Abstract
Glukose regulerte protein 78 (GRP78), en endoplasmatiske retikulum anstand, oppregulering fungerer som en effektiv mekanisme for å fremme malign transformasjon av tykktarmskreft (CRC) og beskytte CRC cellene mot apoptose. Nylig har analysen av grp78 polymorfismer allerede fastslått at GRP78 rs391957 polymorfisme kunne forutsi klinisk utfall i CRC pasienter. Dermed har vi testet om grp78 polymorfismer er knyttet til risiko for CRC. I denne studien, vi har oppdaget to grp78 polymorfismer (rs391957 (C T) og rs430397 (G A)) i 414 CRC tilfeller og 502 sykehusbaserte kreftfrie friske kontroller i Den sørvestlige Kina med en polymerase chain reaction-begrensning fragment lengde polymorfisme teknikk. Sammenlignet med CC genotype, bærere av CT og TT-genotyper av rs391957 polymorfisme hadde høyere risiko for CRC (odds ratio (OR) = 1,39, 95% konfidensintervall (KI) = 1,06 til 1,83 for CT-genotype og OR = 2,10, 95% KI = 01.06 til 04.14 for TT genotype, henholdsvis). I CRC tilfeller ble den variant T-allel signifikant assosiert med tumorinvasjon trinn (P = 0,030), men ikke med status av lymfeknuter metastase (P = 0,052). Sammenlignet med GG genotype, bærere av GA og AA genotyper av rs430397 polymorfisme hadde høyere risiko for CRC (OR = 1,63, 95% KI = 01.23 til 02.15 for GA genotype og OR = 2,92, 95% CI = 1,23 til 6,94 for AA genotype , henholdsvis). Den rs430397 polymorfisme var ikke assosiert med clinicopathological egenskapene til CRC. Disse dataene gir den første bevis for at grp78 rs391957 og rs430397 polymorfismer kan tjene som markører for å forutsi risikoen for CRC
Citation. Zhang D, Zhou B, Li Y, Wang M, Wang C, Zhou Z, et al. (2013) Polymorfisme av glukose-regulert Protein 78 og risikoen for tykktarmskreft: En case-control studie i Sørvest-Kina. PLoS ONE 8 (6): e66791. doi: 10,1371 /journal.pone.0066791
Redaktør: Valli De Re, Centro di riferimento Oncologico, IRCCS National Cancer Institute, Italia
mottatt: 15 januar 2013; Godkjent: 12 mai 2013; Publisert: 20 juni 2013
Copyright: © 2013 Zhang et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Denne forskningen ble støttet med tilskudd fra Outstanding doktoravhandling Foundation of Ministry of Education of China (No. 2007B66). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
tykktarms~~POS=TRUNC kreft~~POS=HEADCOMP (CRC) er den tredje vanligste kreftformen i verden, og står for ca 10% av total krefttilfeller. Nesten 60% av CRC tilfellene oppstår i de utviklede land [1]. Imidlertid er forekomsten av CRC økende i de fleste utviklingsland, mens trender er enten stabilisere eller synkende i de fleste av de utviklede landene [2]. Som et utviklingsland, har Kina opplevd to til fire- dobling i forekomsten av CRC i de siste tiårene [3]. I tillegg, den kinesiske Hans har betydelig høyere forekomst av CRC enn andre etniske grupper i Asia [4]. Patogenesen av CRC er ikke helt forstått, men det er sikkert en flertrinns kreftfremkallende prosess hvor genetiske og epigenetiske forandringer akkumuleres sekvensielt [5]. Gene polymorfismer som genetiske variasjoner har blitt studert allerede i mer enn 35 forskjellige gener, og for flere gener, er sammen med CRC observert [6], [7].
