Abstract
Øremidd (
Otodectes cynotis
) og ørekanaler svulster er svært utbredt blant føderalt truede Island rever (
grårever littoralis catalinae
) lever på Santa Catalina Island utenfor kysten av Sør-California. Siden studiene begynte på 1990-tallet, ble nesten alle rever undersøkt funnet å være infisert med øremidd og ceruminous kjertelsvulster (karsinomer og adenomer) ble påvist i omtrent halvparten av alle rever ≥ 4 år. Vi antok at reduksjon av øremidd infeksjon vil redusere otitis externa og ceruminous kjertel hyperplasi, en risikofaktor for kreftutvikling. I denne studien har vi gjennomført en randomisert feltforsøk for å vurdere effekten av acaricide behandling på øremidd prevalens og intensitet av infeksjon, otitis externa, ceruminous kjertel hyperplasi, og midd-spesifikke IgG og IgE antistoffnivåer. Behandlingen var svært effektiv på å eliminere midd og redusere otitis externa og ceruminous kjertel hyperplasi, og midd-spesifikke IgG-antistoffnivåer var signifikant lavere blant friske rever. Ceruminous kjertel hyperplasi økt de kronisk infiserte, ubehandlede rever i løpet av seks måneders studie. Våre resultater gir overbevisende bevis for at acaricide behandling er et effektivt virkemiddel for å redusere øremidd, og at midd fjerning i sin tur reduserer øret lesjoner og midd-spesifikke IgG antistoffnivåer i Santa Catalina Island rever. Denne studien har utvidet vår forståelse av de underliggende patogenesen som resulterer i ceruminous kjertelsvulster, og har bidratt til å informere beslutninger som påvirker arter bevaring
Citation. Moriarty ME, Vickers TW, Clifford DL, Garcelon DK, Gaffney PM Lee KW, et al. (2015) øremidd Fjerning i Santa Catalina Island Fox (
grårever littoralis catalinae
): Kontrollere Risikofaktorer for utvikling av kreft. PLoS ONE 10 (12): e0144271. doi: 10,1371 /journal.pone.0144271
Redaktør: Douglas Thamm, Colorado State University, USA
mottatt: 1 august 2015; Godkjent: 16 november 2015; Publisert: 07.12.2015
Copyright: © 2015 Moriarty et al. Dette er en åpen tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet: All relevant data er tilgjengelig via Dryad (DOI: 10,5061 /dryad.12vb8)
Finansiering:. Denne studien ble finansiert av Morris Animal Foundation (TWV; tilskuddet antallet D08ZO-043, https://www.morrisanimalfoundation.org), institutt for Wildlife Studies (TWV, MEM, https://www.iws.org), Catalina Island Conservancy (JLK, CLD, https://www.catalinaconservancy.org), Greer Laboratories, Inc. (KWL, MEM; http : //www.greerlabs.com), studentene trening i Advanced Research, UC Davis School of Veterinary Medicine (MEM, https://www.vetmed.ucdavis.edu/research/grad_education/star). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling. Greer Laboratories, Inc gitt støtte i form av lønn for forfattere [KWL], men hadde ikke noen ekstra rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet. De spesifikke roller disse forfatterne er formulert i § «forfatter bidrag «
Konkurrerende interesser. Vi har følgende interesser: Denne studien mottatt støtte fra Greer Laboratories, Inc. Kenneth W. Lee ansatt i Greer Laboratories , Inc. Det er ingen patenter, produkter under utvikling, eller markedsførte produkter som et resultat av dette prosjektet. Dette endrer ikke forfatternes tilslutning til PLoS ONE politikk på deling av data og materialer.
Innledning
Sykdom er en betydelig trussel mot verneavhengige dyrearter, spesielt for genetisk og geografisk isolerte bestander [1]. Santa Catalina Island (SCA) fox (
grårever littoralis catalinae
) er en av seks forskjellige underarter [2,3] innfødt til Kanaløyene utenfor kysten av Sør-California (SCA: 33 ° 24 «N, 118 ° 24 «W). I 1999, en mistenkt distemper epidemi desimert 85-90% av denne befolkningen, og de resterende ~ 100 rever i denne underarten ble oppført som føderalt truet [4,5]. Intensive skjøtselstiltak inkludert trans, fangenskap avl og vaksinering vellykket avverget utryddelse og bidratt til rask befolkningsvekst til en anslått befolkning på 1114 i 2012 [6, 7]. Selv om befolkningen øker nå, sykdomsepidemier forbli en primær trussel mot den fortsatte eksistens av SCA rever [8, 9].
