Abstract
Kastrering bestandig utviklingen av prostatakreft etter androgen deprivasjon terapi er fortsatt den mest kritiske utfordringen i den kliniske behandlingen av prostatakreft. Gjenoppvåknende androgenreseptoren (AR) aktivitet er et etablert drivkraft for kastrering-resistente progresjon, og oppregulering av full-lengde AR (AR-FL) og konstitutivt aktive AR spleisevarianter (AR-Vs) har blitt implisert å bidra til gjenoppblussende AR aktivitet. Vi rapporterte tidligere at ginsenoside 20 (S) -protopanaxadiol-aglycone (PPD) kan redusere overflod av både AR-FL og AR-Vs. I denne studien, viste vi videre at effekten av PPD på AR uttrykk og målgener var uavhengig av androgen. PPD-behandling resulterte i en undertrykkelse av ligand-uavhengig AR transaktivering. Videre PPD forsinket kastrering-resistente gjenvekst av LNCaP xenografttumorer etter androgen deprivasjon og hemmet veksten av kastreringsresistent 22Rv1 xenografttumorer med endogen uttrykk for AR-FL og AR-Vs. Dette ble ledsaget av en nedgang i serum prostataspesifikt antigen nivåer så vel som en nedgang i AR nivåer og mitoser i tumorer. Spesielt de 22Rv1 xenografttumorer var resistente mot veksthemming av neste generasjons anti-androgen enzalutamide. Denne studien er den første til å vise prekliniske effekten av PPD i hemme kastrering-resistente progresjon og vekst av prostatakreft. Funnene gir en begrunnelse for å videreutvikle PPD eller dets analoger for prostatakreft behandling
Citation. Cao B, Qi Y, Yang Y, Liu X, Xu D, Guo W, et al. (2014) 20 (S) -Protopanaxadiol Hemming av progresjon og vekst av Kastrering resistent prostatakreft. PLoS ONE 9 (11): e111201. doi: 10,1371 /journal.pone.0111201
Redaktør: Jindan Yu, Northwestern University, USA
mottatt: 24 juni 2014; Godkjent: 23 september 2014; Publisert: 06.11.2014
Copyright: © 2014 Cao et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet:. Den forfatterne bekrefter at alle data som underbygger funnene er fullt tilgjengelig uten restriksjoner. Alle relevante data er innenfor papir
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av National Cancer Institute of National Institutes of Health gi R01CA188609, Department of Defense gir W81XWH-12-1-0112 og W81XWH-12- 1-0275, Foundation of China Projects National Natural Science 81272851, 30973587, 81102383, 81302206, og 81430087, Louisiana Board-of-Regents Grant LEQSF (2012-15) -RD-A-25, Louisiana Cancer Research Consortium Fund, Tulane Cancer Senter Developmental Fund, og Tulane University School of Medicine Pilot fondet og Bridge Fund. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
androgen deprivasjon terapi, som forstyrrer androgen reseptor (AR) signaliserer gjennom kastrering eller AR antagonister, er førstelinjebehandling for disseminert prostatakreft. Imidlertid progresjon til den for tiden uhelbredelig fase, betegnet kastrering resistent prostatakreft (CRPC), alltid forekommer [1]. Gjenoppvåknende AR-aktivitet er en etablert driver for behandlingssvikt og kastrering bestandig progresjon [2], [3]. Prostatakreft kan tilpasse seg til androgen deprivasjon av mutasjon AR, amplifisering /overekspresjon AR, oppregulering konstitutivt aktive AR spleisevarianter (AR-Vs) som mangler den ligand-bindende domene, aktivering AR av androgen-uavhengige mekanismer, og /eller øke intra -tumoral androgen nivåer gjennom
de novo
androgen syntese [4] – [17]. Som en konsekvens, er AR reaktivert i CRPC selv om svulsten er ikke lenger mottakelig for androgen deprivasjon.
Flere nye legemidler rettet mot AR reaktive i CRPC har blitt utviklet, og to av disse har blitt godkjent av FDA for behandling av metastatisk CRPC,
dvs.