Glukose regulerte protein 78 (GRP78), også referert til som immunglobulin-tungkjede-bindende protein, er et medlem av varmesjokkprotein 70 familie som blir konstitutivt uttrykt, og befinner seg hovedsakelig i det endoplasmatiske retikulum (eR) [8], [9]. Som en stor ER anstand, GRP78 forenkler proteinfolding og montering, translocates nylig syntetiserte polypeptider over ER membranen, hindrer mellomprodukter fra aggregering, mål misfoldede proteiner for proteasome degradering, binder Ca
2 + og fungerer som en sensor for ER stress [ ,,,0],10] – [12]. Videre kan overekspresjon av GRP78 bli dramatisk indusert ved ER stress inkludert glukose deprivasjon, forstyrrelse av Ca
2 + homeostase, oksidativt stress og hypoksi, og deretter utløser utfoldet protein respons (UPR). UPR er en kompleks og mangesidig signal-transduksjon kaskade og tjener til å begrense akkumuleringen av ufoldete proteiner, som bidrar til å begrense skader i celler eksponert for ER stress og beskytter cellene mot død [9], [12] -. [15]
Kreftceller celler~~POS=HEADCOMP blir ofte konfrontert med hypoksi og glukose deprivasjon, og dermed under forutsetning av eR stress med overekspresjon av GRP78. Nylig har overekspresjon av GRP78 har blitt påvist i en rekke kreftformer så som hjernekreft, brystkreft, lungekreft, prostatakreft, magekreft og CRC. I tillegg GRP78 er blitt vist å være assosiert med utvikling og progresjon av kreft. [16] – [23]. Det var bevis som tyder på at grp78 polymorfismer, alene eller i kombinasjon, hadde virkning på ekspresjonen av GRP78 [24], [25]. Tidligere rapporter fant at grp78 rs430397 polymorfisme var forbundet med risiko og prognose for hepatocelluar kreft (HCC) og prognosen av ikke-småcellet lungekreft (NSCLC) [26], [27]. I mellomtiden ble det også kjent at GRP78 rs391957 polymorfisme kan tjene som en potensiell prognostisk determinant for mage og kolorektal kreft [28]. Den nylig studie viste GRP78 rs391957 polymorfisme var assosiert med risiko for HCC, men resultatet forble contradictive [29]. Foreløpig er lite kjent om forholdet mellom grp78 polymorfismer og mottakelighet for CRC, spesielt i det kinesiske Han befolkningen. Derfor hypotese vi at grp78 polymorfismer kan også påvirke risikoen for CRC.
For å teste hypotesen, vi gjennomført en case-control studie i en kinesisk Han befolkning til å undersøke om grp78 polymorfismer var forbundet med risiko og clinicopathological karakteristikker av CRC.
Materialer og metoder
forsøkspersonene
En totalt 414 CRC tilfeller og 502 kreftfrie kontroller ble rekruttert for dette case-control studie. Pasientene ble valgt sekvensielt fra januar 2009 til august 2009 ved Avdeling for Gastrointestinal kirurgi, West Kina Hospital, Sichuan University. Alle sakene hadde nylig diagnostisert, ubehandlet primær CRC, som ble identifisert ved preoperativ koloskopi og CT-skanning, intraoperativ leting og postoperativ patologisk undersøkelse. Den endetarmskreft ble ansett som svulsten ligger innenfor 15 cm avstand fra anal, og den ikke-endetarms kreft i tykktarmen ble ansett som svulsten ligger utover 15 cm avstand fra anal. Pasienter med andre krefthistorie og tidligere strålebehandling og kjemoterapi ble ekskludert. Alle de utvalgte sakene enige om å delta. De sykehusbaserte kontroller ble tilfeldig valgt fra samme sykehus under rutinemessige helsekontroller, som var kreftfrie friske individer identifisert ved koloskopi og CT scan. Kontrollgruppen matchet tilfelle gruppen i kjønn og alder. Alle deltakerne var urelaterte kinesiske Hans i Sørvest-Kina. Skriftlig informert samtykke ble blodprøver og kliniske data samlet inn fra alle deltakerne i henhold til protokoller godkjent av etikkomiteen av West Kina Hospital of Sichuan University.