Ceruminous kjertelsvulster (karsinomer og adenomer) ble først observert i SCA rever i 2001 [ ,,,0],10]. I vår følgesvenn studie gjennomført fra 2001-2008, Vickers et al. funnet at om lag halvparten av SCA rever ≥ 4 år hadde ceruminous kjertelsvulster, og at øremidd var tilstede i 98% av SCA rever [10]. Øremidd er påvist i to andre underarter av Channel Island rever i de sørlige øyene, men aldri i de tre underarter i nord øyene; Men SCA rever er de eneste underarter som har øre kanalen svulster (fig 1) [8,10]. Det er fortsatt uklart hvorfor noen underarter av øya Revene har øremidd og andre ikke, men potensielle hypoteser inkluderer historisk innføring av øremidd av feral kattene til de sørlige øyene [8], samt eventuelle forskjeller i immunrespons eller genetisk disposisjon. Kvantitativ risikovurdering viste at svulstene er forbundet med ceruminous kjertel hyperplasi (CGH), som igjen er sterkt korrelert med otitis externa forårsaket av øremidd (
Otodectes cynotis
) [10]. Disse funnene er i tråd med hypotesen om at SCA rever er unikt disponert for alvorlige ear lesjoner, og at øremidd egge en betennelsesreaksjon og ceruminous kjertel hyperplasi som forut for og kan fremme tumordannelse og kreftutvikling [10].
fordeling av rever som er infisert eller infisert med øremidd, og rever som har øre kanalen svulster. Island rever ikke bor på Santa Barbara eller Anacapa øyene.
Øremidd lever på og i den overfladiske keratin av øregangen og forårsaker en betennelsesreaksjon i dermis som øker ørevoks produksjon og keratin rusk, noen ganger hindre ørekanalen, og fører til ceruminous kjertel hyperplasi [11-13]. Dette fortykket ceruminous sårvæske kan være kreftfremkallende [14], og en studie hos hunder og katter viste en sterk sammenheng mellom kronisk otitis externa og utvikling av ceruminuous kjertel hyperplasi og neoplasi [15]. I SCA rever, har midd infeksjon blitt sett i sammenheng med markert otitis externa, peri dempende sår, cellulitt, lokalisert sekundære bakterielle infeksjoner og sepsis, samt ceruminous kjertelkreft med lokal invasjon og fjernmetastaser [8,10]. Selv om midd ser ut til å sette i gang en kaskade av hendelser som kan disponere til ceruminous kjertelsvulster, har ingen tidligere studier undersøkt hvilken effekt midd fjerning kunne ha på sykdomsprogresjon.
Formålet med denne randomiserte seks måneders feltforsøk var å vurdere effekten av acaricide behandling på øremidd, ear lesjoner, og nivåene av midd-spesifikke antistoffer (IgG og IgE) i frittgående SCA rever. I tillegg har vi sammenlignet nivåer av midd-spesifikke antistoffer fra SCA rever med Santa Cruz Island (SCZ) rever (
grårever littoralis santacruzae
), en nærstående underarter med ingen bevis for øremidd, ørebetennelse eller ceruminous svulster . Vi antok at (1) midd prevalens og intensitet av smitte vil bli betydelig redusert ved å behandle rever med acaricide; (2) midd fjerning ville bli assosiert med redusert mellomørebetennelse og ceruminous kjertel hyperplasi; og (3) midd fjerning ville bli assosiert med reduserte nivåer av midd-spesifikke IgG og IgE.
Materialer og metoder
Etikk uttalelse
Animal fangst og biologisk prøvetaking av SCA rever ble godkjent ved US Fish and Wildlife service (USFWS) Federal 10 (a) en (A) tillatelse (nr TE744878-9) og en Memorandum of Understanding med California Department of Fish and Wildlife (CDFW). Alle prosedyrer som involverer dyr ble gjennomgått og godkjent av University of California, Davis, Institutional Animal Care og bruk Committee (Protokoll nr 13366).
