Abstract
Bakgrunn og mål
transkripsjon faktor 3 (
TCF3
) impliserer Wnt signalveien og regulerer E-cadherin uttrykk, som er involvert i aggressivitet av svulster. Denne studien tar sikte på å undersøke hvilken rolle
TCF3
forutsi prognosen for pasienter med stadium II og III tykktarmskreft (CRC).
Metoder
Real-Time kvantitativ PCR var utført i 64 friske CRC vev og 6 cellelinjer for å undersøke
TCF3
mRNA uttrykk. TCF3 protein uttrykk dynamikk ble oppdaget av immunhistokjemi av 118 parafininnstøpte prøvene, og den kliniske betydningen av TCF3 ble vurdert av klinisk sammenheng og Kaplan-Meier analyser. Avvikende hypometylering av
TCF3
arrangøren ble også undersøkt ved hjelp bisulfite sekvensering og metylering spesifikk PCR.
Resultater
oppregulering av
TCF3
mRNA var ofte påvises både i CRC-vev med tilbakefall og metastase-avledede cellelinjer. Uttrykket nivået av TCF3 protein var signifikant korrelert med histologisk type (
P
= 0,038) og sykdomsfri overlevelse (
P
= 0,002). Høyere TCF3 uttrykk indikert dårlige prognostiske utfall (
P
0,05, log-rank test). Multivariat analyse viste også sterk TCF3 protein uttrykk og perinevral invasjonen var uavhengige ugunstige kunngjør i CRC (
P
= 0,010, 0,000). Videre ble det vist at arrangøren hypometylering av
TCF3
er assosiert med sin up-uttrykk.
Konklusjoner
Denne studien fremhevet den prognostiske verdien av
TCF3
i stadium II og III CRC. Den oppregulering av
TCF3
, som hovedsakelig er forårsaket av arrangøren hypometylering, er en av de molekylære mekanismene som er involvert i utvikling og progresjon av CRC
Citation. Li C, Cai S, Wang X, Jiang Z (2014) Hypomety-lering-Associated oppregulering av
TCF3
Expression og regelmessighet i Stage II og III tykktarmskreft. PLoS ONE 9 (11): e112005. doi: 10,1371 /journal.pone.0112005
Redaktør: Anthony WI. Lo, Queen Mary Hospital, Hong Kong
mottatt: 10 april 2014; Godkjent: 11 oktober 2014; Publisert: 06.11.2014
Copyright: © 2014 Li et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet:. Den forfatterne bekrefter at for godkjente grunner, noen tilgangsbegrensninger gjelder datagrunnlaget funnene. Dataene er tilgjengelige fra Fudan University i Shanghai Cancer Center etiske komité for forskere som oppfyller kriteriene for å få tilgang til konfidensielle data. Forespørsler om å få tilgang til data kan sendes til professor Sanjun Cai. (E-post: [email protected])
Finansiering: Denne studien ble støttet av Science Foundation Postdoktor i Heilongjiang-provinsen (LRB87859), Medical Scientific Research Foundation Heilongjiang-provinsen (2011-144), åpningen prosjekt Key Laboratorium for medisinsk genetikk av Heilongjiang høyere utdanningsinstitusjoner og Science Foundation Natural i Heilongjiang-provinsen (H201332). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
tykktarms~~POS=TRUNC kreft~~POS=HEADCOMP (CRC) er en av de tre viktigste årsakene til kreft-relaterte dødsfall blant over hele verden [1]. Stage II og III svulster sammen representerer ca 70% av CRC pasienter [2]. Regional lymfeknute metastaser er en av de mest kraftfulle indikatorer på aggressivitet CRC og hjelpemidler i å forutsi klinisk utfall. Men en tredjedel av CRC pasienter uten histologiske tegn på spredning til lymfeknuter dø innen fem år etter operasjonen fra fjernmetastaser eller lokalt tilbakefall, noe som antydet at knutepunktstatusen ikke kan forutsi det kliniske forløpet av CRC tilstrekkelig [3]. Det er derfor viktig å identifisere prognostiske faktorer forutsi dårlig resultat og guiding terapi i stadium II og III CRC.
transkripsjon faktor 3 gen (
TCF3
) ble plassert i kromosom bandet 19p13.3.
