Abstract
PLZF er en transkripsjon repressor, som spiller en avgjørende rolle i utviklingen, spermatogenesis og onkogenese. Nedregulering av PLZF er blitt funnet i forskjellige tumorcellelinjer. Det har vært nesten ingen vev studie på uttrykk for PLZF i prostatakreft (PCA). PCa er en heterogen sykdom, hvorav de fleste er lat og ikke-dødelige. Foreløpig er det ingen biomarkører som skiller lat fra aggressive PCa; derfor er det et stort behov for slike markører for å gi klinisk beslutningsstøtte. Denne studien hadde som mål å undersøke uttrykk for PLZF ved immunhistokjemi i forskjellig grad, så vel som metastatisk PCa og å korrelere endring av PLZF uttrykk med PCa aggressivitet. Vi studerte totalt 83 primær PCa fra biopsier, 43 metastatisk PCa og 8 sammenkoblede primære og metastatisk PCa fra radikale prostatectomies med lymfeknute disseksjon. Våre resultater viste at PLZF ble sterkt uttrykt i nesten alle (~ 100%) benigne luminal-celler (n = 77) og lav grad (Gleason mønster 3) PCa (n = 70) og svak eller fraværende (100%) i basalceller ( n = 70). Redusert eller tapt uttrykk for PLZF ble dokumentert i 26% av høy klasse (Gleason 4 og 5) primær PCa (n = 70) og 84% metastatisk PCa (n = 43). Den primære høy klasse PCa i prostatectomies delte lignende PLZF tap /reduksjon og histomorphology til at over sammenkoblede parallelle lymfeknutemetastaser. Disse dataene viste at nedregulering av PLZF er en viktig molekylær prosess for tumorprogresjon og tap av PLZF uttrykk oppdaget ved rutine immunhistokjemi er en lovende og verdifull biomarkør for PCa aggressivitet og metastase i personlig omsorg for PCa.
Citation: Xiao GQ, Unger P, Yang Q, Kinoshita Y, Singh K, McMahon L, et al. (2015) Tap av PLZF Expression i prostatakreft ved Immunohistochemistry korrelerer med Tumor Aggressivitet og metastasering. PLoS ONE 10 (3): e0121318. doi: 10,1371 /journal.pone.0121318
Academic Redaktør: Natasha Kyprianou, University of Kentucky College of Medicine, USA
mottatt: 02.12.2014; Godkjent: 30 januar 2015; Publisert: 25 mars 2015
Copyright: © 2015 Xiao et al. Dette er en åpen tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet: All relevant data er i avisen og dens saksdokumenter filer
finansiering:.. Disse forfatterne har ingen støtte eller finansiering for å rapportere
konkurrerende interesser:. forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Prostatakreft (PCA) er den vanligste kreftformen blant menn i USA [1]. Med den økende offentlig oppmerksomhet om PCA den utbredte bruken av prostata-spesifikt antigen (PSA) serumnivået som en screening modalitet, og trans-rektal ultralyd å målrette bestemte lesjoner, har prostata nål kjerne biopsier resultert i økt klinisk diagnostisering av kreft. PCa er en heterogen sykdom, de fleste som har en lat oppførsel [2,3]. Til tross for forbedringer i tidlig oppdagelse, er det i dag ingen pålitelige biomarkører for å effektivt skille menn med høy risiko sykdom fra lat flertall og det har blitt hevdet i flere tiår at et stort antall av PCa kan ha blitt overbehandlet [2,4,5]. Det er derfor et stort behov for en slik biomarkør som kan brukes til å identifisere aggressive PCa og starte tidlig kurativ behandling.
