ins: OR = 0,901, 95% KI 0,827 til 0,982,
P
= 0,018), men ikke i sykehusbaserte studier. I subgruppeanalyse kvalitetspoeng, betydelig redusert CRC risiko ble observert i høy kvalitet studier (ins /del vs. ins /ins: OR = 0,877, 95% KI 0,805 til 0,956,
P
= 0,003; del /del + ins /del vs. ins /ins: OR = 0,886, 95% KI 0,817 til 0,961,
P
= 0,004), men ikke i lav kvalitet studier. Men i subgruppeanalyse kreft beliggenhet, statistisk signifikant sammenheng ble ikke påvist i både tykktarm kreftpasienter og endetarm kreft fag.
Heterogenitet analyse
Statistisk signifikant ble observert heterogenitet blant studier når alle kvalifiserte studier ble samlet inn i meta-analyse (del /del vs. ins /ins:
P
Q
= 0,026; del /del vs. ins /del + ins /ins:
P
Q
= 0,028). For å utforske kildene til heterogenitet, må vi først utført subgruppeanalyser. Subgruppeanalyser stratifisert etter etnisitet, kilde av kontroll, og kvalitetspoeng viste at heterogenitet var fortsatt betydelig i asiatiske populasjoner, populasjonsbaserte studier, og høy kvalitet studier (Tabell 3). Deretter utførte vi Galbraith tomter analyse for å ytterligere identifisere kilden til heterogenitet. Galbraith tomter analyse indikerte at studien Sun et al. [8] var uteliggeren bidrar til heterogenitet i additive modellen del /del vs. ins /ins og recessive modell del /del vs. ins /del + ins /ins i den samlede befolkningsgrupper (figur 3). Når unntatt studie av Sun et al. [8], redusert heterogenitet åpenbart og
P
Q
verdier var større enn 0,10 i den generelle populasjoner (del /del vs. ins /ins:
P
Q
= 0,414; del /del vs. ins /del + ins /ins:
P
Q
= 0,454), asiater (del /del vs. ins /ins:
P
Q
= 0,153; del /del vs. ins /del + ins /ins:
P
Q
= 0,182), populasjonsbaserte studier (del /del vs. ins /ins:
P
Q
= 0,170; del /del vs. ins /del + ins /ins:
P
Q
= 0,212), og høy kvalitet studier (del /del vs. ins /ins:
P
Q
= 0,168; del /del vs. ins /del + ins /ins:
P
Q
= 0,219). Men betydningen av sammendrags ORS for CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme i ulike sammenligning modeller i den generelle befolkningen og subgruppeanalyser ble ikke påvirket av å utelate denne studien [8].
En Studiet av Sun et al. ble oppdaget som avvikende additive modellen ins /del vs. ins /ins. B Studiet av Sun et al. ble oppdaget som avvikende i recessiv modell del /del vs. ins /del + ins /ins.
Følsomhetsanalyse
Følsomhetsanalyse ble utført ved sekvensiell utelatelse av enkeltstudier. For analyser av pooling mer enn tre individuelle studier, ble betydningen av ORS ikke påvirkes for mye ved å utelate noen enkeltstudie (data ikke vist), noe som indikerer at resultatene var statistisk robust.
publiseringsskjevheter
Begg trakten tomten og Egger test ble utført for å vurdere publikasjonsskjevhet av litteratur i alle sammenligning modeller. Formen av trakten tomten viste ingen tegn på åpenbar asymmetri (figur 4). Deretter ble Egger test anvendes for å tilveiebringe statistisk belegg av trakt plott symmetri. Alle p-verdiene av Egger tester var mer enn 0.05 (P = 0,561 for del /del vs. ins /ins; P = 0,929 for ins /del vs. ins /ins; P = 0,476 for recessive modell del /del vs. ins /del + ins /ins, og P = 0,912 for dominerende modellen del /del + ins /del vs. ins /ins), som gir statistisk bevis på trakt tomter «symmetri. Resultatene antydet at publikasjonsskjevhet var ikke tydelig i denne meta-analysen.
Diskusjoner
Programmert celledød, eller apoptose, er et normalt beskyttende prosess som gjør kroppen i stand til å eliminere skadelige celler. Synte apoptotiske mekanismer kan føre til ukontrollert celleformering og resultere i patogenesen av kreft hos mennesker [24]. Caspase-8, som ble kodet av CASP8 genet, spiller en sentral rolle i de apoptotiske trasé [25] og endringer i genetisk bestemt struktur av dette enzymet kan påvirke frekvensen av apoptose. Mer spesifikt er en seks-nukleotid polymorfisme delesjon (-652 6N del) blitt identifisert i promoterregionen av CASP8-genet og er forbundet med redusert RNA-ekspresjon i lymfocytter på grunn av endring av en Sp1 bindingssete [8]. Denne varianten har blitt funnet å redusere CASP8 aktivitet og apoptotisk reaktivitet av T-lymfocytter inn i kreftcellen ex vivo-modell [8], og den reduserte CASP8 aktivitet kan føre til en endring av normal programmert celledød og resultere i tumor-følsomhet. Denne hypotesen ble bekreftet av vår meta-analyse.
