Abstract
Den varierte NER gener og røyking er to viktige risikofaktorer for blærekreft, men mekanismen av NER protein og røyking i kreft progresjon, men er fortsatt uklart. I denne rapporten sammenlignet vi uttrykk for NER gener i 79 blærekreft vev med eller uten tilbakefall av real-time PCR og deretter analysert varierte NER gener ved immunkjemi i 219 blærekreft vevsprøver. Basert på kliniske data, analyserte vi den kliniske verdien av varierte NER gener og røyking i 219 blærekreft ved Kaplan-Meier metoden og Cox regresjon. Vi fant uttrykk for NER genet XPF og XPC var betydelig lavere i blærekreft vev med et tilbakefall sammenlignet med de uten et tilbakefall på mRNA nivå. Også pasienter med XPF og XPC defekt hadde en statistisk signifikant lavere median tilbakefall overlevelse tid enn de uten XPF og XPC defekt, og røyking kan gjøre denne forskjellen mer bemerkelsesverdig. Våre resultater tyder på at XPF og XPC uttrykk kan være en potensiell prediktiv faktor for blærekreft, og røyking kan ikke bare påvirke tilbakefall av blærekreft som en enkelt faktor, men også forverre resultatene av XPF defekten og XPC defekt.
Citation: Qiu J, Wang X, Meng X, Zheng Y, Li G, Ma J, et al. (2014) Svekkede NER Uttrykk for XPF og XPC forbundet med røyking er involvert i Tilbakefall av blærekreft. PLoS ONE 9 (12): e115224. doi: 10,1371 /journal.pone.0115224
Redaktør: Xinbin Chen, University of California i Davis, USA
mottatt: 23 april 2014; Godkjent: 20 november 2014; Publisert: 23.12.2014
Copyright: © 2014 Qiu et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet:. Den forfatterne bekrefter at alle data som underbygger funnene er fullt tilgjengelig uten restriksjoner. Alle relevante data er innenfor papir
Finansiering:. Studien ble støttet av National Science Teknologi Pillar Program of China (No. 2011A322). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
svulster i blæren er den nest vanligste kreftformer i urologisk feltet. Blærekreft er den fjerde vanligste kreftformen hos menn og niende mest vanlig hos kvinner [1]. Av pasientene, vil ca 50% opplever et tilbakefall innen 2 år etter en innledende diagnose, og 16-25% vil ha tilbakefall etter endoskopisk reseksjon [2]. Derfor er hyppige tilbakefall av blærekreft er et stort medisinsk problem.
Tobakksrøyking, som en dominerende risikofaktor for blærekreft, er ansvarlig for omtrent halvparten av tilfellene hos menn og en tredje i kvinner [3], [4]. Som tobakksrelaterte kreftfremkallende ofte danner store DNA-addukter, basen skade, single-strand pauser og dobbel tråd pauser [5]. I tillegg, på grunn av arten av blæren som en viktig tomrom organ, er urotelialceller er kontinuerlig utsatt for mange DNA-skadende reagenser som finnes i urinen. Således spiller DNA-reparasjon en viktig rolle i å forebygge skadelige DNA-skadeinduserte effekter som mutasjon opphopning og tumor forekomst [6].
Det er flere DNA-reparasjons veier som finnes i humane celler, og hver bane effektivt fjerner særlig typer av DNA-skade [7]. Basert på typen av DNA-skade, kan DNA-reparasjonsbaner kan klassifiseres i nukleotid-excision reparasjon (NER), basis excision reparasjon, mismatch repair, og recombinational reparasjon [8], [9]. Den NER veien er den viktigste DNA-reparasjon veien for reparasjon av store DNA-skade som genereres av de fleste miljøfaktorer for å opprettholde genetisk integritet og hindre utvikling av mange sykdoms [10], [11].
NER består av ca 30 proteiner at fjerne helix-forvrengt lesjoner gjennom fire trinn: (a) gjenkjennelse av DNA; (B) åpning av en boble rundt lesjonen; (C) innsnitt i DNA oppstrøms og nedstrøms for lesjonen ved endonukleaser; og (d) DNA resyntese, og ligering [12], [13]. XPA til G (Xeroderma pigmentosum gruppene A-G), ERCC1 (excision reparasjon kryss complementation group1), RPA1, RPA2 (replikering protein A1, replikering protein A2) er de viktigste proteinene i denne veien, og det er to skader anerkjennelse armene på NER sti: global genomet reparasjon (GGR) og transkripsjonskoblet reparasjon (TCR). GGR omfatter de ikke-kodende delene av genomet, tause gener og den ikke-transkriberte stativ av aktive gener. TCR sikrer at den transkriberte tråden av aktive gener er reparert med høyere prioritet enn resten av genomet ved hjelp av RNA-polymerase II som en lesjon sensor. Når skaden er anerkjent gjennom en av disse prosessene, idet resten av reparasjonsprosessen følger en konvergerende bane [14], [15].