DNA Extraction og Genotyping
Genomisk DNA ble ekstrahert fra fullblod fra hver deltager ved konvensjonelle fenol /kloroform fremgangsmåten. Konsentrasjonen og renheten av DNA ble målt med et spektrofotometer. Det isolerte DNA ble oppløst i TE-buffer og lagret i kjøleskap ved -20 ° C før analyse. To grp78-polymorfismer (rs391957 (C T) og rs430397 (G A)) ble genotypet ved bruk av polymerase kjedereaksjon (PCR) -restriction fragmentlengde polymorfisme teknikk. Kort sagt ble forover og revers primere anvendt for PCR-amplifikasjon og deretter de amplifiserte produkter ble fordøyd med restriksjonsendonukleaser. Videre ble lengdene av PCR-produktene og de fordøyde fragmenter bestemt ved elektroforese på 1,5% agarosegel og 3% agarose gel, hver for seg. For å genotype GRP78 rs391957 polymorfisme, PCR primere var 5′-atctctcctgcgacttctga-3 «(fremover) og 5′-gatggaggaagggagaacaa-3′ (bakover), og størrelsen på amplifiserte produkter var 167 bp. PCR-produktene ble deretter spaltet med restriksjonsendonuklease MboII. Varianten T-allelet hadde MboII restriksjonssetet og to band (134 bp og 32 bp) ble generert etter fordøyelse, mens vill C-allelen manglet restriksjonssetet og et enkelt bånd (167 bp) ble oppnådd. For å genotype GRP78 rs430397 polymorfisme, PCR primere var 5»-aattcaggacattgcatcta-3 «(fremover) og 5′-tggacagcagcaccatac-3» (bakover), og størrelsen på amplifiserte produkter var 271 bp. PCR-produktene ble deretter spaltet med restriksjonsendonuklease Hin1III. Varianten A-allelet manglet Hin1III restriksjonssete og et enkelt bånd (271 bp) ble oppnådd, mens vill G allelet hadde restriksjonssetet og to band (218 bp og 52 bp) ble generert etter fordøyelsen. I tillegg ble genotyping resultater validert ved direkte DNA-sekvensering i en tilfeldig 5% av prøvene for kvalitetskontroll. Genotype konkordans var 100%.
Statistical Analysis
Beregninger for makt og utvalgsstørrelse på våre case-kontroll design ble utført ved hjelp av PS program programvare. Resultatene indikerte at antall sampler som rekrutteres kunne gi tilstrekkelig statistisk styrke. Avvik fra Hardy-Weinberg likevekt for hver polymorfisme ble testet ved hjelp av chi-kvadrat test blant kontrollene. Forskjellene i demografiske kjennetegn (f.eks kjønn og alder) mellom CRC tilfeller og kontroller ble sammenliknet med chi-square og t-tester. De sammenslutninger av genotyper fordeling av grp78 polymorfismer med clinicopathological kjennetegn ved CRC tilfeller ble evaluert ved hjelp av chi-kvadrat test. Risikoestimater ble beregnet for co-dominante og dominerende genetiske modeller som bruker den vanligste homozygot genotype som referent kategori. Virkningene av genotyper av grp78 polymorfismer på risikoen for CRC ble presentert som odds ratio (ORS) med 95% konfidensintervall (CIS) med ubetinget logistisk regresjonsmodell justert for kjønn og alder. Alle statistiske tester var tosidig, og P 0,05 ble betraktet som signifikant. Alle statistiske analyser ble utført ved hjelp av PASW Statistikk 18 (SPSS Inc, Chicago, IL).
Resultater
Av de anslagsvis allel ORS av 1,38 og 1,60, vår studie med 414 CRC saker og 502 matchede kontroller gitt statistisk styrke på 0,80 og 0,95 til nominelt type i feilrate på 0,05, henholdsvis, noe som indikerer at våre prøver kan gi tilstrekkelig kraft i å identifisere foreningen av risiko for CRC med de to grp78 polymorfismer. Den observerte genotyper frekvensfordeling av de to grp78 polymorfismer i kontrollene viste ikke signifikant avvik fra Hardy-Weinberg likevekt (data ikke vist).
