Abstract
Bakgrunn
MIR-630 har blitt rapportert å være en modulator av flere kreftformer, men den mekanismen som er det påvirker radioresistance fortsatt ukjent. Vi forsøkte å identifisere molekylære funksjon av MIR-630 og dens reguleringsmekanisme i kolorektal kreft (CRC) cellelinjer.
Metodikk
Overuttrykte og tap-av-funksjon analyser av MIR-630 var utført i CRC-cellelinjer ved å måle deres nivåer av vekst og apoptose etter ionisk stråling (IR). Målgener ble detektert via en dobbel-luciferase-analysen og Western blot. Chromatin immunoprecipitation Analysen ble utført for å identifisere transkripsjonsfaktor som regulerer MIR-630, og en demetylering eksperiment ble også gjennomført.
Resultater
Mir-630 uttrykk ble funnet å være positivt korrelert med Radiosensitivity i CRC cellelinjer (
p
0,05). Etter IR behandling, MIR-630 indusert apoptose i celler; ble imidlertid observert det motsatte når MIR-630 ble nedregulert (
p
0,05). BCL2L2 og TP53RK ble identifisert som målgener av MIR-630, og funksjonen til MIR-630 ble funnet å være avhengig av disse to genene (
p
0,05). I tillegg bevis viste at CREB regulerer nivået av MIR-630, og demetylering kan heve MIR-630 nivåer (
p
0,05).
Konklusjon
CREB -miR-630-BCL2L2 og TP53RK omfatter en ny signalkaskade som regulerer Radiosensitivity i CRC cellelinjer ved å indusere celle apoptose og død
Citation. Zhang Y, Yu J, Liu H, Ma W, Yan L, Wang J, et al. (2015) Novel epigenetisk CREB-MIR-630 Signa Axis Regulerer Radiosensitivity i tykktarmskreft. PLoS ONE 10 (8): e0133870. doi: 10,1371 /journal.pone.0133870
Redaktør: Klaus Roemer, Universitetet i Saarland Medical School, TYSKLAND
mottatt: May 25, 2015; Godkjent: 03.07.2015; Publisert: 11 august 2015
Copyright: © 2015 Zhang et al. Dette er en åpen tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet: All relevant data er i avisen og dens saksdokumenter filer
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av Major Program of Science and Technology Program for Guangzhou (nr 201 300 000 087), Forskningsfondet for offentlig velferd i Health Industry of National Health og Family Planning Commission of China (No.201402015 og nr 201 502 039), National Key Technology R D Program (No. 2013BAI05B05) og Key klinisk spesialitet Discipline Construction Program
Konkurrerende interesser: forfatterne har erklært at ingen. konkurrerende interesser eksisterer.
Innledning
tykktarms~~POS=TRUNC kreft~~POS=HEADCOMP (CRC) er en relativt vanlig type kreft med høy verdensomspennende dødelighet [1, 2]. Selv om det preoperative behandling med kjemoradioterapi (CRT) i kombinasjon med konvensjonell kirurgi forbedrer lokal kontroll av CRC og overlevelse, bare omtrent 70% av pasienter responderer på CRT [3, 4]. Dermed forstå mekanismene som er involvert i ionisk stråling (IR) motstand av CRC er et viktig skritt i å generere ytterligere effektive behandlinger.
microRNAs er små (18-25 nukleotider) kodende RNA som kan undertrykke mRNA uttrykk ved å binde seg til deres komplementære sekvenser i 3′-utranslaterte regioner (UTR) [5, 6]. Mange studier har vist at mirnas spiller viktige roller i ulike biologiske prosesser [7]. Noen mirnas som MIR-135 og MIR-200c har blitt funnet å spille viktige roller i radioresistance [8, 9]. En tidligere studie rapporterte MIR-630 som en ny modulator av cisplatin- induserte ikke-små-celle lungekreft celledød [10]. Microarray analyse i en klinisk forskning valgt et sett av 13 miRNAs, inkludert speil 630, som kan være spesifikke predikator for CRT utfallet i endetarmskreftpasienter [11]. Imidlertid er mekanismen ved hvilken MIR-630 påvirkninger radioresistance er ikke blitt klarlagt ennå. I denne studien, søkte vi å identifisere funksjonen til MIR-630 i CRC Radiosensitivity og dets potensial regulator.