I denne studien undersøkte vi mRNA ekspresjon av gener 9 (XPB til XPG, ERCC1, RPA1, RPA2) involvert i NER sti i blærekreft vev med /uten tilbakefall, sammenlignet med normal blærekreft vev. Pasientene uten tilbakefall i 2 år ble inkludert i den ikke-tilbakefall gruppe og pasienter med tilbakefall i 2 år fungert som tilbakefall gruppen. Deres vevsprøver resected i den første operasjonen ble studert. Deretter ble de ovennevnte gener med vesentlig forskjellig ekspresjon av mRNA analysert ved hjelp av immuno-metode (på 219 pasienter med blærekreft) og sammenhengen mellom disse genene og tilbakefall av blærekreft ble bestemt.
i betraktning tobakksrøyking er en dominerende risikofaktor for blærekreft, analyserte vi den kliniske verdien av varierte NER gener og røyking i 219 blære kreft basert på kliniske data av Kaplan-Meier metoden og Cox regresjon.
Materialer og Metoder
2.1 etikk erklæringen
alle forskningsprotokollen ble godkjent av etisk Råd i Bethune International Peace Hospital og Xinqiao sykehus på Third Military Medical University og alle deltakerne gitt skriftlig informert samtykke.
.
2,2 forsøkspersonene
undersøkelsen ble utformet med to uavhengige sett
Det første settet inkluderte 79 pasienter som gjennomgikk transurethral eller delvis cystektomi (gjennomsnittsalder 62,4 ± 12 år, 52 menn og 27 kvinner) i vår avdeling fra 2007 til 2011. Ingen av de 79 pasientene hadde fått kreft narkotika før første cystektomi. Blant disse 79 pasientene, fikk 37 av dem ikke har et tilbakefall i minst 24 måneder etter den første cystektomi og var fortsatt i live nå, 29 av dem hadde fått en andre cystektomi og 13 av dem var døde (5 tilfeller fikk en andre cystektomi og 8 tilfeller ikke). Tumor eksemplarer av alle kirurgiske pasienter ble samlet og holdt på riktig måte. Pasientene uten tilbakefall i 2 år ble inkludert i den ikke-tilbakefall gruppe og pasienter med tilbakefall i 2 år fungert som tilbakefall gruppen. Deres vevsprøver resected i den første operasjonen ble studert. Prøvene ble hurtigfrosset på et tidligst mulig tidspunkt etter reseksjon.
Det andre settet inkluderte 219 pasienter som ikke var det samme som de 79 pasienter over. De parafinvoks-embedded vev av blæren papillær urothelial karsinom ble samlet fra pasienter som gjennomgikk transurethral reseksjon av blære svulst i vår avdeling fra 2002 til 2007. Disse vev, i henhold til den nye WHO klassifisering, ble tildelt patologisk til papillær urothelial svulst i lav ondartet (PUNLMP, 58 tilfeller), lavgradig papillær urothelial karsinom (93 tilfeller) og høy grad av papillær karsinom (68 tilfeller). Pasientene uten tilbakefall i 36 måneder ble inkludert i den ikke-tilbakefall gruppe og pasienter med tilbakefall i 36 måneder tjente som tilbakefall gruppen.Beliggenheten uttrykk nivåer av NER gener i blærekreft vev av disse pasientene ble analysert ved immunhistokjemi metode.
2,3 RNA-ekstraksjon og cDNA-syntese
Tumor fragmenter ble homogenisert i RNA lyseringsbuffer i isen med en Ultra-Turrax og RNA ble renset ved anvendelse av SV Total RNA Purification Kit. Retro-transkripsjon til cDNA ble gjort ved hjelp av høykapasitets cDNA Arkiv Kit, i henhold til produsentens forslag.