Feltet Trial Design
SCA rever ble fanget i juli 2009 (t
0), september 2009 (t
1), november 2009 (t
2), og januar 2010 (t
3) (tabell 1). Foxes fanget på t
0 ble inkludert i studien dersom de hadde midd på første eksamen, ble mer enn 1 år gammel, hadde ikke blitt behandlet for øremidd de siste 12 månedene, og hadde ingen historie med tidligere sidevegg reseksjon av øregangen for fjerning av svulster. Registrerte rever ble randomisert til de behandlede eller ubehandlede sammenligningsgrupper i blokker av to, som skjedde på tidspunktet for fangst og fulgte
a priori
instruksjoner til tilfeldig tildele den første reven til en av gruppene, og alternative tildelingsgruppe etterpå.
Skap feller (Tomahawk Levende Trap Company, Tomahawk, Wisconsin, USA) ble satt og agnet med en kombinasjon av hund tørrfor, hermetisk kattemat, og bær lim. Feller ble plassert langs transekter i nærheten av veier og stier, på 250-300 meters mellomrom. En til to fellene ble satt på hvert sted, med 15-44 nettsteder som brukes hver dag. Alle feller ble sjekket hver morgen, og rever ble undersøkt, samplet, behandlet, og utgitt på stedet av fangst. Foxes ble bind for øynene og manuelt behersket mens prosjektet veterinær (TWV) utført en fysisk undersøkelse og otoscopic vurdering av både øreganger. Baseline data ble samlet, inkludert passiv integrert transponder merkenummer, kjønn, alder, vekt, fysisk tilstand, og ørekanaler observasjoner. Foxes 1-3 år gammel ble klassifisert som ung og rever ≥ 4 år ble klassifisert som modne. Hvis nøyaktig alder ikke kunne fastslås fra forrige fangsthistorie, ble rever tildelt aldersgrupper bruker tann slitasje mønstre [16,17], og rever ble kategorisert som små hvis de hadde Class 1 dentin eksponeringsmønstre eller eldre hvis de hadde klasse 2- 4 dentin eksponeringsmønstre
Ear midd infeksjon intensitet ble vurdert av to metoder:. mite rille og midd telle. En subjektiv midd alvorlighetsgrad Poengsummen ble bestemt otoscopically av prosjektet veterinær (tabell 2). Etter å score, ble en bomullspinne inn i hver øregangen for å samle midd, deretter plassert i et glassrør og holdt i en isolert beholder med kjøleelementer til å bli lagret ved 4-8 ° C. Innen en uke samling, ble prøvene sendt på tørris til laboratoriet ved University of California, Davis, og antallet midd ble bestemt ved hjelp av en dissekere mikroskop (MEM). Både midd score og midd tellingen ble i gjennomsnitt mellom venstre og høyre øre for å gi et samlet anslag for infeksjon intensitet.
øregangen biopsier ble utført under lokalbedøvelse med lidokain 4% gel og lidokain injiserbare løsning infused subkutant umiddelbart tilstøtende til biopsi området. Ved hjelp av en steril 5-6 mm huden slag, ble biopsier tatt fra nedre hale aspektet av venstre og høyre vertikale øregangene i krysset med de horisontale kanalene, og fiksert i 10% nøytral bufret formalin. Proliferativ lesjoner ble også biopsied og fjernes helt hvis de helt hindret kanalen. Etter å ha fått prøven, ble digital trykk og blodstillende pulver brukes til biopsi for å fremme hemostase. En ikke-steroide antiinflammatoriske legemidler (Ketoprofen, 2 mg /kg, Zoetis Inc., Kalamazoo, MI, USA) og systemisk antibiotika (Enrofloxacin, 10 mg /kg, Bayer, West Haven, CT, USA) ble gitt subkutant.