Våre meta-analyse viste resultatene at CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme var assosiert med en redusert risiko for CRC blant den asiatiske befolkningen. Men ingen signifikant sammenheng ble påvist blant den kaukasiske befolkningen. I tillegg er våre data viste også en redusert CRC risiko under additive modellen (ins /del vs. ins /ins) og dominerende modellen (del /del + ins /del vs. ins /ins) i den samlede befolkning. Når vi ekskludert studiet av Sun et al. [8], som ble vist som en avvikende i Galbraith plotter analyse, statistisk signifikant redusert CRC risiko ble også funnet i asiatiske befolkningen, men ikke i kaukasiere under additive modellen og dominerende modellen. Egentlig kan det ikke være uvanlig for samme polymorfisme spille ulike roller i kreft mottakelighet mellom ulike etniske populasjoner. I kaukasiere, forskjellene i genetiske bakgrunn og miljøet de levde i, kan påvirke sammenhengen mellom CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme og CRC risiko. I tillegg er det begrenset antall studier gjør også resultatene fra undergruppeanalyse fra etnisk mindre pålitelig. Derfor bør våre resultater tolkes med varsomhet.
I subgruppeanalyse ifølge kilden av kontroll, statistisk signifikant redusert CRC risiko ble funnet i populasjonsbaserte studier, men ikke i sykehusbaserte studier. Årsaken kan være at de sykehusbaserte studier har en høy risiko for å produsere upålitelige resultater fordi sykehusbaserte kontroller kan ikke alltid være virkelig representativ for den generelle befolkningen. Når stratifisert i henhold til kvaliteten score på artiklene, statistisk signifikant redusert CRC risiko ble observert i studier av høy kvalitet, men ikke i lav kvalitet studier. Den mulige årsaken til avviket kan være at eksistensen av utvalgsskjevhet og husker skjevhet i studier av lavere kvalitet. I tillegg bør genotyping metoder uten kvalitetskontroll i studier av lav kvalitet kan også vurderes ved å tyde disse inkonsekvente resultater. Derfor er en metodisk foret design, for eksempel ved hjelp av en god og representativ populasjonsbasert høy kvalitet studien, er av stor verdi i kasus-kontrollstudier.
Heterogenitet er et potensielt problem ved tolkning av resultatene av en meta- analyse, og finne kildene til heterogenitet er en av de viktigste mål for meta-analyse [26]. I denne studien ble betydelig mellom-studie heterogenitet i samlede analyser av totale godkjente studier observert i additiv modell del /del vs. ins /ins (
P
Q
= 0,026) og recessiv modell del /del vs. ins /del + ins /ins (
P
Q
= 0,028). For å utforske kildene til heterogenitet, utførte vi subgruppeanalyser og Galbraith plotter analyse. Subgruppeanalyser stratifisert etter etnisitet, kilde av kontroll, og kvalitetspoeng viste at heterogenitet var fortsatt betydelig i asiatiske populasjoner, populasjonsbaserte studier, og høykvalitetsstudier. Galbraith plott analyse viste at undersøkelsen Sun et al. [8] var uteliggeren i de to genetiske modeller i den generelle befolkning. Når unntatt studien Sun et al. [8], redusert heterogenitet åpenbart og alle
P
Q
verdier var større enn 0,10 i de to genetiske sammenligning modeller i den generelle populasjoner, asiater, populasjonsbaserte studier, og høykvalitetsstudier. Men sammendrags ORS i additiv modell del /del vs. ins /ins (
P
Q
= 0,026) og recessiv modell del /del vs. ins /del + ins /ins (
P
Q
= 0,028) i den generelle befolkningen, asiater, populasjonsbaserte studier, og av høy kvalitet studier ble ikke vesentlig endret ved å utelate denne studien indikerer at resultatene var robuste og pålitelige. Resultatene indikerte at studien Sun et al. [8] var den viktigste kilden til heterogenitet i meta-analysen.
Noen begrensninger i denne meta-analysen skal rettes. Først i subgruppeanalyse etnisitet, de inkluderte studiene regnes bare asiatere og kaukasiere. Opplysninger om andre etniske grupper som afrikanere ble ikke funnet. Dermed er flere studier garantert å evaluere effekten av denne funksjonell polymorfisme på CRC risiko i ulike etniske grupper, spesielt i afrikanere. For det andre, ble våre resultater basert på ujusterte estimater. Vi gjorde ikke utføre analyse justert for andre kovariater som røyking, drikking, fedme, rødt kjøtt forbruk, og så videre, på grunn av utilgjengelige opprinnelige data av utvalgte studier.
I konklusjonen, vår meta-analyse forutsatt en mer presis estimering basert på større utvalgsstørrelse i forhold til de enkelte studiene. Vår studie antydet at CASP8 er en kandidat genet for CRC mottakelighet. De CASP8 -652 6N ins /del polymorfisme kan spille en beskyttende rolle i CRC utvikling spesielt blant asiater. For ytterligere å bekrefte våre funn er store godt utformet epidemiologiske studier garantert.
Hjelpemiddel Informasjon
Figur S1.
Flow diagram av inkluderte studier for denne meta-analysen
doi:. 10,1371 /journal.pone.0087925.s001 plakater (TIF)
Sjekkliste S1.
doi: 10,1371 /journal.pone.0087925.s002 plakater (DOC)