2.4 Real-time PCR
Relativ genekspresjon ble målt i tre eksemplarer og normalisert til
β
aktin (ΔCT) med TaqMan genekspresjon analyser og 7500 real-time PCR system for følgende genet transkripsjoner: XPB (Hs0554450_ml), XPC (Hs01104206_m1), XPD (Hs00361161), XPe (Hs00172018_ml), XPF (Hs00193342), XPG (Hs00164482), ERCC1 (Hs01012161), RPA1 (Hs00161419_m1), RPA2 (Hs00358315_m1). For å sikre thatâ-aktin seg ikke skifte mellom forskjellige prøver, forholdet OFA-aktin til en annen referanse genet GAPDH [16], ble målt.
2,5 immunhistokjemi
Tissue deler av fem mikrometer ble deparaffinized, rehydrert i graderte alkoholer, og behandles ved hjelp av streptavidin immunperoksydase metoden. I korte trekk ble snittene sendt til antigen gjenfinning av mikrobølgeovnen behandling i 10 minutter i 0,01 mol /l citratbuffer (pH 6,0). Platene ble deretter inkubert i 10% normalt serum i 30 min, etterfulgt av en inkubering over natten ved 4 ° C med den passende fortynnet primære antistoff. Musene anti-humant monoklonalt antistoff (XPC, XPF) ble anvendt ved en fortynning 1:100. Etter primær antistoff, ble prøvene inkubert med biotinylerte anti-mus eller anti-kanin immunoglobuliner i 15 minutter ved 37 ° C, etterfulgt av streptavidin peroksidase komplekser i 15 minutter ved 37 ° C. 3.3′-diaminobenzidin ble anvendt som kromogen, og hematoxylin ble brukt som en kjernefysisk counterstain.
Immunhistokjemisk Evalueringen ble utført ved hjelp av minst to uavhengige observatører som scoret beregnet prosentandelen av tumorceller som viser nukleær farging, uavhengig av signalet styrke. Resultatene ble bedømt i urothelial carcinoma lesjoner ved å beregne prosentandelen av tumorceller som viser karakteristiske nukleær farging. En vilkårlig definert 10% cutoff ble tatt for å klassifisere TCC data inn kategoriske grupper (positive versus negative).
2.6 Statistisk analyse
Den statistiske analysen ble gjort av SPSS 13.0. Relativ genekspresjon ble beregnet ved anvendelse av 2
-ΔCT, og uparede to-hale t-tester ble benyttet for å identifisere signifikant endret uttrykk i stadig tilbakevendende kreft vev, sammenlignet med ikke-tilbakevendende kreft vev. En beredskaps bord ble generert med chi-kvadrat eller Fisher eksakt sannsynlighet test for immunhistokjemi data. Tilbakefall sannsynlighet ble beregnet ved Kaplan-Meier metoden med statistiske forskjeller evaluert av log rank test. Den relative risikoen for tilbakefall fra blærekreft ble estimert ved en multivariat Cox proporsjonal risikomodell. For alle statistiske tester, p 0,05 ble betraktet som signifikant
Resultater
3.1 NER gener og tilbakefall av blærekreft
For å klargjøre sammenhengen mellom NER mekanisme og blærekreft. tilbakefall, ble uttrykket nivåer av NER gener inkludert XPB til XPG, ERCC1, RPA1 og RPA2 i kreft vev fra 79 pasienter med blærekreft bestemmes av real-time PCR. I disse 79 pasienter, 37 pasienter hadde ingen tilbakefall i 24 måneder, og disse ble inkludert i de ikke-tilbakefall gruppe; 29 pasienter hadde et tilbakefall i 24 måneder, og ble inkludert i tilbakefall gruppe; og de andre 13 pasienter døde og ble inkludert i døden gruppe. Studiens funn viste uttrykket nivåer av XPC og XPF ble betydelig redusert i tilbakefall gruppen og død gruppen sammenlignet med ikke-tilbakefall gruppe (Fig. 1 og tabell 1). Men XPB, XPD, XPe, XPG, ERCC1, RPA1 og RPA2 ikke endres vesentlig. Sammenlignet med gjentakelse gruppe, uttrykket nivåer av XPC og XPF var langt lavere i døden gruppe; Men det hadde ingen statistisk signifikans
NER gener avskrift ble oppdaget av sanntids kvantitativ RT-PCR i blære kreft i tre undergrupper:. Non-tilbakefall Group, pasienter som ikke har et tilbakefall i 2 år ; Tilbakefall Group, pasienter som hadde tilbakefall innen 2 år; Døde Group, pasienter som var døde etter operasjonen innen to år. Flippen endringen var normalisert mot GAPDH og deretter alle gener sammenlignet med de uttrykk for XPC i Regelmessighet Group (+ signal). *, P 0,01 sammenlignet med the.Non-gjentakelse Gruppe
3.2 uttrykk nivåer av XPF og XPC og patologi av blærekreft
For å undersøke forholdet. mellom XPF, XPC og utvikling av blærekreft, ble forbindelsen mellom uttrykk nivåer av XPF og XPC og patologi av blærekreft analysert. Det ble funnet at andelene av XPF (-) og XPC (-) var 54,4% og 50,0% i høy grad papillær kreftvev, 39,7% og 37,9% i PUNLMP cancervev og 49,5% og 45,2% i lav grad papillær cancer vev (tabell 2 og fig. 2). Resultatene av statistisk analyse på immunhistokjemi data antydet at andelene av XPF (-) og XPC (-) var signifikant høyere i høy grad papillære kreftvev enn i PUNLMP kreftvev (p 0,05). Det ble ikke observert noen statistisk forskjell mellom PUNLMP og lavgradige svulster (P 0,05). Videre var andelen XPF og XPC med redusert samtidig uttrykk var betydelig høyere i høy klasse papillær kreft vev enn i PUNLMP kreft vev (P 0,05).
