Abstract
Mål
IL-17A spiller en viktig rolle i mange inflammatoriske sykdommer og kreft. Vi forsøkte å undersøke effekten av IL-17A på invasjonen av livmorhalskreftceller og studere dens relaterte mekanismer.
Metoder
sårtilheling og matrigel Transwell-analyser ble brukt for å undersøke effekten av IL -17A på livmorhalskreft celle migrasjon og invasjon av et panel av livmorhalskreft cellelinjer. Nivåene av matriks-metalloproteinaser (MMP) og tissue inhibitor of metalloproteinases (TIMPs) ble undersøkt ved hjelp av Western blotting. Aktiviteten av p38 og nukleær faktor-kappa B (NF-kB) signal veien ble oppdaget også.
Resultater
Her viste vi at IL-17A kan fremme migrasjon og invasjon av livmorhals kreftceller. Videre molekylære analyser viste at IL-17A kunne up-regulere uttrykk og aktiviteter MMP2 og MMP9, og ned-regulere uttrykk for TIMP-1 og TIMP-2. Videre aktiverer IL-17A også p38 signalveien og økt p50 og p65 atom uttrykk. I tillegg behandling av livmorhalskreftceller med de farmakologiske p38 /NF-kB signal pathway hemmere, SB203580 og PDTC, potent restaurert rollene til invasjonen og oppregulering av MMP indusert av IL-17A.
Konklusjon
IL-17A kan fremme migrasjon og invasjon av livmorhalskreft celle via opp regulerende MMP2 og MMP9 uttrykk, og nedregulere TIMP-1 og TIMP-2 uttrykk via p38 /NF-kB signalveien. IL-17A kan være et potensielt mål for å bedre prognosen for pasienter med livmorhalskreft
Citation. Feng M, Wang Y, Chen K, Bian Z, Jinfang Wu, Gao Q (2014) IL-17A Fremmer Migration og Invasivitet av livmorhalskreftceller ved koordinert Aktivering MMP uttrykk via p38 /NF-kB Signal Pathway. PLoS ONE ni (9): e108502. doi: 10,1371 /journal.pone.0108502
Redaktør: Masaru Katoh, National Cancer Center, Japan
mottatt: 23 juli 2014; Godkjent: 31 august 2014; Publisert: 24.09.2014
Copyright: © 2014 Feng et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet:. Den forfatterne bekrefter at alle data som underbygger funnene er fullt tilgjengelig uten restriksjoner. Alle relevante data er innenfor papir
Finansiering:. Prosjektet ble støttet av National Natural Science Foundation of China (nr 81070536) og Natural Science Foundation National i Shaanxi-provinsen (No. 2014JM4143). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
livmorhals~~POS=TRUNC kreft~~POS=HEADCOMP er den nest vanligste årsaken til kreftrelatert dødelighet hos kvinner over hele verden [1] og er en av de eneste kjente kreft forårsaket av et virus som kan være seksuelt overført. Nyere undersøkelser finner at immunceller og deres utskilte cytokiner kan ikke bare bidra til å eliminere kreft celler, men også tilveiebringe en passende mikromiljøet for tumorutvikling, så vel som å fremme tumorprogresjon [2], under hvilken lokal svulst mikromiljøet og funksjonstilstand av immunceller spiller viktige roller [3].
interleukin 17A (IL-17A) er en pro-inflammatorisk cytokin, og har blitt funnet bidratt til mange kroniske sykdommer. Nylig er IL-17A har vært også ofte finnes i mange kreftformer, slik som ovariekreft [4], brystkreft [5], magekreft [6], og hepatocellulært karsinom [3]. Rollen til IL-17A i utviklingen og progresjonen av disse kreftformene er fortsatt kontroversielt. Ved hjelp av dyremodell, noen studier finner at IL-17A hemmet tumorvekst og metastasering gjennom IFN-c produsere NK og T-celler [6], [7]. Andre studier viser at IL-17A fremmet tumorvekst og metastase [8], [9]. Effekten kan være korrelert med induksjonen av tumoren å fremme mikromiljøet ved svulststedet [10].