Materialer og metoder
Cell kultur
Menneskelig tykktarmskreftcelle linjer Ls174T, SW480, HCT116, SW837, HR8348, og HT29 ble kjøpt fra Celle Bank of Type Culture Collection (Shanghai City, Kina). Alle disse cellelinjene ble holdt i RPMI 1640 medium inneholdende 10% føtalt bovint serum (HyClone, Logan, Utah, USA) i en 37 ° C fuktet inkubator under 5% CO2.
mirna ekstraksjon og kvantitativ real- time PCR (QRT-PCR)
TRIzol reagens (Invitrogen, Foster City, USA) ble anvendt for å isolere total RNA fra dyrkede celler. QRT-PCR ble utført på en 7500 System (Applied Biosystems, Foster City, USA) ved hjelp av en alt-i-ett-miRNA Reverse Transcription Kit (GeneCopoeia, Inc.) og SYBR Grønn menneskelige miRNA Assay Kit (GeneCopoeia, Inc.).
Cell bestråling
bestråling ble utført i en Siemens Meratron M2 medisinsk stråle i en dose på 3 Gy ved romtemperatur.
Celleproliferering analysen
i 96 -vel plater, 1 x 10
3-celler ble sådd ut og deretter inkubert i 4 d. Celletelling kit-8 (CCK-8) (KeyGene Biotech) analysen ble utført for å måle celleproliferasjon. Briefly10 mL av CCK-8-løsning ble tilsatt til hver brønn i 2 timer. Absorbansen av hver brønn ble lest ved hjelp av en mikroplateleser innstilt på 450 nm.
caspase 3/6 aktivitetsanalyse
caspase 3/6 aktivitet ble målt ved hjelp av caspase 3 og caspase 6 analysesett ( Abcam, USA). Cellelyseringsbuffer ble tilsatt i et volum på 50 ul for å resuspendere 1 x 10
6 celler og inkuberes cellene på is i 10 min. Deretter DEVD-p-NA substrat (eller veid-p-NA) og reaksjonsbuffer inneholdende DTT ble tilsatt, og blandingen ble inkubert i 2 timer ved 37 ° C. Deretter ble prøvene avlest ved 450 nm ved anvendelse av en mikrotiterplateleser.
Apoptose assay
Celler ble samlet 24 timer etter bestråling med eller uten 3 Gy IR. Cellene ble farget med Annexin V-FITC (KeyGene Biotech) og PI (KeyGene Biotech). Apoptose ble utført ved hjelp av flowcytometri (BD LSRFortessa)
Dual-luciferase assay og vektorkonstruksjon
TargetScan (https://www.targetscan.org) og Miranda (http: //www. .microRNA.org) ble brukt til å forutsi potensielle Mir-630 mål. Den BCL2L2 (NM_001199839) bindingssetet ble spådd å bli plassert i posisjon 995-1002 mens TP53RK (NM_033550.3) ble spådd å bli plassert i posisjon 455-462 fra transkripsjonsstart nettstedet. Et 200 bp langt BCL2L2 og TP53RK segment ble syntetisert med enten mutant eller villtype-regionen frø og klonet inn i psiCHECK-2 vektor (Applied Biosystems, USA). Fem nukleotider i frøet regionen ble mutert til å få mutant BCL2L2 og TP53RK 3′-UTR sekvenser. Alle cellelinjer ble transfektert ved bruk av Lipofectamine 2000 (Invitrogen, USA). Celler (1 × 10
5 celler /brønn) ble transient transfektert med 20 nmol /L Mir-630 etterligner eller kontroll. Deretter ble kotransfeksjonen med BCL2L2 og TP53RK-uttrykke vektor utført. Cellene ble høstet 48 timer etter transfeksjon. Dual-luciferaserapportørplasmid analysesystem (Promega, Madison, USA) ble brukt til å påvise luciferasepreparater aktiviteter
Transkripsjonsfaktorer (TFS) Regulering MIR-630 ble beregnet med Consite (http:. //asp.ii.uib .no: 8090 /cgi-bin /Consite /Consite), Transfac (https://www.gene-regulation.com/pub/databases.html), og DIANA (http: //diana.imis.athena-innovation. gr /DianaTools /index.php). Sekvenser av 1000-bp-segmentet av 5′-UTR av MIR-630 med mutant eller villtype-regionen frø ble syntetisert og klonet inn i PGL3-Basic vektor (Applied Biosystems, USA). Fem nukleotider i frøet-regionen ble mutert for å oppnå den muterte sekvensen. cAMP-responselementet bindende (CREB) proteinkodende sekvens ble klonet inn i vektoren pcDNA3.1 (Applied Biosystems, USA). -Celler (1 x 10
5-celler /brønn) transient transfektert med den mutante eller villtype-5′-UTR av MIR-630 ble sådd. Deretter, ble ko-transfeksjon med CREB-uttrykkende vektor utført. Etter 48 timer ble cellene høstet og luciferase-aktivitetsanalyser ble utført.