(a) uttrykk for XPF og XPA i normal blære vev. (B) Positive XPF uttrykk og positiv XPC uttrykk. (C) Positive XPF uttrykk og negative XPC uttrykk. (D) Negativ XPF ekspresjon og positiv XPC uttrykk. (E) Negativ XPF uttrykk og negative XPC uttrykk.
3,3 Expression of NER gener og røyking
Forbindelsen mellom uttrykk nivåer av NER gener og røyking i 79 blæren kreftpasienter ble analysert. Røyking situasjonen ble delt inn i 4 nivåer: aldri røkt, 20 stk-år, 20-50 stk-årene og 50 stk-årene. Studiens funn viser at selv om ingen statistisk signifikans eksisterte blant de 4 røyking gruppene, var det fortsatt en klar trend. Uttrykket nivåer av XPF og XPC var noe lavere i tumorvev av tunge røykere enn hos de av mildt røyke pasienter (Fig. 3).
uttrykk for XPF og XPC i 79 blæren kreft av 4 røyke undergrupper. Den grove heltrukne linjen representerer middelverdien CT verdi og feilfelt representerer standard feil.
For ytterligere å undersøke sammenhengen mellom uttrykket av NER gener og røyking, uttrykket nivåer av XPF og XPC i 219 blærekreftpasienter og deres røyking situasjoner ble analysert. Vi fant ingen forskjell i proporsjonene XPF (-) og XPC (-) mellom 20 stk-års gruppe, 20-50 stk-års gruppe og aldri røkt gruppe. Interessant var andelen XPF (-) og XPC (-) i . 50 stk-års gruppen var høyere enn de i aldri røkt gruppen og 20 stk-årene gruppe (tabell 2 og tabell 3)
3,4 Expression of XPF og XPC blærekreft tilbakefall
for ytterligere å undersøke forholdet mellom de reduserte uttrykk nivåer av XPF og XPC og utvikling av blærekreft, sammenhengen mellom uttrykket nivåer av XPF og XPC med blærekreft tilbakefall ble analysert. Fig. 4 viser Kaplan-Meier-kurver av de to genene og røykestatus med de justerte P-verdiene. Vi fant at pasienter med lavt nivå av XPF og XPC hadde en høyere tilbakefall enn de med høy grad av XPF og XPC (fig 4a og 4b P. 0,05), dessuten denne forskjellen var mer tydelig i gruppen XPF (- ) XPC (-). (fig 4c). Blant de clinicopathologic variabler, tumor grad og stadium resulterte i betydelige prognostiske faktorer ved univariat analyse (tabell 3). Den multivariat analyse av Cox ble utført, inkludert alle variablene signifikant assosiert med overlevelse ved univariate og indikerte at den fasen av sykdommen var den eneste uavhengige faktoren forutsi pasientens utfall (tabell 4).
Kaplan-Meier Curves hjelp av logg rang tester for tilbakefall av blærekreft hos pasienter. (A) tilbakefall av blærekreft hos pasienter med XPF (-) og XPF (+); (B) tilbakefall av blærekreft hos pasienter med XPC (-) og XPC (+); (C) tilbakefall av blærekreft hos pasienter med XPF (-) kombinert med XPC (-) og XPF (+) kombinert med XPC (+), samtidighet; (D) tilbakefall av blærekreft hos pasienter med aldri røkt og røykt.