tumormetastaser er den ledende årsaken til dødelighet i forbindelse med kreft [11]. Kreftceller trenger å degradere ECM og invadere i lymfesystemet og vaskulære systemer for formidling til fjerne steder [12]. I denne prosessen, proteaser slik som matriks-metalloproteinase (MMP), spiller viktige roller [12]. Produksjon og aktivering av MMP er avhengig av forskjellige cytokiner, inkludert TNF-α og IL-1 utskilles av tumorceller [13], [14], fibroblaster [15], [16] og makrofager [16]. Tidligere studier funnet at IL-17A kunne regulere MMPs, IL-1 og TNF i periodontitt [17], og funnet at IL-17-reseptor-mangel fører til nedsatt ekspresjon av IL-1 og MMP3 /MMP9 /MMP13 i reumatoid artritt [18] , noe som indikerer at IL-17A spiller også en viktig rolle i reguleringen av MMP’er. MAPK signalveien og NF-kB spiller en viktig rolle i reguleringen av produksjonen og aktiviteten av MMP [10], [19]. Og mange effekter av IL-17A er korrelert med MAPK signalveien og NF-kB [10], [20], [21].
I vår studie fant vi at IL-17A kan øke cellemotilitet og invasjon av oppregulering av MMP2 og MMP9 via aktivering av p38-NF-kB signalveien.
Materialer og metoder
Etikk uttalelse
Denne forskningen ble godkjent av etikk komiteen i Second Affiliated Hospital, School of Medicine, Xi’an Jiaotong University. Alle livmorhalskreftpasient deltakere med vev undersøkelse gitt sitt skriftlige samtykke til å delta i denne studien.
livmorhalskreft prøver
livmorhalskreft prøver for mRNA ble oppnådd fra 50 livmorhalskreftpasienter i avdelingen for obstetrikk og gynekologi, Second Affiliated Hospital, School of Medicine, Xi’an Jiaotong University. Alle pasientene hadde samtykket til vev samling på tidspunktet for operasjonen. Og alle de prøvene ble diagnostisert som livmorhals plateepitel kreft ved avdeling for patologi. Blant dem, 11 var fra cervical biopsi, og ble ikke inkludert i statistisk analyse av invasjonen dybde og lymfatiske metastasering. Ingen av pasientene hadde fått kjemoterapi, immunterapi eller strålebehandling før prøven samlingen. Klinisk stadium og histologiske klassifikasjoner var basert på den internasjonale føderasjonen for gynekologi og fødselshjelp (FIGO) klassifiseringssystem. Vevsprøver ble delt i to deler: en del ble frosset i -80 ° C for RNA-isolering og venstre ble anvendt for patologiske diagnose
Cellelinjer og reagenser eksperimentelle
HeLa, C33A. og Caski cellelinjer ble oppnådd fra American Type Culture Collection (ATCC) og ble opprettholdt i Dulbeccos modifiserte Eagles medium (DMEM) supplementert med 10% føtalt bovint serum ved 37 ° C, 5% CO
2. Anti-MMP2, MMP9, TIMP-1, TIMP-2, β-actin, p38 og p-p38 ble erholdt fra Cell Signaling Technology (Beverly, MA). Anti-NF-kB-P50, P65 /Rel A og Histone H1 antistoffer ble innkjøpt fra Santa Cruz Bioteknologi (Santa Cruz, CA, USA). 3- (4, 5-dimetyltiazol-2-yl) -2, 5-difenyltetrazoliumbromid (MTT) og alle andre kjemikalier ble oppnådd fra Sigma (St. Louis, MO), med mindre annet er angitt.
Cellemigrering og invasjon analysen
Cell migrasjon og invasjon evner ble testet ved sårtilheling og invasjon analyser. Cellemigrering ble vurdert ved en sårheling assay. Celler ble dyrket i 6-brønns plate inntil sammenflytende satsen nå 70-80%, og deretter behandlet med eller uten IL-17A (50 ng /ml). Cellelaget ble såret ved bruk av en steril spiss og spredning av sårheling ble iakttatt og fotografert. Invasion Analysen ble utført med 24-brønnen BioCoat Matrigel invasjonen Chambers (Becton Dicknson, Bedford, MA) i henhold til produsentens instruksjoner. Etter å ha dyrket i medium med eller uten IL-17A (50 ng /ml), ble cellene sådd ut på det indre brønn og antall celler som invaderte gjennom Matrigel ble tellet.