Kjennetegn på studiepopulasjonen
De demografiske og kliniske karakteristika av deltagerne ble oppsummert i Tabell 1. gjennomsnitts~~POS=TRUNC alderen~~POS=HEADCOMP var 59,0 (± 13,2) år og 58,2 (± 9,1) år i henholdsvis sakene og kontroller. De fleste av sakene og kontrollene var menn, og i de tilfeller kjønnsforholdet (mann /kvinne) var 1.39:1 mens forholdet var 1.5:1 i kontrollene. Det var ingen signifikant forskjell mellom saker og kontroller når det gjelder alder (P = 0,295) og kjønn (P = 0,592), noe som indikerer at den matchende for to gruppene var vellykket. De fleste av CRC tilfellene var i NCCN trinn II og III (288/412, 69,9%). Svulster av de fleste CRC tilfeller ble plassert i endetarmen (310/414, 74,9%).
Association of Clinicopathological Kjennetegn på CRC Tilfeller med de to grp78 Polymorfisme
Association analyser mellom genotyper fordeling av de to grp78 polymorfismer og clinicopathological karakteristikker av CRC tilfellene er vist i tabell 2. fordelingen av de variant-allel-bære genotyper (CT + TT) eller CC homozygot genotypen av gRP78 rs391957 polymorfisme var signifikant assosiert med tumorinvasjon trinn ( T1, T2, T3 og T4 stadium) i CRC-tilfeller (P = 0,030). Blant pasienter med varianten T-allelet, 9,0%, 10,1%, 24,9% og 56,0% var i T1, T2, T3 og T4 trinn henholdsvis, mens 7,6%, 16,1%, 14,8% og 61,5% av pasientene med CC homozygot genotype var i T1, T2, T3 og T4 trinnet respektivt. Det var en større tendens for at varianten T allel bærere hadde mindre andel av lymfeknuter metastase (37,6%) sammenlignet med bærerne med CC homozygot genotype (47,1%), selv om forskjellen ikke var statistisk signifikant (P = 0,052). I mellomtiden, genotyper fordeling av GRP78 rs391957 polymorfisme var ikke assosiert med andre clinicopathological data, for eksempel TNM fase, fjern metastase, tumorsetet, tumor differensiering og tumorvekstmønster i CRC-tilfeller (P 0,05). I tillegg var det heller ingen sammenheng mellom fordelingen av de variant-allel bærende genotyper (GA + AA) eller GG homozygot genotype av GRP78 rs430397 polymorfisme og alle clinicopathological egenskaper i CRC tilfeller (P 0,05).
genotyper av to grp78 polymorfisme ble assosiert med økt risiko for CRC
Logistic regresjonsanalyser av genotyper av de to grp78 polymorfismer begge viste signifikante forskjeller mellom CRC saker og kontroller i tabell 3. Sammenlignet med CC homozygot genotype av GRP78 rs391957 polymorfisme, CT heterozygot (Justert OR = 1,39, 95% CI = 1,06 til 1,83, P = 0,018) og TT homozygot (Justert OR = 2,10, 95% CI = 01.06 til 04.14, P = 0,033 ) genotypene ble begge signifikant assosiert med høyere risiko for CRC. De samlede variant T allel bærere (CT + TT) hadde også signifikant høyere risiko for CRC sammenlignet med CC homozygote bærere (justert OR = 1,45, 95% CI = 1.11-1.89, p = 0,006), noe som tyder på at den varianten T-allelet av GRP78 rs391957 polymorfisme kan være en skadelig allel. I tillegg ble lignende trend med høyere risiko for CRC oppdaget i analyser av genotyper av GRP78 rs430397 polymorfisme. Sammenlignet med GG homozygot genotype, GA heterozygot (Justert OR = 1,63, 95% CI = 1.23 til 2.15, P = 0,001) og AA homozygot (Justert OR = 2,92, 95% CI = 1.23-6.94, P = 0,015) genotyper ble begge signifikant assosiert med høyere risiko for CRC. Den samlede variant A allel bærere (GA + AA) hadde også signifikant høyere risiko for CRC sammenlignet med GG homozygot bærere (Justert OR = 1,70, 95% CI = 1.29 til 2.23, P 0,001), og dermed variant A-allelet av GRP78 rs430397 polymorfisme kan være en skadelig allel også.