Promyelocytic leukemi sink finger protein (PLZF), også kjent som Zbtb16 eller Zfp145, først identifisert i en pasient med akutt promyelocytic leukemi, er en sink finger transkripsjonsfaktor som tilhører POZ-Krüppel (POK) familie som binder seg til spesifikke DNA-sekvenser med sine karboksyterminale sink fingre og undertrykker transkripsjon ved å rekruttere co-repressors med sin aminoterminale POZ domene [ ,,,0],6,7]. Fungerer i kjernen, påvirker PLZF diverse signal inkludert cellesyklus, differensiering og programmert celledød i hematopoetiske celler [7], så vel som i den senere tid solide svulster [8-10], og det har vist seg å være involvert i større utviklings- og biologiske prosesser, slik som spermatogenesis og stamcelle vedlikehold, bakben formasjon, hematopoiesis, immunregulering, og onkogenese [6,7,11,12]. Tapet av PLZF har vært knyttet til økt proliferasjon, invasivitet og motilitet, og resistens mot apoptose i ulike typer av kreft-cellelinjer [8]. Nylig PLZF er blitt funnet å bli nedregulert i ikke-småcellet karsinom i lungen [13], ondartet mesothelioma [9] og malignt melanom [8,10]. Overekspresjon av PLZF i humane livmorhalscellelinjer og mesothelial cellelinjer hemmer cellevekst ved å indusere apoptose [14]. Så vidt vi vet uttrykk for PLZF har nesten ikke blitt studert i prostatakreft vev. Hensikten med denne studien var å undersøke uttrykk for PLZF i grunnskolen samt metastatisk PCa ved immunhistokjemi og å korrelere endring av PLZF uttrykk med PCa klasse, aggressivitet samt metastasering.
Materialer og metoder
1. Vevsprøver
Denne studien ble utført etter godkjenning av Institutional Review Board og i samsvar med en forsikring innlevert og godkjent av etisk komité /Institutional Review Board ved University of Rochester og Mount Sinai School of Medicine. Dette er unntatt regulering immunhistokjemisk studie av arkiverte prøvene og inneholder ikke noen identifiserbar pasientinformasjon og behovet for skriftlig informert samtykke ble frafalt. Prostatakjertelen er en solid fibromuscular organ med innvekst av glandular epitel, som det ikke er lett gjennomtrengelig for formalin fiksativ. For å unngå den mulige effekten av ujevn og suboptimal vev fiksering av antigenet bevaring og gjenfinning så vel som på de etterfølgende immunhistokjemiske resultatene, ble biopsimateriale fra primær så vel som metastatisk prostata kreft valgt for dette studium, med unntak av åtte tilfeller av radikale prostatectomies med bekken lymfeknute disseksjon. Alle prostata biopsi prøver og prostatektomier og flertallet av metastatisk prostatakreft Ca vev ble samlet og studert ved University of Rochester Medical Center, NY. Tjue prosent av metastatiske PCA tilfellene var fra Mount Sinai Medical Center, New York. Alle sakene var fra forskjellige pasienter. Prøvene ble rutinemessig fiksert i 10% nøytral bufret formalin og parafin innebygd.
Det var totalt 83 prostatabiopsier, hver med en svulst volum som strekker seg fra 10 til 100%, hvorav 13 saker hadde en total Gleason er scorer 6, 57 tilfeller hadde en score 7, 7 tilfeller har en poengsum 8, og 6 tilfeller hadde en score 9/10. Godartede kjertel epithelia var til stede i 77 av de 83 prostatabiopsier og var fraværende i de resterende 6 biopsier. Førti tre tilfeller var metastatisk prostata kreft med et tumorvolum i området fra 5% til 95%, hvorav 22 var skjelettmetastaser, 11 lymfeknuter metastaser, 7 levermetastaser og 3 lungemetastaser. Åtte paret PCa fra prostatektomi prøver og sine parallelle lymfeknuter ble også inkludert i studien. De åtte primære prostata karsinom i radikale prostatectomies hadde totalt Gleason score spenner 7-9 med en svulst scenen pT3a eller pT3b. De lymfeknutemetastaser varierte fra 1 mm til 3 mm i den største dimensjon. Saken fordelingen er oppsummert i tabell 1.
2. Immunhistokjemi
Ved å følge deparaffinization og rehydrering, siktet glir med 5 mikrometer tykke seksjoner av vev ble behandlet med 3% -ig hydrogenperoksyd (H
2o
2) for å fjerne endogen peroksidaseaktivitet, deretter bearbeidet for antigen gjenfinning med 10 mM citratbuffer pH 6,0 ved hjelp av en trykkoker (Pascal; Dako Cytomation, Glostrup, Danmark) i 1 minutt ved 125 ° C, fulgt av langsom avkjøling. Resten av prosedyren ble utført i en DAKO automatisert instrument. Alle seksjonene ble renset med fosfat-buffret saltløsning (137 mM NaCl, 2,7 mM kaliumklorid, 4,2 mM natriumfosfat, og 1,5 mM kaliumfosfat) og omsatt med mus anti-PLZF antistoff (D-9; sc-28319, Santa Cruz Biotechnology , Santa Cruz, CA) i 1,5 timer ved 1: 500 fortynning i fosfatbufret saltvann inneholdende 1% bovint serumalbumin (BSA) og 5% normalt geiteserum ved romtemperatur. Seksjonene ble deretter inkubert i 20 minutter med seg + System pepperrot peroksidase-merket polymer konjugert med biotinylert anti-muse-sekundært antistoff og 3,3′-diaminobenzidin substrat. Alle lysbildene ble kontra med hematoxylin, dehydrert, og dekselet sklei.