TCF3
er en allestedsnærværende uttrykt transkripsjonsregulator og koder to grunnleggende helix-loop-helix (HLH) transkripsjonsfaktorer, E12 og E47 [4]. Disse to proteiner er karakterisert ved bred uttrykksmønster og evne til å binde DNA [5] – [8]. Flere studier har rapportert den nye rollen
TCF3
i eksperimentelle tumorer. Overekspresjon av TCF3 har blitt oppdaget i CRC [9], prostata kreft [10], [11], magekreft [12] og nyrekreft [13]. Som et transcriptional repressor av E-cadherin,
TCF3
innblandet i epiteliale til mesenchymale overgang, og kan være knyttet til tumor aggressivitet [14]. Økende transkripsjonen aktivitet av
TCF /β-catenin
komplekset er den innledende hendelsen i de fleste kolorektal sporadiske svulster [15]. Selv om betydelige studier hadde vist
TCF3
var en svulst promoter, dens rolle i kreft progresjon er fortsatt kontroversielt [16], [17]. Patel
et al
. gitt tre scenarier for å demonstrere potensialet
TCF3
regulerte mekanismer på molekylært nivå [11].
Målet med denne studien er å vurdere den kliniske betydningen av
TCF3
i menneskelig CRC, og å undersøke mekanismer medier overekspresjon av
TCF3
, som bistår i tidlig identifisering av en høy-risiko tilbakefall undergruppe av pasienter med stadium II og III CRC.
Materialer og metoder
Pasienter og prøver vev
Fra april 2000 til november 2004, 64 friske CRC vev, 36 med tilbakefall og 28 uten tilbakefall, ble samlet umiddelbart etter operasjonen ved Fudan University i Shanghai Cancer Center (Shanghai, Kina ). Kjennetegn på prøvene ble vist i tabell 1. Totalt 118 parafininnstøpte prøvene, 78 med tilbakefall og 40 uten tilbakefall, ble samlet retrospektivt fra arkivmateriale oppbevares i avdeling for patologi ved Fudan University i Shanghai Cancer Center (Shanghai, Kina) mellom februar 1993 mars 2004, disse prøvene var fra forskjellige pasienter fra de som brukes for mRNA-analyse (tabell 2).
Alle prøvene som ble undersøkt ble tatt fra vitale kjerner av histopathologically bekreftet kreft ved primær kirurgi hos pasienter som ikke har gjennomgått noen lokal eller systemisk behandling før operasjonen. Tumorprøver ble gjennomgått av minst 2 erfarne patologer, og tumorstadium ble tildelt på grunnlag av et system av International Union mot kreft. Ingen stadium II, men alle stadium III pasienter fikk postoperativ kjemoterapi, men ingen pasienter fikk strålebehandling.
Sykdomsfri overlevelse ble definert som tiden er gått fra datoen for den første diagnosen til utseendet på lokale tilbakefall eller fjernmetastaser . Skriftlig informert samtykke ble innhentet fra alle pasienter, og forskningsprotokollen ble godkjent av etisk komité ved Fudan University i Shanghai Cancer Center.