RNA isolering og real-time PCR-analyse
Total RNA ble ekstrahert fra dyrkede celler med TRIzol reagens (Invitrogen), og mRNA-ekspresjonsnivåer ble målt ved QRT-PCR ved bruk av en iQ5 flerfarget real-time PCR Detection System (Bio-Rad) med SYBR Premix EX. Revers transkripsjon ble utført med PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time, Takara) i henhold til produsentens instruksjoner. For mRNA-analyse, ble GAPDH mRNA-nivåer anvendt som intern normalisering kontroll. Brett endringer ble beregnet og normalisert ved hjelp av CT-metoden. Primere som ble anvendt var som følger: GAPDH (GCACCGTCAAGGCTGAGAAC og TGGTGAAGACGCCAGTGGA); MMP1 (ACTCTGGAGTAATGTCACACCT og GTTGGTCCACCTTTCATCTTCA); MMP2 (CCGTCGCCCATCATCAAGTT og CTGTCTGGGGCAGTCCAAAG); MMP3 (AGTCTTCCAATCCTACTGTTGCT og TCCCCGTCACCTCCAATCC); MMP9 (GGGACGCAGACATCGTCATC og TCGTCATCGTCGAAATGGGC); MMP10 (CCCACTCTACAACTCATTCACAG og TCAGATCCCGAAGGAACAGAT); MMP13 (TGCCAGTGCCCTTAAATTCCA og CAACAGGGTCTCAAACCCCA); IL-17A (CAATCCCACGAAATCCAGGATG og GTGGAGATTCCAAGGTGAGG).
Zymografi
Celler ble behandlet med IL-17A ved 37 ° C i 24 timer, og prøver av kondisjonert medium ble oppsamlet. Passende volumer av de ukokte prøver ble separert ved 0,1% gelatin-8% SDS-PAGE-elektroforese. Etter elektroforese, ble gelene vasket to ganger i 2,5% Triton X-100 ved romtemperatur i 30 minutter og deretter inkubert i reaksjonsbuffer (10 mM CaCl2, 40 mM Tris-HCl og 0,01% NaN3, pH 8,0) ved 37 ° C i 12 timer. Coomassie brilliant blue R-250 gel flekk ble deretter brukt til å sette flekker på gelen. Intensitetene for bånd på gelene ble beregnet ved hjelp av en bildeanalysesystem (Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA).
Kvantifisering av MMP-2 og MMP-9-proteiner
Celler ble sådd ved en tetthet på 1 x 10
5 celler /ml i 6-brønns plater en dag før eksperimentet. Cellene ble dyrket i friskt DMEM-medium supplementert med 1% FBS og parentale celler ble dyrket i friskt DMEM-medium supplementert med 1% FBS med eller uten IL-17A (50 ng /ml). Etter 48 timers inkubering ble cellesupernatanter samlet, og deretter MMP2 og MMP9 konsentrasjoner ble kvantifisert ved hjelp av ELISA kits (Shanghai Westang Bio-Tech Co., Ltd, Shanghai, Kina).
Western blotting-analyse
1 x 10
6 cervikale kreftceller ble suspendert i 250 ul lyseringsbuffer (40 mmol /l Tris-HCI, 1 mmol /l EDTA, 150 mmol /l KCl, 100 mmol /l NaVO3, 1 % Triton X-100, 1 mmol /l PMSF, pH 7,5). Atomlysatene ble høstet med NucBuster Protein extration Kit (Novagen, Tyskland) i henhold til produsentens instruksjoner. Proteiner (50 ug) ble separert ved 10% SDS-polyakrylamid-gel-elektroforese og overført til PVDF-membraner. Membranene ble deretter blokkert i ikke-fettholdig melk (5% i Tris-bufret saltvann med Tween-20, TBST)-buffer ved 37 ° C i 1 time for å blokkere ikke-spesifikk binding, og ble deretter inkubert over natten med antistoffer mot p38, p -p38, MMP2, MMP9, TIMP-1, TIMP-2, NF-kB-p50, p65 /rela, Histone H1 eller β-aktin i TBST som inneholdt 5% fettfri melk ved 4 ° C. Deretter andre antistoffer ble inkubert. Båndene ble oppdaget med en forbedret kjemiluminescens (Amersham, ECL Plus, Freiburg, Tyskland) og eksponert ved autoradiografi. Den densitometry Analysen ble utført ved hjelp av Image J programvare (GE Healthcare, Buckinghamshire, UK).
Statistisk analyse
Alle data er vist som gjennomsnitt ± standardavvik og analysert ved hjelp av SPSS 13.0 programvare (SPSS Inc., IL). Statistisk signifikans ble analysert ved hjelp av t-test.