en 10 ml blodprøve ble oppsamlet ved halsvenepunksjon inn i en serumsamling rør og holdt i en isolert beholder med kjøleelementer. Etter koagulering ble blodprøver avkjølt og sentrifugert ved 1176 x g (Fischer Scientific Model Centrific 225) innen 24 timer etter fangst; sera ble dispensert inn i aliqots og lagret ved -80 ° C til de ble anvendt for testing av midd-spesifikk IgG og IgE. Foxes i den behandlede gruppen fikk fipronil (Frontline Top Spot, 30 mg /kg, Merial, Ltd., Duluth, GA, USA) lokalt mellom skulderbladene og ivermectin (Acarexx, 0,5 ml 0,01% løsning, Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc ., St. Joseph, MO, USA) i hvert øre. Fipronil ble gitt som en styrking for å bistå med behandling av
Otodectes
. Dette er en off-label bruk, men var berettiget til å redusere sannsynligheten for umiddelbar re-angrep fra kontakt med andre rever (lengre halveringstid enn ivermectin), og for å hindre gjeninnføring av midd fra det ene øret til den andre via hudoverflaten . Foxes i den ubehandlede sammenligning gruppen ikke fikk enten behandling.
Arbeidet med å gjenerobre studie rever ble gjort annenhver måned over seks måneders prøvetid (t
1, t
2, t
3). På de to første gjenfangst hendelser (t
1, t
2), ble alle rever undersøkt og samplet (øremidd og blod), mens bare behandlet rever mottatt acaricide (tabell 1). På slutten av den seksmåneders periode (t
3) ble alle rever undersøkt, samplet (øret midd og blod), biopsi, og behandlet for å maksimere antallet av behandlede rever i SCA populasjonen ved slutten av studien (tabell 1).
Histopatologi vurdering av biopsier
øregangen biopsier ble rutinemessig behandlet, parafin-embedded, seksjonert på 5 mikrometer og farget med hematoxylin og eosin. Immunhistokjemi for pan-cytokeratin ble brukt for endelig svulst diagnose. All histologi ble tolket av en bord-sertifisert patologen (PMG) ved University of California, Davis, som forble blind for behandling. Prøver som ble evaluert for tegn på betennelse i samsvar med otitt (tabell 2), CGH (tabell 2), og tilstedeværelse eller fravær av ceruminous kjertel adenom eller karsinom. Poengene fra venstre og høyre øre ble i gjennomsnitt for å gi en samlet anslag på mellomørebetennelse og CGH.
Mite ekstrakter og forberedelse av belagte brønner
Øremidd isolert fra SCA rever under felt evalueringene ble brukt for å fremstille vandige oppløsninger av midd-spesifikke antigener. I korthet, midd ble malt ved anvendelse av en Tenbroeck vevsmaler deretter suspendert i fosfatbufret saltvann (PBS). Etter inkubering over natten ved -20 ° C, ble det midd suspensjonen sentrifugert ved 12 857 x g, og supernatanten ble oppsamlet og anvendt som midd-spesifikt antigen. Proteininnholdet ble bestemt kolorimetrisk med en BCA Protein Assay (Thermo Fisher Scientific, Pierce, Rockford, IL, USA). Immulon 4HBH flatbunnede båndsammenstillinger (Thermo Electron Corporation, Waltham, MA, USA) ble anvendt gjennom hele og tjente som den faste fase for alle direkte bindingsenzymbundet immunosorbentanalyse (ELISA). Den 12-brønners strimler ble individuelt belagt med midd ekstrakter (1 pg /ml) etter en forhåndsdefinert prosedyre [18]. I korte trekk ble enkelt ekstrakter fortynnet i bikarbonat-buffer (pH 9,6) og 350 ul ble tilsatt til hver tilordnede brønnen. Etter inkubering over natten ved 4-8 ° C, ble brønnene vasket med PBS, blokkert med 1% monoetanolamin (pH 7,5), lufttørket og lagret ved -20 ° C i Ziplock sekker inntil bruk.
ELISA for midd-spesifikke IgG og IgE
tilstedeværelsen av midd-spesifikke IgE antistoff i fox serum ble vurdert ved hjelp av en hjørnetann IgE ELISA [18, 19]. En lignende semi-kvantitativ ELISA spesifikk for rev IgG ble utviklet for dette studiet for å bestemme den relative grad av midd-spesifikt IgG-antistoff i sera hver prøve (KWL og MEM). For IgG-analyse, tre ganger serielle fortynninger av sera rev i området fra 1: 150 til 1: 36450 ble tilsatt i tre eksemplarer, til plater belagt med antigener ekstrahert fra homogeniserte øret midd. Biotinylerte monoklonale anti-IgG-antistoffer ble anvendt som den primære proben reagens, streptavidin alkalisk fosfatase som den enzyminneholdende sekundære tracer, og p-nitrophenylphosphatase som det kromogene substrat [18].