, androgen-inhibitor abiraterone og potent AR antagonist enzalutamide [18], [19]. De innledet en ny æra av prostatakreft behandling. Men mange pasienter er presentert med terapi-resistente sykdom, og de innledende respondere utviklet resistens i løpet av måneder etter behandlingsstart, igjen følges av økt prostata-spesifikt antigen (PSA), noe som indikerer reaktiveres AR signalering [18], [19]. En mulig mekanisme for motstand mot abirateron og enzalutamide har blitt tilskrevet til øket ekspresjon av full-lengde AR (AR-FL) og AR-V s [20] – [24]. Overekspresjon av AR-FL ble vist å sensitivisere reseptoren for lave nivåer av androgen [25], og for å konvertere prostata kreft vekst fra en kastrering-sensitive til en kastrering bestandig trinn [10]. Øket ekspresjon av AR-Vs ble vist å gi kastrering-resistente vekst av prostatakreft [14], [15], [26] – [28], og å korrelere med dårlig overlevelse av pasienter CRPC [29]. Knocking ned AR-FL eller AR-Vs ved shRNA i xenograft modeller kan forsinke utviklingen av prostatakreft til kastrering motstand og /eller undertrykke veksten av prostata svulst som allerede har kommet til kastrering-resistent tilstand [15], [30] , [31]. Derfor bør terapeutiske tilnærminger som kan redusere tilgjengeligheten av både AR-FL og AR-Vs tilby betydelig fordel i å forebygge og hemme prostatakreft tilbakefall etter androgen deprivasjon.
Ginseng er en av de mest commonly- brukte medisinske urter i den vestlige verden, spesielt for kreft intervensjon [32]. Ginsenosides regnes de store farmakologisk aktive ginseng bestanddeler [33]. Vi har tidligere rapportert at en tarm viktigste metabolitt av ginsenosides, er 20 (S) -protopanaxadiol-aglycone (PPD), effektive i downregulating uttrykket og aktiviteten til AR, inkludert både AR-FL og AR-Vs, i menneskelige prostata kreft celler [ ,,,0],34]. Nedgangen i AR uttrykk er på grunn av PPD-mediert redusert transkripsjon av AR-genet og øket proteasom-mediert nedbrytning av AR-FL og AR-V-proteiner [34]. Vi viste videre at PPD også hemmet AR uttrykk i prostata xenografttumorer men ikke i de vanlige verts prostata [34]. I denne studien, vurderte vi preklinisk potensialet i å bruke PPD for å forbedre den terapeutiske utfallet av androgen deprivasjon.
Materialer og metoder
Cellelinjer og reagenser
LNCaP og 22Rv1 celler ble oppnådd fra American Type Culture Collection i passasjen 4. CWR-R1-celler ble levert av Dr. Elizabeth M. Wilson og dyrket som beskrevet [35]. Celler som anvendes i denne studien var i løpet av 20 passasjer (~3 måneder med ikke-kontinuerlig dyrkning). PPD ble hentet fra organisk kjemi Laboratory ved Jilin universitet, Changchun, Kina. Forbindelser med renhet of 98%, som bestemt ved høy-ytelse væskekromatograf, ble brukt i cellekulturstudier, og at det av mer enn 95% ble anvendt i dyrestudier. Enzalutamide ble kjøpt fra Selleck Chemicals (Houston, Texas), og renheten i 99% ble bekreftet av Nuclear Magnetic Resonance
Western blotting
Prosedyren ble beskrevet tidligere [36].. Immunoreaktive bånd ble kvantifisert ved densitometri og normalisert til glyceraldehyd-3-fosfat dehydrogenase (GAPDH). De følgende antistoffer ble anvendt:. Anti-GAPDH (Millipore), anti-AR (Millipore), og anti-AR-V7 (Precision antistoff)
kvantitativ revers transkripsjon-PCR (QRT-PCR)
QRT-PCR ble utført som beskrevet [37]. QPCR primer-probe sett for PSA, trans protease, serin 2 (TMPRSS2), og cyclin A2 (CCNA2) var fra IDT. Primersekvensene for AR isoformer ble som beskrevet [15].
Reporter Gene analysen
androgen-responsive element (ER) -luciferase reporter plasmid, som inneholder tre gjentakelser av ARE-regionen ligert i tandem for ildflue luciferase reporter [38], ble brukt til å måle AR
trans
-aktiverende aktivitet. Det var forbigående co-transfektert inn i celler med PRL-TK
Renilla
luciferase konstruksjon (Promega) på 20:01 forhold som beskrevet [39]. Dual luciferase assay ble gjennomført per produksjon instruksjons (Promega), og aktiviteten av ildfluen luciferase ble normalisert til den av
Renilla
luciferase.