3. Analyse av immunhistokjemisk farging
Prostata adenokarsinom, stroma samt luminal celler og basal celler av benign prostata kjertler ble analysert for PLZF immunoreaktivitets i en semikvantitativ måte. Bare atom farging av PLZF ble ansett positiv. Basert på graden og intensiteten av immunreaktivitet, ble det farging gradert som- (negativ /fraværende), 1 (svak), 2 (moderat), eller 3 (sterk /intens). Hver enkelt Gleason mønster ble separat evaluert for deres atom merking med PLZF for svulst i prostata, og for enkelhet, ble Gleason mønster 4 (G4) og Gleason mønster 5 (G5) kombinert ved analyse. Gleason score ble ikke brukt for metastatisk PCa. Den sterke lunimal cellefarging og svake eller ikke-reaktive basal celler (se resultater seksjon for detaljer) ble brukt som positiv og negativ kontroll, henholdsvis.
4. Statistisk analyse
Jockheere-Terpstra Test [15] ble brukt til å vurdere utviklingen mellom protein uttrykk poengsum og krefttype. Testen fastsettes dersom de forventede rekkene for protein expression score og krefttyper endret monotont. Etter testen av trenden, ble parvise sammenligninger sett på kollapse protein uttrykk i negativ /Svak (negativ og en) og moderat /sterk (2 og 3) og assosiere dette med par av krefttyper som bruker to-tailed Fisher nøyaktige tester . Alle analyser ble utført med SAS /STAT-programvare, versjon 9.3 av SAS System (Copyright © juli 2011, SAS Institute Inc) på en Windows 7-plattformen.
Resultater
1. Uttrykk av PLZF i benign prostatahyperplasi kjertel epithelia
Blant de 83 prostatabiopsier, syttisyv inneholdt benign prostata kjertel epitel. PLZF var moderat eller sterkt uttrykt i kjerner av luminal celler av benign prostatakjertler ble imidlertid svak eller ingen ekspresjon detektert i enten kjernen eller cytoplasmaet av basal celler eller stromaceller i alle 77 tilfeller (fig. 1A).
A. Godartet prostata kjertler med sterke kjerne imunoreactivity i luminal celler (pil) og svak eller negativ merking i basal celler (pilspiss). B. Sterk flekken i Gleason mønster 3 + 3 PCA kjertler. C. Sterk flekken i G3 PCA kjertler (pil), men svak eller negativ flekk i G4 PCA kjertler (pilspiss). D. Tap av PLZF i G4 kjertler av Gleason mønster 4 + 4 PCa (pil). Godartede kjertler med sterk flekk i luminal celler (pilspiss). E. sterk flekken i G3 PCa kjertler (pil) og fraværende flekken i G5 PCA kjertler (pilspiss) av Gleason mønster 3 + 5 PCa. F. Negativ flekken i Comedo typen PCa (G5). G. Negativ flekken i en representativ tilfelle av bein metastasering av PCa. H. Negativ flekken i én representant ved lymfeknutemetastase av PCa. I. Negative flekken i en representativ tilfelle av levermetastaser. Benign leveren viser også atom PLZF flekken. J. Negativ flekken i en representativ tilfelle av lungemetastaser. K. PLZF uttrykt i G3, men ikke G4 kjertler primære PCa fra en prostatektomi. L. Den parallelle lymfeknutemetastase viser lignende morfologi og negative PLZF flekken til G4 PCA kjertler av de primære G4 PCA kjertler i K.