For å standardisere resultatene av analysen og aktiver konsistente sammenligninger av analyseresultatene, på tvers av flere analyser, og variable serum fortynninger ble alle resultatene normalisert til en fire punkts kalibrering [20]. Den relative mengde av midd-spesifikk IgG ble interpolert fra en fire-punkt regresjonskurve laget ved å plotte bakgrunnskorrigerte optisk tetthet observert med hver av kalibratorene versus en vilkårlig tildelt konsentrasjonsverdi, basert på den fortynning skjemaet som brukes for fremstilling av de kalibreringsvæsker. Den relative IgG-nivå til stede i den opprinnelige serumprøven er produktet av den interpolerte verdi og den serumfortynningen faktor som ble testet. Sera samlet inn fra Santa Cruz Island (SCZ) rever (n = 43) tjente som øremidd uinfiserte sammenligninger. Revene på denne øya er en egen underart og øremidd har aldri blitt oppdaget på undersøkelse av levende eller døde SCZ rever.
Statistisk analyse
For å avgjøre hvorvidt behandlede og ubehandlede rever var sammenlign ved begynnelsen av studien sammenlignet vi alder, kjønn, brutto øregangen vurdering (øremidd, proliferativ lesjoner, betennelser, nodulær fortykkelse, puss), histologisk øregangen vurdering (otitis externa, CGH, talgkjertel hyperplasia, epidermal hyperplasi, acanthosis , hyperkeratose, adenom, karsinom, eller tidligere svulst diagnose), og midd-spesifikke IgG /IgE nivåer med Yates «korrigert chi-kvadrat test, to-utvalgs t-test, og Mann-Whitney U test [21]. Gjenfangst suksess, definert som andel av opprinnelig samplet rever omsamplede ved hver opptaksperiode, ble sammenlignet med en Pearsons kji-kvadrat test [21].
For å avgjøre hvorvidt øremidd byrde redusert etter behandling rever med acaricide , evaluert vi både midd prevalens og intensitet av infeksjon. Utbredelse ble definert som andelen av rever med en midd poengsum og /eller telle 0, og friske rever ble definert som de med både midd score og telle lik 0. Intensitet av infeksjon ble vurdert ved hjelp av både midd poengsum og telle, og en Spearmans rank test ble utført for å vurdere sammenhengen mellom de to tiltakene [21]. Utbredelse og intensitet av infeksjon ble sammenlignet mellom behandlede og ubehandlede grupper ved hver opptaksperiode ved hjelp av en Pearsons kji-kvadrat test og Mann-Whitney U test, henholdsvis. Endringer i forekomst og intensitet av smitte fra t
0 og t
3 ble evaluert ved hjelp av en McNemar chi-kvadrat test og Friedman test, henholdsvis [21].
For å avgjøre hvorvidt mellomørebetennelse og CGH ble redusert med midd fjernet, ble histopatologiske score sammenlignet mellom behandlede og ubehandlede grupper ved t
3 ved anvendelse av en Mann-Whitney U-test. Endringer i øret patologi mellom t
0 og t
3 ble evaluert ved hjelp av en Friedman test. For å avgjøre om IgG og IgE nivåer ble redusert med midd fjerning, ble verdiene sammenlignet mellom behandlede og ubehandlede grupper ved hver opptaksperioden ved hjelp av en Mann-Whitney U-test. Endringer i IgG og IgE-nivåer mellom t
0 og t
3 ble sammenlignet ved bruk av en Friedman-testen. IgG og IgE nivåer ble sammenlignet mellom SCA rever på hver opptaksperioden og SCZ rever ved hjelp av en Mann-Whitney U-test.
Fordi behandling er bare en metode for å redusere midd, og midd nærvær og intensitet er de faktiske risikofaktorer av interesse, alle av de ovennevnte analyser ble også utført sammenligne infiserte og ikke-infiserte rever, uavhengig av behandlingsgruppe. Alle statistiske analyser ble utført ved hjelp av SPSS (versjon 20.0, IBM SPSS Statistics for Windows, Armonk, NY) med en alpha nivå på 0,05.