Tumor xenograft modeller,
Mann nakne mus ble oppnådd fra NCI Animal Production Center ved 5-6 ukers alder. For kastrering-resistente progresjon modell av LNCaP tumorer ble mus inokulert subkutant med 4 x 10
6 LNCaP-celler suspendert i 50% Matrigel på den høyre flanke etter en uke av tilpasning. Når tumorstørrelse nådde ~ 100 mm
3, kastrering ble utført
via
en scrotal tilnærming. Dagen etter kastrering, ble musene tilfeldig inndelt i to grupper og mottok 40 mg /kg PPD i olivenolje eller olivenolje som kontroll gjennom oral gavage 6 dager ukentlig. For kastrering-resistente 22Rv1 tumormodell ble mus kirurgisk kastrert etter en uke med tilpasning, og fikk komme seg i 3 dager før de ble inokulert subkutant med 4 x 10
6 22Rv1 celler på den høyre flanke. Dagen etter inokulering, ble musene randomisert og plassert på den samme behandlingsregimer som beskrevet for LNCaP-modellen. Svulst dimensjoner og kroppsvekt ble målt to ganger i uken og ukentlig, respektivt. Tumor volum ble beregnet som
0,524 x bredde
2 x lengde product: [40]. Ved avslutning av forsøket, ble musene bedøvet med ketamin /xylazin, blod samles for serum PSA besluttsomhet bruker kvantitative ELISA (United Biotech), og avlives av CO
2. Svulster ble fjernet, veid, og fiksert i 10% formalin for parafin innebygging og histologiske analyser. Alle dyr prosedyrer ble godkjent av Tulane University Institutional Animal Care og bruk komité.
AR Immunohistokjemiske Analyser
Immunohistochemistry ble utført som beskrevet tidligere [34]. Som negativ kontroll ble det primære antistoff erstattet med en ikke-immun IgG i samme konsentrasjon, og ingen reaktivitet ble påvist. Stained seksjonene ble skannet med Aperio ScanScope Scanner, og digitaliserte bildene ble analysert med Aperio WebScope integrerte algoritmer. For AR farging ble bildene samplet sekvensielt gjennom hver seksjon med områder med nekrose, forberedelse gjenstander og kanter unngås. Intensiteten av nukleær farging ble kategorisert til sterk, svak eller negativ som bestemmes av Aperio Nuclear V9 algoritme. Fosfor-histon H3 farging ble kvantifisert som beskrevet [41]. Fem tilfeldige mikroskopiske feltene ble tatt for hver svulst delen på 10x forstørrelse, og antall fosfor-histon-H3-positive celler ble talt manuelt.
Statistical Analysis
Student tosidige t test ble anvendt for å bestemme gjennomsnittet av forskjellene mellom behandling og kontroll. Data er presentert som gjennomsnitt ± SEM.
Resultater
PPD nedregulering av AR-FL og AR-Vs i Androgen-Fratatt Forhold
Vi først vurdert effekten av PPD på AR-FL og AR-V proteinnivåer i kastreringsresistent 22Rv1 og CWR-R1 celler dyrket i androgen-belastede tilstand. Disse to cellemodeller uttrykke AR-FL sammen med tre ~80-kd stor AR-Vs, nemlig AR-V7, AR-V1 (aka AR4), og AR-V4 (aka AR5) [15], [16]. Western blot analyser ble utført med et antistoff som gjenkjenner alle AR isoformer eller bestemt for AR-V7. Som den mest tallrike og aktive AR-V i celler [15], er AR-V7 den eneste AR-V hvortil et spesifikt antistoff er blitt utviklet. Som vist i figur 1A og 1B, PPD nedregulert både AR-FL og AR-Vs på en tidsavhengig måte, med endringen i AR-Vs lik den for AR-FL i 22Rv1 celler, men litt større betydning enn den for AR -FL i CWR-R1 celler. Vi undersøkte deretter effekten av PPD på mRNA nivåer av ulike AR isoformer i disse cellene dyrket i androgen-belastede tilstand ved QRT-PCR. Som presentert i figur 1C og 1D, PPD behandling også redusert AR-FL og AR-V transkripsjoner i begge cellemodeller. Interessant nok var en beskjeden, men statistisk signifikant økning av AR-V1-ekspresjon observert på et tidlig tidspunkt i 22Rv1 celler. Men økningen ble ikke påført med lengre behandling. Disse resultatene indikerer at PPD kan hemme ekspresjonen av AR-FL og AR-Vs i androgen-belastede tilstand
A B. Western blot-analyse av AR-proteiner med et antistoff som gjenkjenner alle AR isoformer eller spesifikk for AR-V7 i 22Rv1 (A) eller CWR-R1-celler (B). Tallene i tabellen angir relative normaliserte intensiteter av AR-proteinbånd i forhold til kontrollverdien på 100. C. QRT-PCR-analyse av mRNA-nivåer av AR-FL og AR-Vs i 22Rv1 celler. *,
P
0,05 fra kontroll. Celler ble dyrket i androgen-belastede tilstand. PPD, 20 ug /ml. Feil barer, SEM.