2. Uttrykk av PLZF i grunnskolen prostata kreft i prostata biopsi
Blant primær PCa i prostata biopsier, var det totalt 70 individuelle Gleason mønster 3 og 70 individuelle Gleason mønster 4/5. Gleason mønstre 4 og 5, ble analysert sammen hovedsakelig på grunn av deres tilsvarende biologisk oppførsel, så vel som fravær av åpenbar immunofarging forskjell mellom disse to mønstre. PLZF ble uttrykt forskjellig i intensitet i primærprostata adenokarsinom Gleason er mønstre 3 og 4/5. Ligner på luminal cellene ved benign prostata kjertler, PLZF var moderat eller sterkt uttrykt i alle tumor kjertler Gleason mønster 3 (fig 1B.): 45 viste tre immunoreaktivitets og 25 viste to positivitet. I 3 tilfeller, kjertler flertallet av G3 PCa presenteres med sterk PLZF flekken, men mindretall med fokus svak eller negativ PLZF reaktivitet. I motsetning til dette, blant de 70 primære PCa av Gleason mønster 4/5, 24 (34%) viste 3, 28 (40%) med 2 og 12 (17%) med svak (1) immunoreaktivitet. Fullstendig tap av PLZF ekspresjon ble observert i 6 (9%) av disse tilfellene (fig. 1D-F). Det var 5 tilfeller, der flertallet av G4 /5 PCA kjertler presentert med svak eller negativ PLZF flekken, men et mindretall hadde samlings moderat til sterk PLZF reaktivitet. Disse PCa med svak eller mistet uttrykk for PLZF utgjorde 18/83 (22%) av alle de primære PCA tilfeller og 18/70 (26%) av høy klasse (Gleason 7-10) primære PCa.
3. Uttrykk av PLZF i metastatisk prostatakreft
aller fleste av metastatisk PCa ikke eller hadde bare svakt PLZF uttrykk (Fig. 1G-J). Av de 43 metastatisk PCA 29 manglet PLZF uttrykk (15 bein, 8 lymfeknute, 5 live og en lunge), 7 viste svak PLZF uttrykk (5 bein, en lever og en lunge), moderat til sterk immunreaktiviteten PLZF ble sett i 7 tilfeller (to bein, tre lymfeknute, en lever, en lunge). Overall, tap eller betydelig redusert uttrykk for PLZF ble sett i 84% av metastatisk prostata adenokarsinom uavhengig av metastatisk nettstedet.
4. Resultater av statistisk analyse
Jockheere-Terpstra Test avslørte en negativ trend (Z = -9,1568, p 0,0001), noe som indikerer at mer aggressiv metastatisk kreft hadde lavest protein expression score, mens Gleason score på 3 eller 4 /5 hadde høyere protein uttrykk score. Tilsvarende signifikante negative assosiasjoner ble funnet ved den sammenraste protein Poengsummen ble sammenlignet mellom G3 og G4 /5, G3 og metastatisk kreft, og G4 /5 og metastatisk kreft. (Alle p. 0,0001, tabell 2, figur 2)
5. Uttrykk av PLZF i metastatisk PCa av lymfeknute og sin parallell primære PCa
For å se nærmere på noen sammenheng mellom PLZF uttrykk i primær PCa og metastatisk PCA åtte paret primære PCa i prostatektomi prøver og den tilsvarende metastatisk PCa i lymfe noder ble undersøkt for immunhistokjemisk uttrykk for PLZF. Resultatene viste at uttrykket av PLZF i prostata variert i ulike graderinger med moderat til høyeste uttrykk i lav karakter (G3) PCa og redusert eller tapt uttrykk i fokus /foci av høy klasse (G4 /5) PCa (Fig. 1 K) fokus /foci av primær PCa med redusert eller mistet uttrykk for PLZF samsvarer med sammenkoblede metastatisk PCa i lymfeknute ved å dele lignende PLZF tap /reduksjon samt lignende morfologiske mønstre (fig. 1L). De immunhistokjemiske resultater og patologiske data fra den primære og metastatisk PCa fra de åtte radikale prostatectomies med bekken lymfeknute disseksjon er oppsummert i tabell 3.