Resultater
Ett hundre sytten rever ble innrullert i studere: 59 ble tildelt den behandlede gruppen og 58 til den ubehandlede gruppen (S1 tabell). I løpet av studien, to rever, både fra den behandlede gruppen, døde av kjøretøy traumer., Ble ikke sett noen uønskede effekter av prøvetaking eller behandling under gjenfangst undersøkelser. I begynnelsen av studien, ble ingen signifikante forskjeller funnet mellom behandlede og ubehandlede grupper i forhold til alder, kjønn, brutto øregangen vurdering, histologisk øregangen vurdering, eller midd-spesifikke IgG /IgE nivåer (p ≥ 0,1). Gjenfangst suksess var lik mellom behandlet og ubehandlet rever på t
1 (39/59 = 66% og 43/58 = 74%, henholdsvis) og t
3 (40/59 = 68% og 37/58 = 64%, henholdsvis) (p ≥ 0,3); men ble færre behandlet rever gjenerobret enn ubehandlede rever på t
2 (25/59 = 42% og 36/58 = 62%, henholdsvis) (p = 0,03) (S1 og S2 figurene).
Effekt av acaricide på midd prevalens og intensitet av infeksjon
Ear midd scorer og teller var signifikant korrelert (p 0,001), derfor midd telling ble brukt for å beskrive intensiteten av infeksjon. Behandlet rever hadde signifikant lavere midd prevalens og intensitet av infeksjon sammenlignet med ubehandlede rever på t
1, t
2, og t
3 (p 0,001; figur 2). Mite utbredelsen ned betydelig innenfor den behandlede gruppen (p 0,001), men ikke i den ubehandlede gruppen (p = 0,1) mellom t
0 og t
3. Imidlertid minsket midd infeksjon intensitet betydelig innenfor begge de behandlede (s 0,001) og ubehandlede grupper (p = 0,02) mellom t
0 og t
3. Vi estimert varighet acaricide effekt ved å undersøke en undergruppe av rever som bare ble behandlet én gang (ved t
0), deretter re-evaluert to, fire eller seks måneder senere. Blant behandlet rever, 10/39 ble smittet to måneder senere, 1/7 ble smittet fire måneder senere, og 3/7 ble smittet seks måneder senere (S1 figur)
Utbredelse:. Antall rever med midd /totalt antall rever. Intensitet av infeksjon: median øremidd teller. Antall av behandlede og ubehandlede rever (t
0: 59, 58; t
1: 39, 42; t
2: 24, 36; t
3: 40, 36). Utvalg av verdier for midd intensitet i parentes over hver bar. Foxes ekskludert fra analyse: en ubehandlet fox på t
1 og t
2 (manglende midd count), en ubehandlet rev på t
3 (tilfeldigvis behandlet ved t
2).
a, b, c signifikant forskjell (Pearsons kji-kvadrat test, p 0,001).
d signifikant forskjell (McNemar sin chi-kvadrat-test, p 0,001).
e, f, g signifikant forskjell (Mann-Whitney U-test, p 0,001).
h, i signifikant forskjell (Friedman test, p 0,001, p = 0,02)
Effekt av midd fjerning på mellomørebetennelse og hyperplasi
Behandlet rever viste signifikant lavere. otitis og CGH score enn ubehandlede rever på t
3 (p 0,001; figur 3). Mellom t
0 og t
3, otitt score falt betydelig i den behandlede gruppen (p 0,001), mens det var ingen signifikant endring i den ubehandlede gruppen (p = 0,5). CGH score også betydelig redusert i den behandlede gruppen (p = 0,007) mellom t
0 og t
3, men i motsetning til otitis poengsummer, CGH Stillingen betydelig økt i den ubehandlede gruppen (p = 0,001) mellom t
0 og t
3. De samme resultater ble observert når ikke-infiserte rever ble sammenlignet med infiserte rever.
Sammenligning mellom behandlede og ubehandlede rever ved t
3, og mellom t
0 og t
3 i hver gruppe. Antall av behandlede og ubehandlede rever ved t
0 og t
3 (37, 33). Utvalg av verdier for mellomørebetennelse og CGH vist i parentes over hver bar. Foxes ekskludert fra analysene: tre behandlede og to ubehandlede rever på t
0, en behandlet og ubehandlet reven på t
3 (ikke-diagnostisk biopsi), 18 behandlede og 22 ubehandlede rever på t
3 (ikke gjenerobret).
a, b signifikant forskjell (Mann-Whitney U-test, p 0,001).
c, d, e signifikant forskjell (Friedman test, p ≤ 0,007).