PPD Undertrykkelse av androgen uavhengig AR aktivitet
AR-Vs mangler ligand-bindende domene og har androgen-uavhengig konstituerende aktivitet [15], [16 ], [42]. PPD nedregulering av AR-Vs ville være forventet å føre til undertrykkelse av androgen-uavhengig AR transaktivering. Vi har derfor vurdert effekten av PPD på AR-aktivitet i 22Rv1 celler dyrket i androgen-belastede tilstand av reportergenet analysen. Som vist i figur 2A, ble androgen-uavhengig AR transaktivering deprimert av PPD som en funksjon av tid. Ved 6 og 12 timer etter behandling PPD ble aktiviteten inhiberes med 36% og 66%, respektivt. Vi gikk videre å undersøke effekten av PPD på endogene AR-målgener, kanonisk mål PSA og TMPRSS2 samt AR-V-bestemt mål CCNA2 [20], [43], ved QRT-PCR under de samme betingelser. I tråd med reporteren genet resultat, alle mål (Tall 2B 2C) viste en tidsavhengig reduksjon av uttrykk. Tatt sammen, dataene vist evne til PPD til å inhibere androgen-uavhengig AR-FL og AR-V aktivitet.
A. Reporter gen analysen viser PPD hemming av androgen-uavhengig
trans
-aktiverende aktiviteten til AR. 22Rv1 celler ble ko-transfektert med ARE-luciferase konstruere og PRL-TK konstruere, og aktiviteten av ildfluen luciferase ble normalisert ved at av de
Renilla
luciferase. B C. QRT-PCR-analyser som viser PPD redusere uttrykket av den kanoniske AR målene Ptil og TMPRSS2 (B) og AR-V-bestemt mål CCNA2 (C) i 22Rv1 celler. *,
P
0,05 fra kontroll. Celler ble dyrket i androgen-belastede tilstand. PPD, 20 ug /ml. Feil barer, SEM.
PPD Hemming av Kastrering-Resistant Progresjon av LNCaP Svulster
Vi evaluerte deretter effekten av PPD på prostatakreft tilbakefall etter androgen deprivasjon terapi i LNCaP xenograft modell . LNCaP er et androgen-avhengige human prostatakreft cellelinje og uttrykker overveiende AR-FL [44]. Utviklingen av LNCaP xenograft tumorer krever androgener, og kastrering forårsaker en initial retardert vekst av xenotransplantater [45], [46]. Men ligner menneskelige prostata kreft, de xenografter slutt bli kastrering motstandsdyktig og gjenoppta vekst [45] – [49]. Hann nakne mus implantert med LNCaP-celler på den høyre dorsale flanke. Kastrering ble utført når svulstene nådde ~ 100 mm
3. Kastrerte mus ble så delt i to grupper som fikk enten olivenolje som kontroll eller 40 mg /kg PPD gjennom oral gavage 6 dager per uke. Behandlingen ble innledet dagen etter kastrering.
I forhold til LNCaP svulster dyrket i gonade-intakt mus [45], [46], var det en nedbremsing av tumorvekst i begge grupper i løpet av de to første ukene av behandlingen som en første reaksjon på kastrering (figur 3A). Tumorene i kontrollgruppen fortsatte vekst fra dag 17 av behandlings som et resultat av å anskaffe kastrering motstand, mens tumorer i PPD-gruppe forble liten. Fra dag 25, forskjellen i gjennomsnittlig tumorstørrelse mellom de to gruppene ble statistisk signifikant. Ved avslutning av forsøket, den gjennomsnittlige tumorstørrelse var 1000 mm
3 i kontrollgruppen, men 330 mm
3 i PPD gruppen, som indikerer ~67% hemming av tumorveksten av PPD. I tråd med dette resultatet var den gjennomsnittlige tumorvekt var 0,76 g og 0,32 g i kontroll- og PPD-grupper, henholdsvis (figur 3B). I løpet av den 42 dagers behandlingsperioden, ble PPD ikke ut til å forårsake toksisitet i mus som vist på ingen reduksjon i kroppsvekt sammenlignet med kontrollgruppen (figur 3C).