Cellelinjer
Seks menneskelige CRC cellelinjer ble hentet fra den amerikanske Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA). Tre er primær-tumor-avledede linjer (SW480, Caco-2, HCT116) ble 2 er lymfe-node-metastaser-avledede linjer (SW620, LoVo), og en er abdominal Ødem-metastaser-avledet linje (Colo205). Cellelinjer LoVo og Colo205 ble dyrket i RPMI-1640 medium, mens Caco-2 og HCT116 ble dyrket i Eagle minimums viktig medium og McCoys 5a medium endret, henholdsvis. Både SW480 og SW620 ble dyrket i Leibovitz L-15 medium. Alle media ble supplert med 10% føtalt bovint serum (Gibco, USA), penicillin 100 IU /ml og streptomycin 100 ug /ml ved 37 ° C i en 5% CO
2- fuktig atmosfære. Fremgangsmåten i cellekulturen ble tidligere beskrevet [18].
mRNA-analyse av qPCR
Total RNA ble isolert med en RNeasy Mini Kit (Qiagen GmbH, Hilden, Tyskland) og behandlet med DNase. Ifølge produsentens instruksjoner, ble cDNA syntetisert med Oligo-dT primere (Promega, Madison, WI).
TCF3
-spesifikke primere som ble brukt var 5′-CTCGAGAAGAACAGGCCAAG-3 «(forword) og 5′-GGGGCAGGTACTGAACACAT-3» (bakover). Glyseraldehyd-3-fosfat dehydrogenase (
GAPDH
) fungerte som kontrollgruppe for normalisering av genekspresjon og ble forsterket ved hjelp av primere 5′-GAAGGTGAAGGTCGGAGTC-3 «(fremover) og 5′-GAAGATGGTGATGGGATTTC-3» (bakover) . QPCR ble utført ved anvendelse av standard PCR-syklus på en sekvens deteksjonssystem ABI Prism 7900HT (Applied Biosystems), og amplifisert cDNA ble oppdaget av SYBR grønn I fargestoff (Qiagen GmbH, Tyskland). Data ble analysert ved hjelp av ABI Prism 7900 SDS programvare (Sequence Detection System 2.0; Applied Biosystems). Forhold av intensitetene av målgenet og
GAPDH
signaler ble brukt som et relativt mål på ekspresjonsnivået av målgener. Alle forsøk ble gjentatt tre ganger.
Immunohistochemistry
Arkiv hematoksylin og eosin-farget lysbilder ble anmeldt av 2 erfarne patologer i accordence med 2000 World Health Organization klassifisering. En 3-lags histologisk gradering systemet ble brukt. TNM stadium ble evaluert i henhold til 2002 International Union Against Cancer klassifisering.
En polyklonale kanin antihuman
TCF3
antistoff (fortynning 1:400) ble hentet fra Abcam (Cambridge, UK). I studien ble 4-um seksjoner fra arkivparafinblokker deparaffinized og oppvarmet to ganger i 10 minutter hver i en mikrobølgeovn (500 W) før eksponering overfor det første antistoff. Immunoperoksidasefarging ble utført ved hjelp av to-trinns EnVision metode (DAKO, Glostrup, Danmark) i henhold til produsentens instruksjoner og visualisert med 3,3′-diaminobenzidin tetrakloridet (Sigma, St. Louis, MO).