Western blot
Bradford DC proteinanalyse (Bio-Rad, USA) ble anvendt for å måle konsentrasjonen av protein-lysater. Deretter ble 20-40 ug protein løst på en 12% Bis-Tris polyakrylamidgel, elektrooverført til nitrocellulosemembraner (GE Healthcare, Piscataway, USA) og blokkert med 5% fettfri melk. Protein Blottene ble immunfarget over natten med primære antistoffer ved 4 ° C og i 1 time med sekundære antistoffer ved romtemperatur. Amersham ECL Western blotting Detection Reagenser (GE Healthcare) ble brukt til å visualisere protein signal.
Behandling av celler med 5-aza-2′-deoxycytidine
HCT116-celler ble sådd på 6-brønnen platene på dag 0, og deretter 5-aza-CDR (5-aza- deoksycytidin, Sigma-Aldrich), som kan hemme DNA metyltransferase, ble tilsatt til cellene fra dag 1 til dag 3. cellene ble deretter høstet og etanol ble tilsatt til fikse celler. Uttrykk av MIR-630 ble analysert ved QRT-PCR.
Chromatin immunoprecipitation (chip) assay
ChIP analysen ble gjennomført i CRC cellelinje SW480. Anti-CREB antistoff (Abcam, USA) med EpiSeeker ChIP Kit (Abcam, USA) ble brukt som anbefalt av produsenten.
Statistisk analyse
Alle data er uttrykt som gjennomsnitt ± standardavvik (SD), med hvert forsøk gjentas minst tre ganger. Hemmingshastigheten ble oppnådd ved å følge beregningen: (absorbansverdi på ingen IR-celler-absorbans verdi av IR-celler) /absorbansverdi på ingen IR-celler. Forskjeller mellom de to gruppene ble vurdert via 2-tailed, paret t-test. SPSS for Windows 20,0 programvare ble brukt til å utføre alle statistiske analyser. Statistisk signifikans ble utledes hvis
p
. 0,05
Resultater
Expression nivåer av MIR-630 ble redusert i CRC celler etter bestråling
Den innledende nivåer av speil 630 og proliferativ kapasitet på serie CRC cellelinjer ble fast bestemt på å finne ut om MIR-630 kan funksjonelt påvirke ionisk Radiosensitivity. En tilsynelatende hemmende effekt på celleproliferasjon etter ionisk stråling ble observert i SW837, Ls174T, og HR8348 celler, som viste meget høy endogen Mir-630 uttrykk; derimot, ble svake hemming prisene observert i HT29, SW480, og HCT116 cellene, som viste lav Mir-630 uttrykk (Fig 1A og 1B). Signifikant positiv korrelasjon mellom MIR-630 og radiosensitiviteten ble påvist i alle seks cellelinjer som ble testet.
(A og B) Endogene MIR-630 uttrykk og IR-indusert hemming hastighet på serie CRC-cellelinjer (C) speil 630 nivå reduksjon etter bestråling sammenlignet med deres opprinnelige nivå. Feilstolpene representerer gjennomsnittet av tre separate bestemmelser ± standardavvik (SD). Stjerne indikerer statistisk signifikante endringer: * (P 0,05), ** (P 0,01)
Cellelinjer SW837 og Ls174T, som viste de høyeste uttrykk nivåer, ble deretter valgt for bestråling. . Strålingen behandling ble gjentatt tre ganger, med hver behandling bestående av tre Gy IR. Levedyktige celler ble subdyrket i 5 d etter bestråling, hvoretter MIR-630 ekspresjonsnivået ble undersøkt (Fig 1C). En betydelig reduksjon i MIR-630-nivåer ble funnet etter bestråling i begge cellelinjer sammenlignet med deres opprinnelige nivåer.