LNCaP-celler ble inokulert i gonade-intakt nakne mus og kirurgisk kastrering ble utført når svulstene nådde ~ 100 mm
3. Behandling med 40 mg /kg PPD via oral sonde 6 dager per uke ble innledet dagen etter kastrering (n = 10). A. Mean tumorvolum. B. Individuelle tumor vekter ved avslutningen av forsøket. C. Mean musekroppsvekt. D. Mean serum PSA nivå bestemt av ELISA, normalisert ved tumor vekter ved avslutningen av studien. *,
P
0,05 fra kontrollgruppen. Feilfelt, er SEM.
prostata svulst tilbakefall etter kastrering assosiert med forhøyet serum PSA nivå [50]. Vi målte nivåene av PSA i museserum ved hjelp av ELISA. Som vist i figur 3D, PPD supplementation førte til en nesten 50% reduksjon i gjennomsnittlig serum PSA-nivå, fra 173 ng /ml /g i kontrollgruppen til 97 ng /ml /g i PPD-gruppen. Nivåene ble normalisert av tumorvekten. Dermed fallet var ikke et resultat av tumorvekst-inhibering, men snarere en indikasjon på PPD undertrykkelse av AR reaktive i tumorene. Vi deretter målt AR protein uttrykk ved immunhistokjemi i formalinfiksert vev. Som vist i figur 4A, redusert PPD behandling prosentandelen av celler med sterk AR farging og samtidig øke prosentandelen av celler med negativ farging. Dataene derfor bekreftet vår
in vitro
resultater, som viser effektiviteten av PPD i downregulating AR nivå og aktivitet i CRPC celler
in vivo
.
Svulster ble høstet på slutten av forsøket i figur 3. A. AR immunhistokjemisk farging av tumorsnitt. Venstre panel, kvantifisering av dataene. Høyre paneler, representative bilder. B. Phospho-histon H3 immunhistokjemisk farging av tumorsnitt. Venstre panel, kvantifisering av dataene. Høyre paneler, representative bilder. C. H 0,05 fra kontrollgruppen. Feil barer, SEM.
Vi har evaluert videre effekten av PPD på mitose i svulstene via immunhistokjemi bruker et antistoff mot fosfor-histon H3, en markør for mitose [41]. Som vist i figur 4B, PPD supplementation forårsaket en signifikant reduksjon i gjennomsnittlig antall mitoser per bildefeltet. Hematoxylin og eosin (H 0,05 fra kontrollgruppen. Feilfelt, SEM.
Svulster ble høstet på slutten av forsøket i figur 5. A. AR immunhistokjemisk farging av tumorsnitt. Venstre panel, kvantifisering av dataene. Høyre paneler, representative bilder. B. Phospho-histon H3 immunhistokjemisk farging av tumorsnitt. Venstre panel, kvantifisering av dataene. Høyre paneler, representative bilder. C. Western blot-analyse av tumorene ved anvendelse av en pan-AR-antistoff. Kvantitering av dataene ble presentert nedenfor blottene. D. H 0,05 fra kontrollgruppen. Feil barer, SEM.
Interessant, enzalutamide, på verken dose, var i stand til å hemme veksten av 22Rv1 tumorer (figur 7A), undertrykke serum PSA nivåer i mus (figur 7D), hemmer mitose (figur 8A), eller forårsaker tilsynelatende histopatologisk forandring av de 22Rv1 tumorer (figur 8B). Ved avslutningen av forsøket, var det en trend med reduksjon i tumorvekt med økende dose av enzalutamide (figur 7B). Men nedgangen var ikke statistisk signifikant, muligens på grunn av den lille størrelsen på utvalget av forsøket. Imidlertid observerte reduksjonen med 10 mg /kg enzalutamide, den mest vanlig brukte dose enzalutamide som er effektiv mot kastreringsbestandig LNCaP xenograft-modeller [27], [51], [52], ble heller marginal. Tatt sammen tyder dataene på potensialet for bruk av PPD for å hemme veksten av CRPC.
22Rv1-celler ble inokulert i kastrerte nakne mus. Når tumorene nådde ~ 100 mm
3, ble musene behandlet med 10 eller 30 mg /kg enzalutamide ved oral føring 6 dager per uke (n = 4). A. Mean tumorvolum. B. Individuelle tumorvekt ved avslutningen av forsøket. C. Mean musekroppsvekt. D. Mean serum PSA nivå bestemt av ELISA, normalisert ved tumor vekter ved avslutningen av studien. Enz, enzalutamide. Ingen av behandlingsgruppene viste statistisk signifikant forskjell fra kontrollgruppen i noen av endepunkter. Feilfelt, SEM.