P
. 0,05 ble ansett som statistisk signifikant
Resultater
Uttrykk av IL-17A er positivt forbundet med spredning av livmorhalskreft
IL-17A mRNA uttrykk ble målt i 50 livmorhalskreft vev ved real-time PCR. Association studien ble videre brukt for å undersøke den kliniske betydningen av IL-17A uttrykk i 50 livmorhalskreft prøver. Resultatet viste at IL-17A uttrykk ikke relateres til pasientens alder, FIGO stadium, og tumor størrelse, mens IL-17A uttrykk var signifikant korrelert med pasientenes invasjon dybde og lymfatiske metastasestatus (
P
0,01, elevenes t-test, tabell 1). Resultatene indikerte at IL-17A kan spille en viktig rolle i livmorhalskreft metastaser.
IL-17A økt bevegelighet av livmorhalskreftceller
sårtilheling og matrigel invasjon analyser ble utført for å ytterligere teste rollen som IL-17A på livmorhals cellemotilitet. Resultatene av sårheling viser at vandringer HeLa, C33A og Caski celler ble forsterket av IL-17A (fig. 1 A og B). Videre er transwell-analysen viste at behandling med IL-17A fremmer celle invasjon gjennom Matrigel (fig. 1C og D).
(A, B) Sammenlignet med kontrollgruppen celler, IL-17A behandlede cervikale kreftceller ( HeLa, C33 A, og Caski) viste høyere motilitet i et sårhelende analysen. (C) Ved celle invasiv analysen, ble effekten av IL-17A på celle invasjon oppdaget (forstørrelse 100 ×). (D) Totalt invasiv celle nummer i hvert kammer ble oppsummert. Verdier er representert som middel ± SD fra tre uavhengige eksperimenter utført i tre eksemplarer. *
p
0,05 og **
p
. 0,01 sammenlignet med kontrollgruppen henholdsvis
IL-17A oppregulert MMP2 og MMP9 uttrykk og nedregulert TIMP-1 og TIMP-2 uttrykk i livmorhalskreftceller
Som overekspresjon av MMP spiller en viktig rolle i kreft metastase [22], rollen som IL-17A på MMP uttrykk i livmorhalskreft cellelinjer (C33A og Caski) ble undersøkt. Uttrykk for MMP1, ble MMP2, MMP3, MMP9, MMP10, og MMP13 oppdaget av real-time PCR-analyse mellom IL-17A behandlede og ubehandlede celler. Som vist på fig. 2A, økte IL-17A ekspresjonen av både MMP2 og MMP9, hvilket indikerer at motiliteten fremme rollen til IL-17A kan være involvert i ekstracellulær matriks (ECM) ombygging.
(A) MMP-ekspresjon ble påvist i fast -time PCR-analyse i livmorhalskreftceller behandlet med og uten IL-17A. (B) Etter behandling med IL-17A i 24 timer, uttrykk for MMP2, MMP9, TIMP-1, og TIMP-2 ble oppdaget av western blot analyse i livmorhalskreftceller. (C) Kvantifisering av protein nivåene av MMP-2, MMP-9, TIMP-1 og TIMP-2. MMP2 (D) og MMP9 (E) konsentrasjoner i supernatantene danner celler behandlet med eller uten IL-17A ble analysert ved hjelp av ELISA. (F) Virkningene av IL-17A på aktivitetene av MMP2 og MMP9 ble analysert ved zymografi assay. (G) Kvantifisering av virksomheten til MMP-2 og MMP-9. Verdier er representert som middel ± SD fra tre uavhengige eksperimenter utført i tre eksemplarer. *
p
0,05 og **
p
. 0,01 sammenlignet med kontrollgruppen henholdsvis
MMP2 og MMP9 spiller viktige roller for kreft metastase [12 ], og IL-17A kan påvirke ekspresjon av MMP2 og MMP9 [10]. TIMPs, de endogene naturlige inhibitorer av MMP’er, kan regulere aktiviteten og ekspresjon av MMP’er [23]. Etter behandling med IL-17A, ekspresjonen av MMP2 og MMP9 proteiner i cervikale kreftcellelinjer (C33A og Caski) ble økt, ble i mellomtiden ekspresjon av TIMP-1 og TIMP-2 proteiner ble redusert (Fig. 2B og C).