Diskusjoner
Selv om enorm innsats har vært viet på jakt etter effektive prognostiske biomarkører som er i stand til å forutsi aggressivitet av prostatakreft, har det vært liten framgang mot praktisk bruk. Den klart mest studerte biomarkør for dette formålet er PTEN, en velkjent tumor suppressor [16-23]. Genomiske delesjoner av PTEN locus ved 10q23, vanligvis identifisert ved FISH, forekomme i 10% til 70% av prostatakreft, avhengig av studiepopulasjonen undersøkes [16-23]. Noen studier har vist at den genomiske tap av PTEN å være assosiert med mer aggressiv oppførsel, tumorprogresjon og tidlig metastasering, men andre ikke finne slike krets [23-25]. Gitt at FISH testen er tungvint og oppdager ikke epigenetisk samt post-transcriptional endring relatert genekspresjon, har immunhistokjemiske tester nylig blitt brukt til å vurdere uttrykk for PTEN i prostatakreft og dens forhold til tumor aggressivitet. Inkonsekvente resultater har imidlertid blitt rapportert [21, 23, 26-33]. Mangel på pålitelige antistoffer mot PTEN har vært ansett som en av de tildele faktorer. PTEN immunreaktivitet er vist i kjernen og cytoplasmaet av epitelceller, så vel som i de stromaceller av prostatavev [28], og det har vært ingen enighet om farging scoring så vel som på tolkningen av PTEN immunhistokjemiske resultater; når korrelasjon til clinicopathologic parametre utføres, cytoplasma PTEN farging brukt av noen forfattere [27, 34], mens kjernefysiske reaktivitet brukes av andre [23]. I tillegg kan promiskuøse immunofarging i kjernen og cytoplasmaet av epitelceller samt stromaceller også har gjort det vanskelig å skille bestemt fra ikke-spesifikke reaksjoner. Videre er kvaliteten av vev bevaring, en ofte oversett faktor, vært kjent for å påvirke de immunhistokjemiske resultatene [35, 36]. For å kunne korrelere resultatene av PTEN ekspresjon i tumorstadium, de fleste av de tidligere studier som benyttet prostatektomi prøver, inkludert prostatektomi vev avledet TMA (microarray vev). Som nevnt ovenfor, er prostatakjertel hovedsakelig et fast stoff fibromuscular organ med en lav permeabilitet for å fiksativ; Derfor, med mindre spesiell oppmerksomhet er betalt, er suboptimal vev fiksering et vanlig problem for prostatektomi prøven, som senere kan påvirke vevet antigen bevaring og kan i det minste delvis forklarer inkonsistente resultater i noen av immunhistokjemiske studier av PTEN ved PCA. Som et resultat, er den kliniske verdi av immunhistokjemisk PTEN i vurderingen av prostatakreft aggressivitet fortsatt under evaluering.
PLZF, et gen som modulator som ligner på PTEN, virker som en transkripsjons repressor. Tidligere studier av PLZF har hovedsakelig fokusert på sin rolle i spermatogenesis, stamcelle vedlikehold og promyelocytic leukemi [6,7,11,12]. Vår studie i prostata viste at, i forhold til den moderate til sterke immunhistokjemisk uttrykk i godartede luminal cellene i prostata kjertler og lav karakter (Gleason mønster 3) prostatakreft, ble uttrykk for PLZF betydelig redusert eller tapt i stort flertall (84%) av metastatisk prostatakreft og i 26% av høy klasse primære PCa. Disse resultatene indikerer at tap av PLZF var et viktig skritt i tumorprogresjon og metastasering. En fraksjon (26%) av primær høygradig (G4 /5) prostatakreft presentert med betydelig tap av PLZF uttrykk også ut til å passe inn i den virkelige kliniske situasjon, hvor bare et parti av høy Gleason PCa fremdrift og utvikle metastase langs sine baner . Den 26% av disse primær høy klasse PCa med betydelig reduksjon eller tap av PLZF uttrykk i vår studie kan derfor faktisk representerer den delen av aggressive PCa som utvikler metastaser ved senere tidspunkt. Det var tidvis tilfeller med variabel PLZF uttrykk i de samme Gleason «score PCA kjertler av samme biopsi, som er konsistent med den intratumor heterogenitet av PCa.