ektopisk ekspresjon av MIR-630 forbedrede ionisk stråling-indusert cytotoksisitet i CRC-cellelinjer
for å undersøke hvilken rolle MIR-630 i moduler CRC Radiosensitivity ble MIR-630 overexpressed i HT29 og SW480 celler ved hjelp av Mir-630 etterligner. Deretter ble MIR-630-transfekterte celler bestrålt med 3 Gy IR og utsatt for CCK-8-analyse sammen med sine styrings motstykker. Transfeksjon av MIR-630 førte til betydelig økning i inhibering av celleproliferasjon etter IR-eksponering, sammenlignet med kontrollgruppene (figur 2A) i SW480 og HT29-celler. Caspase 3/6 aktiviteter MIR-630-transfekterte celler og kontrollceller etter 24 timer med eller uten 3 Gy IR ble også målt.
(A) MIR-630 betydelig økt IR-indusert hemming rate (B C) MIR-630 økt kraftig caspase 3 og caspase 6 aktiviteter følgende IR eksponering (D og E) MIR-630 betydelig økt apoptose sats etter IR eksponering. Feilstolpene representerer gjennomsnittet av tre separate bestemmelser ± standardavvik (SD). Stjerne indikerer statistisk signifikante endringer. * (P 0,05), ** (P 0,01)
caspase 3/6 aktiviteter ble sterkt økt med MIR-630 følger IR eksponering i HT29 og SW480 celler sammenlignet med NC celler (figur 2B og 2C), som innebærer en betydelig rolle for MIR-630 IR-mediert apoptose aktivering. I tillegg er den apoptose-analysen viste at MIR-630 kan føre til betydelig økt apoptose hastighet i de to cellene etter bestråling (figur 2D og 2E). Samlet er disse resultatene antydet at MIR-630 sensitizes CRC celler til IR ved å styrke IR-indusert apoptose og hemme celleoverlevelse etter IR.
Hemming av MIR-630 førte til redusert IR følsomhet i CRC cellelinjer
En tap-av-funksjon analysen ble utført i SW837 celler ved hjelp av MIR-630-hemmere. Proliferasjonsrate ble betydelig økt i SW837 celler transfektert med MIR-630 hemmer sammenlignet med kontroll SW837 celler behandlet med IR (figur 3A). Hemming av MIR-630 også betydelig redusert caspase 3/6 aktiviteter i SW837 cellelinjer etter IR eksponering (Fig 3B og 3C). Disse resultatene indikerte at tap av MIR-630-funksjonen reduserer Radiosensitivity av CRC-cellelinjer.
(A) Inhibering av MIR-630 signifikant redusert IR-indusert hemming hastighet (B og C) Hemming av MIR-630 sterkt redusert caspase 3 og caspase 6 aktiviteter følgende IR eksponering. Feilstolpene representerer gjennomsnittet av tre separate bestemmelser ± standardavvik (SD). Stjerne indikerer statistisk signifikante endringer. * (P 0,05), ** (P 0,01)
TP53RK og BCL2L2 er direkte mål av MIR-630
For å utforske de molekylære mekanismer som MIR-630 øker cellular følsomhet for IR, potensielle mål av MIR-630 ble søkt i bioinformatikk databaser via Target-Scan og Miranda. I 3′-UTR av TP53RK og BCL2L2, ble potensielle bindingssteder av MIR-630 spådd (fig 4A). For å bekrefte hvorvidt MIR-630 direkte rettet mot det 3′-UTR av disse genene, konstruerte vi dual-luciferase reporter plasmider som bærer et 200 bp fragment av mutant eller villtype-3′-UTR-sekvens, som inneholdt den forutsagte MIR-630 gjenkjenningssete. En Dual-luciferaserapportørplasmid analysesystem ble deretter vedtatt å avgjøre om MIR-630 regulerer uttrykket av de antatte kandidatene i SW480 og SW837 celler. Normalisert fluorescensintensitet av reporter var signifikant lavere i kreftceller ko-transfektert med MIR-630 etterligner og villtype-3′-UTR sammenlignet med kontrollgruppen. I motsetning til dette ble ingen signifikant forskjell påvist mellom kontrollgruppen og cellene ko-transfektert med MIR-630 etterligner og mutant 3′-UTR (figur 4B og 4C).