Cytoplasm og nukleær farging ble målt for dette antistoff. Positive celler ble talt av 2 patologer som var blind for klinisk utfall. For clinicopathological korrelasjon, anvendte vi en 4-lags poengsystem (negativ til 3+), som tok hensyn til prosentandelen av positive celler og fargeintensitet som tidligere beskrevet [18]. Den nærmere fremgangsmåten ble anvendt for å generere en poengsum for hvert vev kjerne som følger: ingen farging eller beising i 10% av tumorceller (0 poeng), svakt /knapt merkbar delvis farging i 10% av tumorcellene (skår 1 +), svake til moderate flekker i 10% av tumorcellene (resultater 2+), og sterk farging i 10% av tumorcellene (resultater 3+). Vi separat tolket TCF3 – og 1+ som «lav uttrykket «og
TCF3
2+ og 3+ som» sterkt uttrykk»
Bisulfite genomisk sekvensering (BGS)
. genomisk DNA ble isolert fra vev ved hjelp av DNeasy Kit (Qiagen, Hilden, Tyskland) og lagret ved -20 ° C før bruk. DNA ble modifisert med EZ DNA Metylering-gull KitTM (ZYMO, Orange, CA) i henhold til produsentens anvisninger. Generelt ble 1 ul modifisert DNA som anvendes i påfølgende PCR. De primere for BGS er 5′-GTATAAGGTTGAAAATTTGGGT-3 «(fremover) og 5′-CTCCCTAAAATCCTAAAAATCTTA-3» (bakover). Den PCR-termocykling betingelsene var en syklus ved 95 ° C i 15 minutter; 30 sykluser ved 94 ° C i 30 sekunder, 52 ° C i 30 sekunder og 72 ° C i 30 sekunder, og endelig forlengelse ved 72 ° C i 7 minutter. PCR-produktene ble renset med Gel Extraction Kit (Qiagen), klonet inn i pMD20-T vektor (Promega, Madison, WI, USA), og deretter transformert inn i
Escherichia coli-stamme DH10B
. 10-15 kolonier ble valgt for å bekrefte tilstedeværelse og størrelse av det klonede innskuddet. Fem positive kloner for hver prøve ble utvalgt og amplifisert ved hjelp av vektoruniverselle primere P2, 5′-GTAAAACGACGGCCAGT-3 «, P4, 5′-AGAGGATAACAATTTCACACAGGA-3». Etter rensing sekvensen av PCR produktet er analysert ved hjelp av ABI 3730 DNA Sequencer (Applied Biosystems).
Metylering spesifikk PCR (MSP)
primere for metylert sekvens av TCF3 genet var 5′ AATTTTATAGGAAAAAGGCGC-3 «(fremover) og 5′-AACCTCGAACGCACATACTA-3′ (bakover). For unmethylated sekvens var 5»-TGGAATTTTATAGGAAAAAGCTGT-3 «(fremover) og 5′-AAAAACCTCAAACACACATACTA-3» (bakover). Qiagen HotStarTaq DNA-polymerase ble brukt for PCR. Termocykling betingelsene som ble benyttet var en syklus ved 95 ° C i 15 min; 30 sykluser ved 94 ° C i 30 s, 53 ° C (for M primersett) eller 51 ° C (for U primersett) i 30 s, og 72 ° C i 30 s; og endelig forlengelse ved 72 ° C i 7 min. PCR-produktene ble lastet 2% agarosegeler etterfulgt av farging med etidiumbromid og direkte visualisert under UV-belysning. En prøve ble klassifisert som hypermethylated når metylering amplifikasjonsproduktet alene ble observert, delvis metylert når både denaturert og unmethylated amplifiseringsprodukter ble observert, og unmethylated da det viste unmethylated amplifiseringsprodukter alene, eller verken amplifiseringsprodukter ble funnet. For statistisk analyse ble hypermethylated og delvis metylerte prøver betraktes som den metylert (M) gruppe og sammenlignet med den unmethylated (U) gruppe [19].
Statistisk analyse
Statistiske analyser ble utført med Stata (versjon SE /10; StataCorp, College Station, TX). Foreningen blant kategoriske data ble analysert ved hjelp av χ2 test. Overlevelseskurver ble generert av Kaplan-Meier-metoden, og univariable overlevelses fordelinger ble sammenlignet med bruk av log-rank test. Den multivariate Cox modellen ble brukt for påvisning av uavhengige prognosticator. Den 2-tailed
P
verdi for signifikans ble etablert på 0,05.