For ytterligere å belyse hvorvidt reduksjon eller tap av PLZF uttrykk i primær PCa korrelert til den av metastatisk PCA studerte vi immunhistokjemisk uttrykk mønster av PLZF i både primær PCa i prostata og sammenkoblede metastatisk PCa i dissekert bekken lymfeknuter av samme pasient. Våre resultater viste at endringene av PLZF uttrykk samt morfologien i fokus /foci av primær høy grad av PCa i prostata ble korrelert med den i bekkenlymfeknutemetastatisk PCa. Dette funnet styrker foreningen av PLZF tap med PCa progresjon og innblandet en prognostisk verdi av PLZF tap i grunnskolen PCa i predicating sin metastatisk potensial. I den sammenkoblede prostatektomi og lymfeknute disseksjon, den variable PLZF uttrykk (- /+ 1 /+ 2 /+ 3) i primær G4 /5 PCA kjertlene kan gjenspeile variasjonen av antigen presentasjon skyldes suboptimal fiksering av prostatektomi prøver, likevel , proporsjonalt, det PLZF i områder med G4 /5 PCa er mindre uttrykt enn foci av G3 PCa.
Som vist i denne studien, ble PLZF nesten utelukkende uttrykt i kjernen av luminal celler og svak eller fraværende i basalceller og stromale celler i prostata. Dette rene bakgrunn ikke bare gjorde det lett å tolke farging resultater, men også fungert som gode positive og negative kontroller. Dette var de åpenbare fordelene ved PLZF løpet PTEN. I tillegg, sammenlignet med tapet av PTEN i 10-70% av PCa [16-23], følsomheten av PLZF tap for metastatisk PCa ble 84% i vårt studium, mens spesifisiteten av PLZF tap i å forutsi ingen metastaser fra lav karakter (Gleason 3) var 70/70 (100%) eller som et minimum 67/70 (94%) når man tar hensyn til mindre fokus tap. Nøyaktig hvor mange av høy klasse (G4 /5) PCa vil mislykkes i å utvikle metastaser er nesten umulig å fastslå i menneskelige tilfeller; Likevel, hvis man forutsetter at hele gruppen av 52 (74%) primære G4 /5 PCA saker som ikke viser PLZF tap mangler metastatisk potensial, ville det spesielle ved PLZF i predicating metastaser være mye høyere enn den rapporterte 50% for PTEN [ ,,,0],37].
Vi har undersøkt uttrykk for PLZF hjelp Oncomine (Life Technologies) samt de underliggende geodata i fem prostatakreft datasett stratifisert ved Gleason score. Ingen åpenbar sammenheng er tydelig, verken når undersøke lagdelte uttrykk boksplottene (S1 ill.), Og heller ikke den underliggende data når kledd som foss plott (S2 fig.). Tilsvarende når undersøke fem offentlig tilgjengelige datasett på cBioPortal [38, 39], ingen sterk sammenheng mellom Gleason score (S3 Fig., Topp tre sett) eller T-stadium (S3 Fig., To nederste sett) og homozygot delesjon, forsterkning, eller mutasjon av genet som koder for PLZF (ZBTB16) kunne skjelnes. I tillegg ble det ingen åpenbar sammenheng sett mellom antatte kopi antall endringer og PLZF mRNA uttrykk i disse datasettene tilgang til gjennom cBioportal (data ikke vist). Avviket mellom de genomiske og ekspresjonsdata og våre immunhistokjemisk fargingsresultater antyder en involvering av epigenetisk og /eller posttranskripsjonelt forandringer i aggressiv prostatakreft og understøtter en mer informativ rolle for immunhistokjemisk proteomikk analyse av sluttproduktet av et gen i klargjøre dens funksjon /biologiske konsekvens i forståelse og prediksjon av tumor atferd.
Selv om den eksakte rolle PLZF i prostata epitel er ukjent, minner om androgen den konstituerende uttrykk for PLZF i luminal cellene og fraværende i basal celler ved benign prostata kjertler reseptoren, og sterkt utleder en sammenslutning av PLZF med androgen reseptoren. Faktisk, i en
in vitro
studie av PCA-cellelinjer, PLZF er funnet å være en prostata androgen-responsive-genet [40]. PLZF oppreguleres ved androgen i androgen-responsiv cellelinje LNCaP, men ikke i androgen reseptor negative cellelinje DU145 [41]. Overekspresjon av PLZF i LNCaP-cellelinjen inhiberer celleproliferasjon både i fravær og nærvær av androgener [40]. Endogen PLZF uttrykk er fraværende i androgen-uavhengig PCa cellelinje DU145 og dets ekspresjon kan gjenopprettes ved ektopisk ekspresjon av androgen reseptoren, men dette er ikke tilfelle i androgen- avhengige cellelinje LNCaP [41, 42]. Resultatet av disse in vitro-cellelinje studier støtter et forhold mellom PLZF og androgen reseptor aktivitet, og viser at balansen mellom pro-proliferativ androgen reseptor og inhiberende virkning av PLZF kan spille en avgjørende rolle i opprettholdelsen av den homeostase av benign prostata epitel. Tap av PLZF aktivitet ved PCA kan resultere i ukontrollert androgen reseptor aktivitet, noe som ville føre til proliferasjon. Mens de underliggende mekanismene for PLZF tap og tilhørende tumorprogresjon samt sin rolle ved PCA androgen uavhengighet har ennå ikke undersøkt, disse dataene motiverte oss til å undersøke PLZF uttrykk i prostatakreft med ulike karakterer (Gleason skårer) samt metastatisk prostatakreft kreft.