IL-17A økt sekresjon og aktivitet av MMP2 og MMP9
MMP har rollen som ECM degradering, og er sterkt innblandet i invasjon og metastasering av ondartede kreftceller [22]. I lys av dette, ble ekspresjon av MMP2 og MMP9 i cellesupernatanter analysert ved hjelp av ELISA. Som vist på fig. 2D og E, de C33A cellene skilles 425,55 ± 49,35 pg /ml /10
5 celler av MMP2 og 75,01 ± 9,80 pg /ml /10
5 celler av MMP9. IL-17A behandling betydelig økt MMP2 nivåer til 773,12 ± 60,12 pg /ml /10
5 celler (
P
0,05) og MMP9 nivåer til 148,89 ± 11,18 pg /ml /10
5 celler (
P
0,05). Lignende resultater ble observert i Caski celler. Åpenbart behandling med IL-17A bemerkelsesverdig fremmet ekspresjon av både MMP2 og MMP9.
Videre er aktiviteten av MMP2 og MMP9 utskilt av cervikale kreftceller ble undersøkt ved zymografi assay. Resultatene viste at IL-17A kunne gi en betydelig økning av nedbrytningsaktiviteten av MMP2 og MMP9 i C33A og Caski cellelinjer (Fig. 2F og G).
IL-17A regulerte ekspresjon MMP’er og invasjon av cervikale kreftceller via aktiverer p38 /NF-kB signalveien
p38 signalveien spiller viktig rolle i invasjonen av livmorhalskreftceller. Etter behandling med IL-17A, ble fosforyleringen nivået av p38 økes (fig. 3A-B, E-F). Med uttrykket av total p38 ble ikke påvirket. Som NF-kB signalveien ble rapportert å være en nedstrøms mål av p38 signalering, og var i stand til å oppregulere MMP2 andMMP9 uttrykk, NF-kB /p50 og p65 /RELA uttrykk ble også påvist. Vi har observert at behandling med IL-17A betydelig økt atom ekspresjon av både NF-kB /p50 og p65 /Rela (fig. 3 C-D, G-H). For ytterligere å definere et punkt i p38 /NF-kB signal svei ved hvilken IL-17A regulerer invasjonen av cervikale kreftceller, behandlet vi cervikale kreftceller med SB203580 (et p38-inhibitor) og PDTC (en NF-kB-inhibitor), og analysert invasiv evne. Både SB203580 og PDTC kan reversere invasjonen økte med IL-17A (fig. 4A-B, E-F). I tillegg, western blot analyse viste at forbehandling av SB203580 og PDTC avskaffet oppregulering av MMP2 og MMP9 indusert av IL-17A (fig. 4C-D, G-H), noe som ytterligere viser at IL-17A regulert MMP’er ekspresjon og invasjon av livmorhalskreft-celler via aktivering av p38 /NF-kB signalvei.
Ekspresjon av p38 og p-p38 ble påvist ved western blot-analyse i C33A (A) og Caski (E) celler behandlet med eller uten IL -17A i 24 timer. Kvantifisering av protein nivåene av p38 og p-p38 i C33A (B) og Caski (F). Verdier er representert som middel ± SD fra tre uavhengige eksperimenter utført i tre eksemplarer. * P 0,05 og ** p 0,01 sammenlignet med kontrollgruppen, respektivt. Western blot-analyse ble benyttet for å detektere kjerne p50 og p65-ekspresjon i C33A (C) og Caski (G) celler behandlet med IL-17A (50 ng /ml) ved angitte tidspunkter. Kvantifisering av de nukleære protein nivåer av p50 og p65 i C33A (D) og Caski (H) celler. Verdier er representert som middel ± SD fra tre uavhengige eksperimenter utført i tre eksemplarer. *
p
0,05 og **
p
. 0,01 sammenlignet med kontrollgruppen henholdsvis
C33A (A) og Caski (E) ble cellene forbehandlet med SB (20 uM) og PDTC i 30 minutter og deretter inkubert i nærvær eller fravær av IL-17A (50 ng /ml) i 24 timer. Celle invasive egenskaper ble foretatt ved Boyden kammer invasjon analysen. Prosentandelen av invasive hastighet på C33A (B) og Caski (F) celler ble uttrykt som en prosentandel av kontroll. C33A (C, D) og Caski (G, H) celler ble behandlet og deretter utsatt for western blot for å analysere nivåene av protein MMP2, er MMP 9. Verdier representert som middelverdier ± SD fra tre uavhengige eksperimenter utført i tre eksemplarer. *
p
0,05 og **
p
. 0,01 sammenlignet med kontrollgruppen henholdsvis
Diskusjoner
Betydelig bevis indikerer at visse kreftpasienter viser en generalisert immunsuppressive status, men inflammatorisk reaksjon på svulststedet kan fremme tumorvekst og progresjon [24], [25]. Vedvarende infeksjon med humant papillomavirus (HPV) er en nødvendig årsak til livmorhalskreft [26]. HPV-infeksjoner er vanlig, og livmorhalskreft kan betraktes som en sjelden komplikasjon av denne vanlig infeksjon [27]. IL-17A er en viktig inflammatorisk cytokin i utviklingen av mange inflammatoriske sykdommer, og det er også ofte detektert i svulstens mikro [8], [28], [29]. Men fram til nå, er lite kjent om effekten av IL-17A på livmorhalskreft progresjon. Souza og hans medarbeidere har studert sammenhengen mellom konsentrasjonen av IL-17 på serum fra pasienter og ulike grader av plateepitel intraepitelial lesjoner og invasiv livmorhalskreft [30], for ikke å nevne den pro-metastatisk og invasiv effekten av IL-17A på livmorhalskreft samt sin streke mekanisme. Her har vi avdekket at IL-17A betydelig fremmet invasiv og metastatisk evne til livmorhalskreftceller ved å regulere MMP /TIMP balanse via aktivering av p38 /NF-kB signalveien.