Resultater
TCF3
uttrykk var oppregulert i tilbakevendende CRC vev og CRC – metastase avledet cellelinjer
i 64 nye prøver,
TCF3
mRNA uttrykk var betydelig høyere i tilbakevendende CRC vev enn i de uten tilbakefall (
P
= 0,026; figur 1a). Mottaker-operator kurve (ROC) analyse viste at den beste cut-off-verdi for å skjelne mellom tilbakevendende og ikke-tilbakevendende CRC var 0,0041. De områdene under ROC-kurver var 0,668 (95% KI 0,534 til 0,803) (Figur 1b). Relative mengder av
TCF3
mRNA i CRC-cellelinjer ble uttrykt som N-ganger forskjell i forhold til Caco-2 og normaliseres til den
GAPDH
som en referanse genet.
TCF3
mRNA uttrykk i SW620, LoVo, og Colo205 økte 3.4-, 1.8- og 6.9-fold, sammenlignet med den til Caco-2. Mens
TCF3
mRNA nivåer av SW480 og HCT116 ble redusert 0,5- og 0,4 ganger i henholdsvis (figur 1c). For 118 farging prøvene ble TCF3 protein uttrykk signifikant assosiert med tilbakefall (tabell 3).
(a) I tilbakevendende CRC,
TCF3
mRNA nivåer ble betydelig økt comared til CRC uten tilbakefall ( Wilcoxon Signed Ranks Test,
P
0,05). (B) ROC kurve som viser resultatene for
TCF3
i å forutsi tilbakefall av CRC. Areal under kurven (AUC) = 0,668 (95% KI 0,534 til 0,803),
P
verdi = 0,012. (C)
TCF3
mRNA nivåer ble målt med qPCR i 6 CRC cellelinjer.
GAPDH
signaler ble brukt som et relativt mål på ekspresjonsnivået av målgener. De representative resultater, utført i tre paralleller, er vist som gjennomsnitt ± SD.
Sammenheng mellom
TCF3
protein uttrykk og clinicopathological funksjoner
Positiv farging var observert hovedsakelig i cytoplasma og kjernekraft av kreftcellene. Analyse av TCF3 uttrykk i de 118 CRC-vev viste at 37% av prøvene viser sterk (2+ og 3+) intensiteter og 63% lave (+ og -) intensiteter. Farging av TCF3 proteiner er illustrert i figur 2.
Eksempler på farging av TCF3 ved sterk ekspresjon (a, b) og lav ekspresjon (c, d) -nivåer (forstørrelse x 400).
Ingen signifikante forskjeller ble observert vedrørende alder, kjønn, størrelse, lymphvascular og perinevral invasjon. Men sykdomsfri overlevelse var signifikant lavere hos pasienter med høyt TCF3 protein uttrykk enn hos dem med lav uttrykk (
P
= 0,002), og TCF3 uttrykk var signifikant assosiert med histologisk type kreft (
P
= 0,038). Tabell 2 viser forholdet mellom clinicopathological funksjoner og TCF3 protein uttrykk in118 prøver.
TCF3
protein uttrykk og sykdomsfri overlevelse
Univariat analyse av Kaplan-Meier plott avslørt at sterke TCF3 uttrykk var signifikant assosiert med resultater ugunstige sykdomsfri overlevelse (
P
= 0,0001). Kaplan-Meier-kurver ikke påvise noen forskjell i overlevelse CRC samsvar med andre parametere, blant annet kjønn, alder, tumor plassering, og lymphvascular invasjon (
P
0,05). Men overlevelse distribusjoner var signifikant forskjellig i CRC med og uten perinevral invasjon. Karakteristiske plott av TCF3 ekspresjon og perinevral invasjon er vist i figur 3. Sterk TCF3 ekspresjon ble forbundet med tilbakefall (tabell 3). Multivariat Cox analyse indikerte at perinevral invasjon, TCF3 protein uttrykk, og kjemoterapi var uavhengige variabler (
P
= 0.00, 0.01 og 0.01) (tabell 4).
(a) Pasienter med høyt TCF3 uttrykk (n = 44) viste en signifikant dårligere prognisis enn de med lav TCF3 uttrykk (n = 74;
P
0,05, log-rank test). (B) Pasienter med perinevral invasjon (n = 17) viste signifikant dårligere prognisis enn de uten slik invasjon (n = 101;
P
0,05, log-rank test).