Svulster ble høstet på slutten av eksperimentet på figur 7. A. Phospho-histon H3 immunhistokjemisk farging av tumorsnitt. Venstre panel, kvantifisering av dataene. Høyre paneler, representative bilder. B. H & Co. E farging av tumorsnitt. Enz, enzalutamide. Feil barer, SEM.
Diskusjoner
Vi viste tidligere at PPD undertrykker androgen signaliserer gjennom å redusere uttrykket av både AR-FL og AR-Vs [34]. I denne studien, utvidet vi observasjonene til androgen-fratatt tilstand, viser androgen-uavhengig nedregulering av AR uttrykk og trans av PPD. Enda viktigere, den foreliggende studien demonstrerte for første gang, potensialet for bruk av PPD for å forbedre den terapeutiske resultatet av androgen deprivasjon. Vi viste, i xenograft-modeller, at PPD forhindrer eller forsinker utviklingen av CRPC etter androgen deprivasjon og hemmer veksten av kastreringsbestandig prostatatumorer med endogen ekspresjon av AR-FL og AR-Vs.
Rise i serum PSA-nivået blir brukt som en markør for biokjemisk tilbakefall etter behandling. Vi viste at PPD tilskudd fører til en reduksjon i serum PSA-nivå. Videre er reduksjonen ikke bare en følge av reduksjon av tumorstørrelser av PPD, ettersom effekten forblir signifikant etter normalisering av tumorvekten. Dataene i stedet, viser evne til PPD å undertrykke AR reaktive i tumorer tilbakefall etter androgen deprivasjon og i svulster som er kastrering bestandig, derfor gir en mekanistisk grunnlag for evnen til PPD å hemme kastrering motstand.
dose av PPD som ble brukt i våre xenograft studiene var 40 mg per kg kroppsvekt mus. Basert på kroppsoverflaten omdannelse [53], human ekvivalent dose på 40 mg /kg PPD er 3,24 mg /kg. Dette tilsvarer en daglig dose på 194 mg for en 60 kg voksen. Daglig tilskudd av 2 g av ginseng ekstrakt til voksne med en gjennomsnittsvekt på 60 kg viste ingen negativ effekt i kliniske studier [54], [55]. Siden ginsenosider innholdet av ekstraktet var 14,5% [54], den daglige dosen av ginsenosider i disse forsøkene var 290 mg. Dermed dosen som vi brukte i vår dyrestudier er oppnåelig i menneske.
Til tross for den lange forståelse av betydningen av målretting AR signalering for prostata kreft behandling, ingen behandling har blitt utviklet til dags dato å målrette AR direkte til redusere tilgjengeligheten. I tillegg til PPD, har flere andre forbindelser som er vist pre-klinisk for å redusere nivåene av AR-FL og AR-Vs og for å hemme veksten av CRPC celler [26], [56] – [61]. Disse forbindelser kan tjene som en effektiv motgift mot å overvinne motstanden mot androgen deprivasjon, særlig for motstand på grunn av oppregulert ekspresjon av AR-Vs. På grunn av mangel av ligand-bindende domene, kan AR-Vs ikke bli målrettet av dagens androgen deprivasjon terapi, inkludert den nye legemidler abiraterone og enzalutamide. Dette gjenspeiles av våre data viser ineffektivitet av enzalutamide mot vekst av AR-V-uttrykke 22Rv1 xenografttumorer i kastrert vert. På den annen side, kan veksten av disse tumorer inhiberes ved PPD ved et farmakologisk oppnåelig dose. Disse funnene støtter potensialet for bruk av PPD i kombinasjon med disse nye legemidler for prostata kreftterapi. Bestemme kombinatoriske efficacies og de beste sekvenser av behandlinger er et område av vår pågående forskning. Til sammen funnene fra denne studien ikke bare gi en begrunnelse for å videreutvikle PPD eller dens analog for intervensjon av CRPC, men også sannsynlig redusere AR-FL og AR-V tilgjengelighet som en levedyktig tilnærming for å forbedre terapeutiske utfallet av androgen deprivasjon terapi .
takk
Vi takker Dr. Elizabeth M. Wilson ved University of North Carolina for å gi CWR-R1 celler.