Cum, kumulativ
.
3.5 Den røykestatus og blærekreft tilbakefall
Det hadde blitt bekreftet at røyking er assosiert med blærekreft [30] , og vi fant ut at røyking var også forbundet med tilbakefall av blærekreft. Fig. 4d viser Kaplan-Meier-kurver av røykestatus med de justerte P-verdier, pasientene som hadde en historie med røyking hadde en høyere tilbakefall enn pasienter som ikke har røyking historie. Videre fant vi at røykestatus var ikke en separat faktor til blærekreft, kan det fungere med XPF og XPC gener samtidig, særlig i pasienter med et lavt nivå av XPF (Fig. 5 a og c) og XPC (Fig. 5 b og d). I tillegg ble mengden av røyking av pasienten i forbindelse med tilbakefall av blærekreft, spesielt i gruppen av XPF (figur 5). (-) Og XPC (-). (Fig. 5 e og f)
Kaplan-Meier-kurver ved bruk av log rank tester for tilbakefall av blærekreft hos pasienter. (A) tilbakefall av blærekreft i XPF (-) gruppe med ulik status for røyking (aldri røkt, 20 stk-år, 20-50 stk-årene og 50 stk-år); (B) tilbakefall av blærekreft i XPC (-) gruppe med ulik status for røyking, (C) tilbakefall av blærekreft i XPF (+) gruppe med ulik status for røyking, (D) tilbakefall av blærekreft i XPC (+) gruppe med ulik status for røyking, (E) tilbakefall av blærekreft hos pasienter med XPF (-) med aldri røkt og XPF (-) med røkt mer enn 50 stk-år, (f) tilbakefall av blærekreft hos pasienter med XPC (-) med aldri røykt og XPC (-) med røkt mer enn 50 stk-år, (g) tilbakefall av blærekreft hos pasienter med XPF (+) med aldri røkt og XPF (+) med røkt mer enn 50 stk-årene; (H) tilbakefall av blærekreft hos pasienter med XPC (+) med aldri røkt og XPC (+) med røkt mer enn 50 stk-årene.
Diskusjoner
Blærekreft tilbakefall er et klinisk vanlig problem. I denne studien undersøkte vi forbindelsen mellom blærekreft tilbakefall og NER gener. Resultatene fra studien antydet at to NER gener, XPF og XPC, var involvert i tilbakefall av blærekreft. Videre fant vi også at som en ekstern faktor, røyking var ikke bare involvert i tilbakefall av blærekreft selvstendig, men også kombineres med NER gener for å spille en ondartet rolle.
XPF, også kjent som excision reparasjon crosscomplementing gruppe 4 (ERCC4), er kritisk involvert i NER vei [17]. XPF Hasan viktig rolle i rekombinasjon reparasjon, mismatch reparasjon og muligens immunoglobulin klasse bryter [18], [19]. XPF inneholder det katalytiske domenet av nuklease og ERCC1 er nødvendig for DNA-binding og stabilisering av XPF. Den ERCC1-XPF kompleks kunne fjerne 3 «single-standed klaffer fra DNA ender og kløyver 5» siden av en boble i NER å skjære mot lesjonen [20]. Vi fant XPF var betydelig mindre i tumorvev av residiverende blærekreft og resultatene fra patologiske sammenligning viste at muligheten for tilbakefall i løpet av 3 år var høyere for pasienter med blærekreft med XPF (-) enn for de med XPF (+). Det indikerte klart at XPF var involvert i tilbakefall av blærekreft, som var i samsvar med resultatene fra Z Zhang et al [21]. De observerte at polymorfisme av XPF-357 nettstedet ble nært forbundet med uttrykket av XPF og videre påvirket tilbakefall av blærekreft. Men de hadde ikke undersøkt de ulike uttrykk nivåer av XPF i tumorvev av tilbakefall og ikke-residiverende blærekreft og også hadde ikke utledet en klar konklusjon. Vi ikke bare undersøkt forskjellige ekspresjonsnivåer av XPF i tumorvev av residiverende og ikke-tilbakefall blærekreft, men også studert forbindelse mellom andelen XPF (-) og blære patologisk gradering. Vi har funnet at andelen av XPF (-) var signifikant høyere i høy grad av den papillære kreftvev enn i PUNLMP cancervev og lav grad av papillær kreftvev, noe som tyder på XPF spilte ikke bare en viktig rolle i den tilbakefall av blærekreft, men også en beskyttende rolle i utvikling av blærekreft. Den reduserte XPF var involvert i utviklingen av blærekreft.