Up-uttrykk for
TCF3
er assosiert med sin promoter CpG island hypometylering
En CpG island omfatter ca 2,3 kb ble funnet i menneske
TCF3
genet promoter-regionen (figur 4c). For å forstå mekanismen av
TCF3
regulering i CRC, metylering status i promoter-regionen i
TCF3
ble testet. Vi forsterket og sekvensert arrangøren regionen i
TCF3
hjelp natriumbisulfitt behandlet genomisk DNA fremstilt fra CRC vev. Tettere denaturert CpG nettsteder (90,7% vs. 44,3%) ble påvist i engangs CRC vev i denne studien (figur 4d, 4e og 4f). For ytterligere å validere sekvenseringsresultatene, ble promotorområdet, karakterisert ved MSP hjelp av metylering eller unmethylation-spesifikke primere i 47 CRC-prøver. Metylering av
TCF3
ble påvist i 23 av (95,8%) 24 engangs CRC prøver. I motsetning til dette, hyppigheten av metyleringen var merkbart lavere i tilbakevendende CRC-prøver (16/23, 69,6%;
P
= 0,023, figur 5a, 5b). Videre ble det vist at
TCF3
uttrykk signifikant assosiert med metylering status, noe som indikerer epigenetical inaktivering kan spille en viktig rolle i regulerings av
TCF3
uttrykk (
P
= 0,001, figur 5c).
plassering av
TCF3
genet i menneskets kromosom 19 (ch19p13.3). (A) Exon struktur av det humane
TCF3
genet. (B) Oppbygging av 5 «enden av
TCF3
genet. Graf av prosent guanin (G) og cytosin (C) nukleotider på tvers av denne regionen, plassering av CpG-dinukleotider innenfor dette området, og grensene av CpG øya (skravert område). (C) Representative eksempler på kromatogrammer av CpG sider hentet fra bisulfitt sekvensering av
TCF3
fragment i CRC uten tilbakefall (d) og med tilbakefall (e, f).
M, metylert allel; U, unmethylated allel. (C) omvendt korrelasjon mellom
TCF3
promoter metylering status og genuttrykk nivå ved qPCR analyse av
TCF3
uttrykk i de 47 CRC vev. Baren representerer forholdet
TCF3 Hotell og
GAPDH
mRNA uttrykk nivåer.
TCF3
uttrykk nivåer korrelert med metylering status av genet (
P
= 0,001, Mann-Whitney U-test).
Diskusjoner
Vår studie undersøker sammenhengen mellom TCF3 uttrykk og clinicopathological funksjoner hos pasienter med stadium II og III CRC. Den TCF3 uttrykk i tilbakevendende CRC vev ble funnet betydelig høyere enn i de uten tilbakefall. Survival analyse viste at sterk TCF3 protein uttrykk og perinevral invasjonen var uavhengige ha negativ prognostiske faktorer, og kjemoterapi var et selvstendig beskyttelsesfaktor. For å eliminere behandling skjevhet forårsaket av adjuvant kjemoterapi, analyserte vi sammenhengen mellom TCF3 uttrykk og overlevelse i stadium II og III pasienter, henholdsvis. Kjemoterapi påvirket ikke sammenhengen mellom TCF3 uttrykk og prognose (figur S1).
Hypomety-lering av promoter CpG øyene onkogen er i stand til å aktivere disse genene. For å avgjøre om oppregulering av TCF3 var assosiert med avvikende metylering, undersøkte vi metylering frekvens på 47 CRC vev ved MSP. Det metylerte allelet ble påvist i 39 av 47 (83%) tumorer som ble testet. Hyppigheten av metylering var betydelig lavere i tilbakevendende CRC prøvene sammenlignet med svulster uten tilbakefall (
P
= 0,023).