I denne studien fant vi at IL-17A kan forbedre migrasjons- og invasjons evner av livmorhalskreftceller. Tidligere forskning funnet at IL-17A kan fremme migrasjon og invasjon evner av menneskelig brystkreft og leverkreft celler [8], [10]. Disse resultatene tyder på at IL-17A er nært korrelert med invasjonen av livmorhalskreftceller. For å klargjøre de relaterte mekanismer, undersøkte vi om å fremme effekten av IL-17A på celle invasjon er gjennom å regulere uttrykk av MMP og TIMPs.
Under prosessen med metastase, kreftcellene trenger for å degradere ECM og invadere i blod eller lymfeårer, og nå andre vev og organer, deretter generere ny svulst. MMP og TIMPs spiller viktige roller i nedverdigende ECM [31]. MMP2 og MMP9 er ofte blitt påvist å være overuttrykt i solide tumorer og forbundet med tumorinvasjon og metastase [22], [32]. Så undersøkte effekten av IL-17A på ekspresjonen av MMP2 og MMP9. Resultatene viser at IL-17A kan opp-regulerer uttrykket av MMP2 og MMP9. TIMPs virker gjennom dannelsen av en tett og ikke-kovalent kompleks med deres beslektede enzymer og er i stand til å påvirke de biologiske aktiviteter av MMP’er [33], [34]. I denne studien fant vi IL-17A kunne down-regualte uttrykket av TIMP-1 og TIMP-2. Disse resultatene indikerer at den fremmende virkning av IL-17A er korrelert med MMP’er og deres inhibitorer.
p38 signalreaksjonsveien spiller også en viktig rolle i reguleringen av ekspresjon og aktivitet av MMP’er og TIMPs [35], [ ,,,0],36]. Aktivitet av p38 signalveien kan oppregulerer ekspresjonen av MMP2 og MMP9 [10]. Tidligere studie fant at IL-17A kan aktivere p38 signalveien [37], [38]. For ytterligere å avklare mulig mekanisme (r) av IL-17A i markedsføringen av livmorhalskreft celle invasjon, undersøker vi effekten av IL-17A på fosforylering av p38. Resultatene viste at IL-17A kan oppregulerer fosforylering nivået av p38. Resultatene viste også at behandling av inhibitor av p38 redusert celle invasjon i betydelig grad, ledsaget av økt MMP2 og MMP9 proteinekspresjon, og redusert TIMP-1 og TIMP-2-protein ekspresjon, noe som tyder på at oppregulering rollen til IL-17A i MMP2 og MMP9 uttrykket kan være gjennom aktivering av p38 signalveien. NF-kB er blitt funnet å være en nøkkel transkripsjonsfaktor i reguleringen av MMP2 og MMP9 uttrykk [10], [39] og IL-17A har blitt rapportert å være i stand til å aktivere NF-kB signalvei [40], [41 ], ved siden studerte vi om IL-17A kan aktivere NF-kB signalveien. Resultatene viste at IL-17A kunne aktivere NF-kB, noe som tyder på at oppregulering rollen til IL-17A i MMP2 og MMP9 uttrykk kan være gjennom aktivering av NF-kB signalvei.
Som konklusjon, effekten av IL-17A på livmorhalskreft celle invasjon og metastasering kan føre til identifisering av nye diagnostiske markører og terapeutiske mål.
Takk
prosjektet ble støttet av National Natural Science Foundation of China (No.81070536) og Natural Science Foundation National i Shaanxi-provinsen (No.2014JM4143).