i sammendraget, vår studie viser at immunhistokjemiske tap av PLZF er en sensitiv og spesifikk biomarkør i å oppdage aggressive og metastatisk PCa. Likevel ønsker vi også å understreke at omfanget av denne studien er begrenset, og en større skala studie for å validere resultatene er nødvendig. Hvis ytterligere validert, på grunn av enkelhet og kostnadseffektivitet, vil immunhistokjemiske testing av PLZF uttrykk ved PCA ha en betydelig innvirkning og være av klinisk nytte i ledelse og personlig pleie av PCA pasienter i daglig praksis. PLZF immunhistokjemi kan også kombineres med PTEN å gi økt prediktiv kraft for progressiv PCa. Prospektivt gjenopprette PLZF i disse aggressive PCa kan også ha potensielle terapeutiske verdier ved å reversere sine kurs.
Hjelpemiddel Informasjon
S1 Fig. Ingen endringer i PLZF mRNA i prostatakreft.
PLZF (ZBTB16) uttrykk ble undersøkt i fem prostatakreft datasett stratifisert ved Gleason score, tilgjengelig i Oncomine. Bare datasett med 10 eller flere tilfeller av Gleason scorer 8 og 9 ble analysert. Boksplott skildre bety uttrykk, stratifisert ved Gleason score. Stratifisering i kolonner av Gleason score angitt i forklaringen nedenfor (med antall tilfeller angitt i parentes). Legg merke til at den aktuelle sammenligningen er mellom Gleason score 7 og lavere versus Gleason scorer åtte og eller 9, og ikke den første kolonnen for settene 1-4, som viser prøvene som en score var ikke tilgjengelig
doi:. 10,1371 /journal .pone.0121318.s001 product: (TIFF)
S2 fig. Ingen økt forekomst av tilfeller av redusert PLZF mRNA uttrykk i høy klasse prostatakreft.
PLZF (ZBTB16) uttrykk ble undersøkt i fem prostatakreft datasett stratifisert ved Gleason score, tilgjengelig i Oncomine. Bare datasett med 10 eller flere tilfeller av Gleason scorer 8 og 9 ble analysert. Foss tomter skildre de underliggende individuelle data analysert i S1 fig. og viser gjennomsnittlig uttrykk, stratifisert ved Gleason score. Stratifisering i kolonner av Gleason score angitt i forklaringen nedenfor (med antall tilfeller angitt i parentes). Legg merke til at den aktuelle sammenligningen er mellom Gleason score 7 og lavere versus Gleason scorer åtte og eller 9, og ikke den første kolonnen for settene 1-4, som viser prøvene som en score var ikke tilgjengelig
doi:. 10,1371 /journal .pone.0121318.s002 product: (TIFF)
S3 fig. Ingen PLZF forandringer i genene eller endringer i prostata kreft.
Forstyrrelser av genet som koder PLZF (ZBTB16) ble undersøkt i de angitte fem datasett tilgjengelig på cBioportal. Endringer er indikert i tomter under studien navn: homozyogous sletting (blå søyler); forsterkning (røde søyler); mutasjon (grønne søyler). Summen av alle oppdagede endringer var 0%, 4%, 1%, 2% og 4% (topp til bunn) i studiene avbildet
doi:. 10,1371 /journal.pone.0121318.s003 plakater (TIFF )
takk
Vi takker Mr. Xing Qiu av biostatistikk Program-University of Rochester for hans hjelp i statistisk analyse.