(A) Anslått bindingsseter fra Mir -630 i det 3′-UTR av TP53RK og BCL2L2 (B og C) Fluorescens ble signifikant redusert i de MIR-630 etterligner og villtype dual-luciferase reporter plasmid-transfektert gruppe, mens det viste ingen signifikant endring i speil 630 ligner og mutante dual-luciferase reporter plasmid-transfektert gruppe (D) TP53RK og BCL2L2 protein uttrykk nivåer redusert i MIR-630-transfekterte celler. Feilstolpene representerer gjennomsnittet av tre separate bestemmelser ± standardavvik (SD). Stjerne indikerer statistisk signifikante endringer: * (P 0,05), ** (P 0,01)
De ovennevnte resultater ble også støttet av Western blot analyser.. Protein uttrykk analyse viste en kraftig nedgang i TP53RK og BCL2L2 av MIR-630-transfektert HT29 og SW480 celler sammenlignet med de negative kontrollcellene (fig 4D). Samlet er disse dataene viste at MIR-630 kan direkte binde til 3′-UTR av TP53RK og BCL2L2 å undertrykke genekspresjon.
Hvis effekten av MIR-630 er spesifikke, effekten av MIR-630 overekspresjon skal undertrykkes av co-uttrykk for TP53RK og BCL2L2 proteiner. Plasmidene pcDNA3.1 /TP53RK og pcDNA3.1 /BCL2L2, som kort kan heve nivåene av TP53RK og BCL2L2 henholdsvis ble ko-transfektert med Mir-630 etterligner i HT29 og SW480 celler. Deretter caspase3 /6 aktivitetsanalyser ble utført. CCK-8-analysen viste at samtidig uttrykk for TP53RK eller BCL2L2 protein med Mir-630 etterligner betydelig redusert inhiberingshastigheten etter IR i begge cellelinjer (figur 5A). Den caspase3 /6 ganger endring post-bestråling i MIR-630-transfektert SW480 og Ls174T celler sunket betraktelig etter transfeksjon av pcDNA3.1 /TP53RK og pcDNA3.1 /BCL2L2 (Fig 5B og 5C).
(A ) TP53RK eller BCL2L2 protein forårsaket en betydelig redusert IR-indusert hemming rate i MIR-630 transfekterte cellelinjer. (B og C) TP53RK eller BCL2L2 protein redusert folden av caspase 3 og caspase 6 aktiviteter følgende IR eksponering i MIR-630 transfekterte cellelinjer. Feilstolpene representerer gjennomsnittet av tre separate bestemmelser ± standardavvik (SD). Stjerne indikerer statistisk signifikante endringer: * (P 0,05), ** (P 0,01)
Cell metylering status og transkripsjonsfaktoren CREB regulere Mir-630 uttrykk
DNA metylering kan regulere ekspresjonen av mirnas [11, 12]. I denne studien ble Mir-630 uttrykk signifikant oppregulert ved behandling med 5-aza-CDR i HT29 og SW480 celler (figur 6a). Dette resultatet indikerer at DNA metylering er nært korrelert med endringer i Mir-630 uttrykk under CRC progresjon.
(A) 5-aza-CDR signifikant oppregulert Mir-630 uttrykk (B) CREB ble spådd å binde seg til 5′-UTR av MIR-630 host genet ARIH1 (C) CREB innenfor ARIH1 promoter regionen indusert luciferase aktivitet og mutasjon av predikerte CREB bindingssteder reversert sin effekt (D) ChIP bekreftet bindingen av CREB til ARIH1 arrangøren. Feilstolpene representerer gjennomsnittet av tre separate bestemmelser ± standardavvik (SD). Stjerne indikerer statistisk signifikante endringer. * (P 0,05), ** (P 0,01)
ARIH1, en proteinkodende gen som inneholder Mir-630-genet i sin ekson, har en stor CpG island. Dette tyder på at Mir-630 uttrykk avhenger regulering av ARIH1 genet. Tre forskjellige programmer ble brukt til å forutsi TFS regulerer MIR-630. Våre data antydet at CREB kan binde seg til det 5′-UTR av ARIH1 (figur 6B). For å bestemme hvorvidt CREB kan modulere nivået av MIR-630, studerte vi effekten av CREB på mutant og vill-type ARIH1 promotorsekvens inneholdende forutsagte CREB-bindingsseter. I SW480 celler, fant vi at CREB-indusert luciferase aktiviteten ble redusert i gruppen der ARIH1 promoter regionen ble mutert (Fig 6C). Videre chip analyser bekreftet at CREB kan direkte binde til ARIH1 promoter (Fig 6D).