Diskusjoner
så vidt vi vet, er dette den første studien som har undersøkt om grp78 rs391957 og rs430397 polymorfismer er forbundet med risiko for CRC. I denne sykehusbasert case-control studie fant vi at CT heterozygot, TT homozygot og kombinert (CT + TT) genotyper av GRP78 rs391957 polymorfisme og GA heterozygot, AA homozygot og kombinert (GA + AA) genotyper av GRP78 rs430397 polymorfisme ble begge signifikant assosiert med høyere risiko for CRC i en kinesisk Han befolkning, noe som tyder på at de to grp78 polymorfismer sannsynligvis spille potensielle roller i utviklingen av CRC.
i USA, nye tilfeller med endetarmskreft utgjør i størrelsesorden 40 % av tilfellene med CRC [30]. Men vi fant ut at 75% CRC skjedde i endetarmen i våre saker, noe som var i strid med endetarmskreft regnskap for 40-50% i totale Han befolkningen. Våre data var lik som forrige undersøkelse om sørvestlige kinesiske befolkningen ved Wang
et al.
Hvor 77% CRC var endetarms kreft i sine saker [31]. En mulig forklaring er forekomsten av kreft bør være region-spesifikke. På grunn av den enorme territorium og stor befolkning i Kina, livsstil og økonomisk utvikling er forskjellig i ulike regioner, med ulike tilleggslidelser for ulike kreftformer. Av denne grunn, nå som vår studie fokusert på sørvest Han befolkning i Kina, den høye andelen av endetarmskreft i våre saker som kan avsløre den epidemiologiske situasjonen for CRC i sørvest Han befolkningen var trolig forskjellig fra andelen av endetarmskreft i generelle Han befolkning . På den annen side, så sørvest Kina er en økonomisk underutviklet område, de fleste mennesker i sørvest Kina ikke har råd til rutinemessig screening for CRC. Derfor ble de fleste diagnostiserte tilfeller presentert som symptomatiske sykdommer. Mens endetarmskreft kan være mer opplagt enn ikke-endetarms kreft i tykktarmen, pasienter med endetarmskreft har en større mulighet for å få undersøkelse og behandling enn de med ikke-endetarms kreft i tykktarmen. Dette kan være en annen årsak til høy andel av endetarmskreft i våre tilfeller. Til tross for alt dette, ville de definitivt andeler av endetarmskreft og ikke-endetarmskreft i sørvest Han befolkning trenger videre etterforskning i store og flere sentere studier. I tillegg er forholdet mellom menn til kvinner med CRC i vår studie var 1.39:1, som også var lik som 1.36:1 i forrige undersøkelse om sørvestlige kinesiske befolkningen ved Wang
et al. Product: [31] . Selv om vårt forhold i CRC var høyere enn i USA som vanligvis er godt balansert mellom menn og kvinner, vurderte vi at kjønns rasjon bør også være regionspesifikk grunn av forskjeller i risikoatferd og etniske grupper. Den tidligere studie som viste lavere priser observert blant kvinner sammenlignet med menn kan være relatert til forskjeller i risikoatferd knyttet til tykktarmskreft, som for eksempel røyking, og for ulik effekt av fedme hos menn og kvinner, også pekte på det [32]. Dermed blir høyere andel av menn til kvinner med CRC være representant for kjønnsforholdet i sørvestlige kinesiske befolkningen.
Det er klart at overekspresjon av GRP78 forekommer i ulike menneskelige kreft og kreft cellelinjer, samkjøre med malignitet, metastase og dårlig prognose [13]. Den forhøyede uttrykk for GRP78 økte WHO patologisk grad av primær astrocytom, som sterkt spådd pasientenes prognose [16]. Uttrykket av GRP78 ble oppregulert i prostatakreftceller sammenlignet med godartet vev, og pasienter med høyere uttrykk av GRP78 hadde nesten dobbelt så stor risiko for å dø av prostatakreft sammenlignet med de med svake uttrykk [20]. GRP78 ble sterkt uttrykt i magekreft og syntes å være en uavhengig overlevelse prediktor [21]. En tidligere studie rapporterte at overekspresjon av GRP78 ut til å korrelere med histologisk alvorlighetsgrad fra normal tykktarm vev til colonadenomceller til tykktarmskreft, som indikerte at overekspresjon av GRP78 kan være en markør for malign transformasjon av CRC [22]. Videre er en annen studie viste at knockdown av GRP78 inhiberte proliferasjon av CRC-celler og økt apoptose av CRC celler in vitro, noe som indikerer at ekspresjon av GRP78 kan forbedre spredning av CRC-celler og å beskytte dem mot apoptose [23].