XPC er et DNA-skader anerkjennelse protein som spiller en viktig rolle i NER prosessen. XPC proteinet binder seg tett med en HR23B protein for å danne en stabil XPC-HR23B kompleks. Studier tyder på at XPC-HR23B komplekset er den første protein komponent som gjenkjenner og binder seg til de skadede områdene [22]. XPC-proteinet kan også spille en viktig rolle i andre DNA-skadeinduserte cellulære responser, inkludert cellesyklus kontrollpunkt regulering og apoptose [23] – [25]. XPC defekter har blitt funnet i mange typer kreft, inkludert lungekreft og hudkreft [26], [27]. XPC knock-out mus transgene undersøkelser viser den høye forekomsten av en predisposisjon for mange typer kreft [28]. Selv om flere studier har vist det nære forholdet mellom XPC og utvikling av blærekreft, er det fortsatt ingen bevis for at XPC er involvert i tilbakefall av blærekreft.
Vi fant XPC ble dempes uttrykt i tilbakefall av blærekreft enn non-tilbakefall av blærekreft. Det tyder på at den reduserte XPC kan være involvert i tilbakefall av blærekreft. For å bekrefte denne hypotesen, analyserte vi sammenhengen mellom uttrykket nivåer av XPC i tumorvev av 219 pasienter med blærekreft og deres prognose og fant XPC (-) pasienter hadde en betydelig høyere tilbakefallsrate. Videre er andelen av XPC (-) ble korrelert med den patologiske gradering av blærekreft. Dette er konsistent med resultatene fra Chen et al. XPC nederlaget var nært beslektet med og involvert i utviklingen av blærekreft [29]
Selv om lav uttrykk for XPF og XPC var involvert i tilbakefall av blære kreft, omfattende analyse fant at det ikke var noen synergistisk forbedring virkning mellom den reduserte ekspresjon av XPF og XPC. Saken styrte analyse viste at tilbakefall hastigheten av pasientene med samtidig redusert ekspresjon av XPF og XPC ikke var signifikant høyere enn den til pasienter med bare redusert ekspresjon av XPF eller XPC. Dette tyder på at XPF og XPC er begge beslektet med tilbakefall av blærekreft og involvert i flere cellulære respons veier. Men som for skifte av blærekreft, XPF og XPC spille sine roller i samme mekanisme, NER mekanisme, men ikke i ulike mekanismer.
Mange studier har vist at røyking spiller en ondartet rolle i utviklingen av blærekreft [30] – [32]. Vår studie ytterligere bekreftet denne konklusjonen. Ved å nøye analysere røykestatus uttrykk for NER gener og tilbakefall av blærekreft, har vi hentet den konklusjon at røyking ikke er bare involvert i tilbakefall av blærekreft selvstendig, men også kombineres med NER gener som XPF og XPC å spille en ondartet rolle samtidig, noe som ytterligere forverret de ondartede resultatene av blærekreft. Tidligere studier antydet at røyking kan påvirke tilbakefall av blærekreft gjennom NER mekanisme. Men vår studie viste røyking ikke bare påvirket beskyttende rolle i NER mekanismen i blærekreft, men trolig også påvirket andre beskyttende mekanismer under utviklingen av blærekreft.
Til tross for vår studie som viser at XPF, XPC og røyking var nært beslektet med tilbakefall av blærekreft, årsaken til lav uttrykk for XPF og XPC var fortsatt uklart. I tillegg til den polymorfi av XPF og XPC torer kan påvirke ekspresjonen av disse genene, sannsynligvis det er noen ukjente mekanismer som påvirker transkripsjon og translasjon av XPF og XPC genene, selv påvirker deres proteinnedbrytning og protein effektivitet, etc. For å grundig belyse biologisk mekanisme av blærekreft tilbakefall, disse feltene må videre etterforskning. Men det faktum at XPF og XPC er involvert i tilbakefall av blærekreft bringer en ny pålitelig ledetråd for videre studier på mekanismen av blærekreft tilbakefall.
Takk
Forfatterne ønsker å takker Xinhong Zhao og Dr. Junlei Zhang (Institutt for mikrobiologi) for deres utmerkede teknisk assistanse og kritisk lesing og verdifulle kommentarer til manuskriptet.