Diskusjoner
Til tross for bevis som impliserer MIR-630 i kreft, har bare noen få studier utforsket sin funksjon i detalj. MIR-630 har blitt identifisert til å indusere celledød i bukspyttkjertelkreft og å regulere HER målretting narkotika følsomhet i HER2-overuttrykk brystkreft celler om IGF- 1R [12, 13]. MIR-630 hemmer cellevekst om CDC7 kinase i humane lungekreftceller [14]. Dessuten er veksten arrestasjonen av prostatakreft med gefitinib og luteolin delvis indusert av MIR-630 [15]. Imidlertid har den rolle og uttrykk mønster av MIR-630 i Radiosensitivity av CRC ikke blitt vist til nå.
I denne studien undersøkte vi den mekanismen som MIR-630 regulerer Radiosensitivity av CRC cellelinjer. For det første ekspresjon av MIR-630 og radiosensitiviteten av seks CRC-cellelinjer ble detektert. Resultatene viste en positiv sammenheng mellom Mir-630 uttrykk og Radiosensitivity. I tillegg ble MIR-630 nivå funnet å være betydelig redusert etter gjentatte IR, avsløre at MIR-630 kan spille en viktig rolle i å regulere Radiosensitivity.
Deretter mulig funksjon av MIR-630 IR svar av CRC cellelinjer ble utforsket. Resultatene viste at overekspresjon av MIR-630 i HT29 og SW480 celler økt kreftceller apoptose og død
in vitro
. Nedbryting av MIR-630 i SW837 celler hadde motsatt effekt. Dermed disse resultatene gir bevis for at MIR-630 fremmer Radiosensitivity av CRC.
Den molekylære mekanismen som MIR-630 modulerer CRC Radiosensitivity ble videre undersøkt. MIR-630 ble funnet å negativt regulere uttrykk for BCL2L2 og TP53RK ved direkte rettet mot deres 3′-UTR. BCL2L2, også kalt BCL-w, tilhører familien av BCL-2 proteiner. Overekspresjon av dette proteinet er blitt observert i en rekke kreftformer, inkludert CRC [16, 17]. BCL2L2 også fremmer celleoverlevelse og reduserer apoptose i henhold til apoptotisk spenning [18, 19]. TP53RK er en kinase som begrenser apoptose etter mitotisk spenning [20]. Disse funnene tyder på at Mir-630 modulerer Radiosensitivity via en signalkaskade som involverer BCL2L2 og TP53RK.
Nylig har E2F1 regulerte ribonuklease drosha blitt funnet å fremme MIR-630 biosyntesen i cisplatin utsatte kreftceller [21] . I denne studien, luciferase-assay-resultatene indikerte at CREB kan binde seg til det 5′-UTR av ARIH1, som er vert-genet av MIR-630, og delesjon av de CREB-bindingsseter kan oppheve denne funksjonen. Videre, chip-analysen viste at CREB spesifikt kan binde seg til promotor-regionen i MIR-630, noe som tyder på at CREB kan være TF ansvarlig for initiering MIR-630 uttrykk. CREB er et protein som binder seg til DNA-sekvensen som cAMP-responselementet. CREB formidler mål gentranskripsjon via cAMP signalaktivering [22]. Videre er CREB nødvendig for proliferasjon, vekst, overlevelse og differensiering av mange celletyper [23]. Nyere forskning har vist at CREB-Ser133 fosforylering resulterer i undertrykkelse av anti-apoptotiske gener, for derved å indusere celledød [24, 25]. I denne studien lav DNA metylering også øker betraktelig Mir-630 uttrykk i CRC cellelinjer.
I sammendraget, viser vår studie en roman signalveien fra CREB til BCL2L2 og TP53RK. De foreliggende resultatene gir viktig innsikt i mekanismene som TFS og mirnas modulerer kreftcelle radioresistance. Våre funn også markere terapeutiske potensialet av disse molekylene i CRC behandling.
Hjelpemiddel Informasjon
S1 data. Raw datasett er i «Data.zip», de opprinnelige dataene i dette eksperimentet kan fås fra det
doi:. 10,1371 /journal.pone.0133870.s001 product: (ZIP)
takk til
Vi takker Dr. Li Liang for manuskriptet revisjon.