Flere studier har vist at polymorfismer i promotoren av genet er sannsynlig å forsterke eller svekke ekspresjonen av genet [33] – [35]. Den rs391957 polymorfisme ligger i promotoren av GRP78-genet [24]. Det er blitt bemerket at rs391957 polymorfismen endret ekspresjon av GRP78 i celler under forskjellige forhold. Nærmere bestemt i normale celler, de variant-t allel bærere hadde lavere basal promoter-aktivitet enn CC homozygote bærere. Imidlertid, i celler under forutsetning av ER stress, de variant-t allel bærere hadde signifikant høyere ekspresjon av GRP78 enn CC homozygote bærere [25]. Dermed blir variant T-allelet fra GRP78 rs391957 polymorfisme øker sannsynligvis ekspresjonen av GRP78 i forskjellige cancere derved påvirker utvikling og progresjon av kreft. Disse funn er i overensstemmelse med den tidligere undersøkelse som viste at CRC-pasienter med CT heterozygot eller TT homozygote genotyper hadde en betydelig høyere risiko for tilbakefall tumor sammenlignet med pasienter med CC homozygot genotype [27]. Deretter har vår nåværende studie lignende funn som viste at varianten T allel bærere hadde høyere risiko for CRC sammenlignet med de ville C allel bærere. Sammen er disse data gir foreløpige støtte at varianten T-allelet fra GRP78 rs391957 polymorfisme kan være både en mottagelig markør og et prognostisk markør for CRC, og har en viktig funksjon i utvikling og progresjon av CRC grunn til å øke ekspresjonen av GRP78. Men noen resultater fortsatt contradictive. Den siste studien viste at C-allelet av GRP78 rs391957 polymorfisme var assosiert med økt risiko for HCC og C-allel bærere hadde høyere mRNA og protein uttrykk for GRP78 i HCC [29]. Den mulige forklaringen er at betingelsene for ER stress er forskjellig i ulike typer kreft. Dermed blir flere og flere undersøkelser er nødvendig for å oppdage og bekrefte roller GRP78 rs391957 polymorfisme.
Vi fant også at den varianten T-allelet av GRP78 rs391957 polymorfisme var assosiert med lokal tumorinvasjon av CRC. Men på grunn av den retrospektive design og relative antallet tilfeller som er involvert, ytterligere potensiell biomarkør integrerte kliniske studier og celler og vev eksperimenter vil være nødvendig å validere vår resultatet og identifisere hvilken rolle rs391957 polymorfi spiller i utviklingen av CRC. I vår studie, T4 scenen var de fleste av tilfellene. Tumor scenen er ofte forbundet med mangel på screening, tilgang til medisinsk hjelp og så videre. Dermed kan resultatet vårt viser også at det er en mangel på screening for CRC i sørvestlige kinesiske befolkningen. Pasienter med CRC klarte ikke å få rask diagnostisering, slik at flertallet av dem var på avanserte stadier når de fikk riktig behandling. Det er nødvendig at sørvest kinesisk betale mer oppmerksomhet til rutinemessig screening for CRC. I tillegg har tidligere studie funnet høyere ekspresjon av GRP78 bidratt til å øke lymfeknutemetastase i magekreftpasienter [21]. I motsetning til dette, fant vi at CRC pasientene med den varianten T allelet som bidrar til høyere ekspresjon av GRP78 kan ha mindre mulighet for lymfeknutemetastase. Begrensninger av vår lille utvalgsstørrelse vil trolig være årsaken. Alternativt rollene til GRP78 i å påvirke status av lymfeknutemetastase er forskjellige i ulike kreftformer.