TCF3
uttrykk i 39 svulster med arrangøren metylering var betydelig lavere enn i 8 tilfeller uten promoter metylering (
P
= 0,001), noe som indikerer at arrangøren hypometylering var den viktigste mekanismen for oppregulering av
TCF3
. Økt
TCF /β-catenin
signalering er en av kjennetegnene til CRC [20]. Vi, her, gi bevis som viser metylering av
TCF3
er en vanlig hendelse i kolorektal tumorer. Disse dataene tyder på at
TCF3
metylering inaktivering er nødvendig for den hemmende onkogene potensialet i
TCF /β-catenin
signalering. Tvert imot, avvikende hypometylering øker
TCF3
uttrykk, som er forbundet med gjentakelse av trinn II og III CRC.
Medlemmene av
TCF
familie bind til ufosforylerte β- catenin [21] – [24] og regulere transkripsjon av målet gener, for eksempel
TCF
selv og onkogener
cyclin D1 Hotell og
c-myc product: [25], [26]. Misregulation av dette signalveien er en viktig begivenhet i utviklingen av flere kreftformer som tykktarmskreft, melanom og prostatakreft. Foruten misregulation av
TCF /β-catenin
reaksjonsveien i tumorceller, har det vært kjent at funksjonsfeil av E-cadherin tillater tumorceller å invadere omgivende vev [27]. E-cadherin uttrykk er også redusert eller fraværende i mange epiteliale kreftformer, blant annet mage og brystkreft [28] – [30]. Som en transkripsjons repressor, rollen
TCF3
er å nedregulere E-cadherin i løpet av tumorprogresjon [31], [32].
TCF3
binder E-box elementer ved den proksimale arrangøren stedet av E-cadherin fører til transciption inaktivering av E-cadherin og E-cadherin downregulation spiller en viktig rolle i å redusere celle-celle adhesjon systemer og fremmer metastase [33].
i lys av de omfattende data som presenteres i denne studien, foreslår vi at over-uttrykk for TCF3 i stadium II og III CRC pasienter ble signifikant assosiert med dårlig prognose og lav sykdomsfri overlevelse (figur 3), noe som bidrar til å identifisere de med høy risiko CRC-pasienter. Noen stadium II og alle stadium III CRC tilfeller kan anses for adjuvant behandling [34]. Men det er fortsatt uklart hvilken rolle adjuvant kjemoterapi hos pasienter med stadium II svulster [35], [36]. Slik velger du høy risiko stadium II sykdom og maksimere nytten av adjuvant behandling, kan en uavhengig prognostisk markør være nyttig for å identifisere aggressive fenotyper innen stadium II CRC. Vi har identifisert GAS1 som en faktor for å velge pasienter med høy risiko for tilbakefall i vårt tidligere arbeid [18], og noen interessant kandidat gener som prognostiske faktorer for disse prøvene er også validere i vårt laboratorium (upubliserte data). I denne studien viste vi at sterke
TCF3
uttrykk kan identifisere en undergruppe av pasienter med høy risiko for tilbakefall og disse pasientene kan derfor ha nytte av mer aggressiv behandling.
I konklusjonen, våre data fremhever den sentrale rollen som
TCF3
hypometylering i CRC tilbakevendende utvikling. Disse resultatene understreker potensialet prognostisk verdi på
TCF3
som en biomarkør for å velge adjuvant behandling for pasienter med høy risiko for et dårlig resultat.
Hjelpemiddel Informasjon
Figur S1.
Kaplan-Meier estimert overlevelse etter TCF3 uttrykk. Pasienter med høy TCF3 uttrykk viste signifikant dårligere prognisis enn de med lav TCF3 uttrykk i stadium II (a) og III pasienter (b) (
P
0,05, log-rank test)
doi.: 10,1371 /journal.pone.0112005.s001 plakater (TIF)