Effekt av midd fjerning av IgG og IgE nivåer
behandlede og ubehandlede grupper ikke har signifikant forskjellige IgG-nivåer ved t
1 (p = 0,08), t
2 (p = 0,3), eller t
3 (p = 0,06), men det var en signifikant nedgang i IgG-nivåer i både grupper mellom t
0 og t
3 (p 0,001; figur 4). Begge grupper av SCA rever på t
0 hadde betydelig høyere IgG-nivåer enn friske SCZ rever (p 0,001). SCA behandlet rever opprettholdt betydelig høyere IgG-nivåer enn SCZ rever på t
1 (p 0,001) og t
2 (p = 0,01), men deres IgG redusert til nivåer tilsvarende SCZ rever på t
3 (p = 0,6). I kontrast, SCA ubehandlede rever opprettholdt betydelig høyere IgG-nivåer enn SCZ rever i det hele tatt gjenerobre perioder (t
1 og t
2: p 0,001, t
3: p = 0,004)
.
IgG-nivå: en relativ mengde av midd-spesifikt antistoff (bestemt ved interpolering fra en firepunktskalibreringskurve, se tekst for ytterligere forklaring). Antall av behandlede og ubehandlede rever (t
0: 59, 57; t
1: 38, 42; t
2: 24, 36 t
3: 40, 36); antall uinfiserte og infiserte rever (t
0: 116; t
1: 31, 49; t
2: 25, 35 t
3: 42, 35); antall SCZ rever (43). Utvalg av verdier for IgG i parentes over hver bar. Foxes ekskludert fra analysene: en ubehandlet /smittet fox på t
0 og en behandlet /infisert rev på t
1 (mangler IgG-nivå).
a, b signifikant forskjell (Friedman test, p 0,001).
c Signifikant forskjell mellom SCZ rever vs. SCA behandlede og ubehandlede rever på alle fangst hendelser (Mann-Whitney U test, p ≤ 0,01), med unntak av SCA behandlet rever på t
3 (p = 0,6).
d, e, f Signifikant forskjell (Mann-Whitney U-test, p ≤ 0,01).
g, h signifikant forskjell (Friedman test, p ≤ 0,004).
i Signifikant forskjell mellom SCZ rever vs. SCA smittet og uinfiserte rever på alle fangst hendelser (Mann-Whitney U-test, p ≤ 0,001), med unntak av SCA uinfiserte rever på t
2 (p = 0,1) og t
3 (p = 0,9).
Når IgG-nivåer mellom SCA rever ble sammenlignet basert på infeksjonsstatus, uinfiserte rever hadde signifikant lavere IgG-nivåer enn smittede rever på t
1 (p 0,001), t
2 (p = 0,01), og t
3 (p = 0.01, fig 4). Mellom t
0 og t
3, var det en signifikant nedgang i IgG-nivåer i både uinfiserte og infiserte rever (p 0,001, 0,004). SCA friske rever hadde betydelig høyere IgG-nivåer enn SCZ uinfiserte rever på t
1 (p 0,001); imidlertid, IgG-nivåer var tilsvarende ved t
2 (p = 0,1) og t
3 (p = 0,9). I kontrast, SCA infisert rever holdt IgG-nivåer som var betydelig høyere enn SCZ rever i det hele tatt gjenerobre hendelser (t
1 og t
2: p 0,001, t
3: p = 0,001). IgE-nivåer for SCA og SCZ rever var under deteksjonsgrensen for analysen; Derfor data ble ikke analysert videre.