Den varianten T allelet frekvens er ca 29% i asiatiske befolkningen, 36% i europeiske befolkningen, 29% i USA og bare 9% i afrikanske befolkningen. Dermed det faktum at de fleste bestandene dele lignende andeler av T bærere forsterker viktigheten av våre funn og behovet for videre studier. Imidlertid er etnisitet av stor betydning i polymorfisme analyse, og våre funn trenger også studier om andre etniske befolkningsgrupper for å bekrefte det i fremtiden.
polymorfismer i intron av genet har fått mindre oppmerksomhet, men begynner å bli anerkjent for deres potensielle bidrag til utvikling og progresjon av sykdommer, inkludert kreft [36]. Det er spleising Enhancer og skjøting støydempere områder i hele introner av gener. Sekvens endringer i noen av disse intronic områder kan føre til endring i spleising av pre-mRNA som bidrar til ondartet progresjon [37]. Den rs430397 polymorfisme er bare ligger i oppstrøms for intron /ekson grense innenfor den femte intron av GRP78-genet [36]. Den tidligere studie har for det første vist at variant A-allelet av GRP78 rs430397 polymorfisme var assosiert med høyere risiko og dårlig prognose av leverkreft [26]. En annen studie har også vist at de AA homozygote bærere hadde høyere RNA og protein ekspresjon av GRP78 sammenlignet med de GG homozygote bærere i vev, og at AA bærere hadde dårlig prognose av ikke-småcellet lungekreft [28]. Mekanismen for GRP78 rs430397 polymorfisme påvirker utvikling og progresjon av kreft er uklar. En hypotese er at dette allel variasjon i intron sannsynligvis endrer spleising av pre-mRNA, og dermed påvirke ekspresjon av GRP78 ved å endre effektiviteten av translasjon eller mRNA stabilitet [36]. Resultatet av vår studie som viste at den varianten A allel bærere hadde høyere risiko for CRC i forhold til CC homozygote bærere har gitt indirekte bevis for å støtte hypotesen. Derfor kan den variant A allelet være i stand til å øke ekspresjonen av GRP78, men den ytterligere funksjon undersøkelser er nødvendig for å forklare den nøyaktige mekanisme. Videre variant A allel av GRP78 rs430397 polymorfisme kan være en markør utsatt for CRC, men hvorvidt varianten A allelet er forbundet med prognosen av CRC er fortsatt ikke kjent.
Det har vært omtrent 200 kjente polymorfismer innenfor den GRP78 genet [36]. Basert på tidligere studier ble polymorfismer av rs391957 og rs3216733 helt knyttet [25], og polymorfismer av rs391957, rs17840761 og rs12009 var i koblingsulikevekt mens haplotyper av dem ikke var assosiert med CRC [28]. Videre polymorfismer av rs17840761 og rs12009 var ikke forbundet med CRC [28]. I tillegg ble det ikke funnet at andre polymorfismer og rs430397 polymorfisme var i koblingsulikevekt.
Konklusjon
Det var signifikant sammenheng mellom risiko for CRC og grp78 rs391957 og rs430397 polymorfismer. Både variant T-allelet av rs391957 polymorfisme og variant A-allelet av rs430397 polymorfisme var assosiert med høyere risiko for CRC i sørvestlige kinesiske Han befolkningen, selv om den varianten T-allelet av rs391957 polymorfisme påvirket lokale tumorinvasjon stadier og status av lymfeknutemetastase behov å bli testet videre i prospektive større skala studier i fremtiden. Disse foreløpige funn antydet at grp78 polymorfismer kan gi ledetråder til prognosen mottakelighet for CRC. Men de nøyaktige mekanismene bak forholdet grp78 polymorfismer og CRC trenger også videre etterforskning.
Takk
Vi takker Xueping Zhang, Su Peng og Yaling Zhang for deres hjelp i å samle inn blodprøver, Keling Chen og Zhaoying Lu for deres laboratorium hjelp.