Øregang svulst forekomst
Den første svulst utbredelse i hele studiepopulasjonen i SCA rever var 21% (23/111). Seks rever ble ekskludert fra denne analysen på grunn av utilstrekkelige biopsier samlet inn ved begynnelsen av studien. De aller fleste av svulster ved t
0 ble påvist i modne rev, hvor 51% (22/43) av rever ≥ 4 år utstilte ear svulster. Selv om 79% (88/111) av rever i utgangspunktet var uten svulster, et betydelig antall av disse revene utviklet nye svulster over seks måneders prøveperiode. Under den endelige fangstperioden (t
3), 53 av de opprinnelig tumor -fri rever ble fanget og undersøkt, og 12 av disse revene var ≥ 4 år gammel. Nye ørekanaler svulster ble observert i fem rever (5/53), tre av dem ble smittet (alle ubehandlede) og to av dem ble infisert (en behandlet, en ubehandlet). Igjen ble de fleste svulster oppdages i modne rev, hvor 33% (4/12) av rever ≥ 4 år utstilte nye ear svulster.
Diskusjoner
Resultatene fra denne studien gi overbevisende bevis for at acaricide behandling er et effektivt virkemiddel for å redusere øremidd, og at midd fjerning reduserer kjente risikofaktorer for ceruminous kjertel tumordannelse i SCA rever. Mite fjerning ser ut til å redusere kronisk ørekanalen irritasjon og overdreven ørevoks produksjon, sannsynligvis svekke patologiske forandringer i øret som kan føre til svulstdannelse. Det faktum at CGH faktisk økt i en slik kort tidsrom innen persistent infiserte rever gir et sterkt bevis på at det langsiktige tilstedeværelse av midd er sannsynligvis forbundet med epitelial hyperplasi. Rapid celledeling over tid øker sjansen for å anskaffe en onkogen mutasjon, som fører til ukontrollert vekst og utvikling av epiteltumorer som ceruminous adenomer og karsinomer [22]. Uten intervensjon, vil hyperplasi i øregangen fortsetter å avansere i midd-infisert rever, sannsynligvis øker risikoen for tumorutvikling.
Nedgangen i midd prevalens og intensitet av smitte støtter fortsatt bruk av ivermektin eller andre acaricides hørsel å redusere øre midd infeksjoner i SCA rever. Et lite antall rever i den behandlede gruppen var infisert med midd ved t
3; Dette kan skyldes ufullstendig eliminering av første infeksjonen, eller reinfeksjon. Mite teller redusert i både behandlet og ubehandlet grupper over seks måneders studie, og selv om nedgangen var mye mer omfattende i den behandlede gruppen, midd reduksjon innen den ubehandlede gruppen var uventet. Vi mistenker at mekanisk fjerning av midd og endring av lydbildet under prøvetaking og biopsi prosedyrer kan ha bidratt til denne generelle nedgangen. Administrasjon av lidokain og anvendelse av blodstillende pulver til biopsi områder, så vel som eksudat eller serum fremstilt ved helbredelsesprosessen, kan ha bidratt til en midlertidig reduksjon i midd belastninger i begge grupper umiddelbart etter biopsi. Enhver prosess som øker betennelser og eksudat i øregangen kan skape et ugjestmildt miljø for øremidd, ofte forårsaker midd å forlate øregangen eller dø, og dermed redusere totale midd byrde [12]. Denne «utvasking effekten» av serum eller sårvæske har også blitt foreslått i SCA rever med alvorlig syke øregangene der få midd er tilstede [10]. Det er også mulig at ved å redusere midd belastningen i en del av befolkningen, redusert vi frekvensen av reinfeksjon, noe som skjer nesten utelukkende gjennom direkte kontakt med infiserte rever [12]. Sesongmessige endringer i midd byrde er usannsynlig fordi SCA øyas klima er tørr og varm, med bare milde svingninger i temperatur og nedbør [23],
O
.
cynotis
er en obligatorisk Antiparasittiske som fullfører alle livsstadier på sin vert [24], høy midd utbredelsen har blitt oppdaget i SCA rever i løpet av året, og samlet rev kroppens tilstand ser ikke ut til å endre seg med årstidene ( JKL, personlig meddelelse).
Foreløpig Island rever er en intensivt forvaltede arter, og vil være i overskuelig fremtid. Under årlig øy-wide folketelling fangst på SCA øya, er et betydelig antall rever undersøkt, identifisert med en passiv integrert transponder tag, og vaksinert mot valpesyke og rabies.
