Abstract
Denne studien vurdert de immunmodulerende effekter i tidligere behandlet
KRAS
-mutant metastatisk kolorektalcancer pasienter som deltar i en fase II multisenter, åpen klinisk studie motta lenalidomid alene eller lenalidomid pluss cetuximab. Hovedresultatene viser T-celle immunstimulerende egenskaper lenalidomids som medikamentinduserte en reduksjon i den prosentvise CD45RA
+ naive T-celler tre ganger og samtidig øke andelen HLA-DR
+ aktiverte T-hjelperceller og prosentandel total CD45RO
+ CD8
+ minne cytotoksiske T-celler, 2.6- og 2.1 ganger henholdsvis (p 0,0001). I tillegg vil redusert lenalidomids andelen av sirkulerende CD 19
+ B-celler 2,6 ganger (p 0,0001). Lenalidomide øket en beskjeden, men signifikant, 1,4-gangers endring i prosentandelen av sirkulerende naturlige dreperceller. Våre funn indikerer at lenalidomid aktiverer T-celler, som tyder på en immunterapeutisk rolle for dette stoffet i innstillingene for vedlikeholdsbehandling og tumor immunitet betydelig. Videre rapporteres for første gang er effekten av lenalidomid i kombinasjon med cetuximab på T-celle funksjon, inkludert økning av sirkulerende naive og sentrale minne T-celler. Oppsummert lenalidomid og cetuximab ha betydelige effekter på sirkulerende immunceller hos pasienter med kolorektal kreft
Trial Registrering
ClinicalTrials.gov NCT01032291
Citation. Gandhi AK, Shi T Li M, Jungnelius U, Romano A, Tabernero J et al. (2013) Immunmodulerende effekter i en fase II studie av lenalidomid i kombinasjon med cetuximab i Ildfast
KRAS
-Mutant metastatisk kolorektalcancer. PLoS ONE 8 (11): e80437. doi: 10,1371 /journal.pone.0080437
Redaktør: Evren Alici, Karolinska Institutet, Sverige
mottatt: 29 januar 2013; Godkjent: 07.10.2013; Publisert: 11.11.2013
Copyright: © 2013 Gandhi et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Forfatterne vil takke Robert Beck for å koordinere dataoverføringer og analyse. Medisinske redaksjonelle tjenester ble gitt av Kim Grootscholten, MSc, av Excerpta Medica BV, finansiert av Celgene Corporation. Salvatore Siena er støttet av Oncologia Ca «Granda Onlus (OCGO) Fondazione. Forfatterne er selv ansvarlig for innhold og redaksjonelle avgjørelser for dette manuskriptet. Celgene Corporation finansiert denne studien og var fullt ut ansvarlig for studiedesign, datainnsamling og analyse og beslutning om å publisere
Konkurrerende interesser:. Anita Gandhi, Tao Shi, Mingyu Li, Ulf Jungnelius, Alfredo Romano, Peter Schafer, og Rajesh Chopra er ansatte i Celgene Corporation, der selskapet finansiert denne studien. Salvatore Siena er medlem av rådgivende styrer for Sanofi-Aventis, Astrazeneca, Roche, Genentech, Celgene, Genomisk Helse, Bayer, og Amgen. Josep Tabernero har deltatt i rådgivende styrer for Amgen, Celgene, Genentech, Merck-Serono, Novartis, Roche, Sanofi-Aventis, og Symphogen. Lenalidomid (Revlimid) er en markeds Celgene produkt. Dette endrer ikke forfatternes tilslutning til alle PLoS ONE politikk på deling av data og materialer.
Innledning
immunmodulerende legemiddel lenalidomid er en oralt aktiv agent med betydelig aktivitet i en rekke hematologisk lidelser inkludert myelodysplastisk syndrom (MDS), multippelt myelom (MM), og non-Hodgkins lymfom (NHL).
Lenalidomid har mottatt US Food and Drug Administration godkjenning for behandling av MM hos pasienter som har fått minst en tidligere behandling, og for behandling av transfusjonsavhengig anemi hos pasienter med International Prognostic Scoring System definerte lav eller middels en risiko MDS med en del (5q) cytogenetisk abnormitet, med eller uten ytterligere cytogenetiske abnormiteter. Den molekylære mål av lenalidomid er protein cereblon (CRBN). CRBN er et allestedsnærværende uttrykt protein og er medlem av Cullin ringen ligase 4 (CRL4) E3 ubiquitin ligase kompleks, og ble identifisert som det primære teratogene målet av thalidomid [1]. CRBN formidler både de antiproliferative aktivitetene til lenalidomide i myelomaceller og T-celleaktivering [2], [3]. De immunmodulerende effekter av lenalidomid strekker seg over flere celletyper, inkludert både lymfoide og myeloide linjene. Spesielt
in vitro
data indikerer lenalidomide har aktivitet på T-celler, T regulatoriske celler (Tregs), B-celler, monocytter, naturlige dreperceller (NK) T-celler og NK-celler.
i anti-CD3 stimulerte T-celler, stimulerer lenalidomids T-celleformering, og produksjonen av interleukin (IL) -2, IL-12 og interferon-gamma [4], [5]. I tillegg har lenalidomid vist seg å hemme Tregs spredning og suppressor funksjon
in vitro product: [6]. I avanserte solide tumorer pasienter behandlet med lenalidomid, naive CD4
+ hjelpe og CD8
+ cytotoksiske T-celler ble redusert, mens minne CD4
+ helper minne T-celler og CD8
+ cytotoksiske minneceller økte [7 ]. Tidligere studier av immunmodulerende aktivitet av lenalidomid er foretatt i hematologiske maligniteter hvor immunologiske parametre kan bli til skamme ved sykdom. Men det er begrenset med data som beskriver immunmodulerende funksjon av lenalidomid i solide tumorer.
I en klinisk studie forsøkte å vurdere effekt og sikkerhet av kombinasjonsbehandling med lenalidomid og cetuximab i
KRAS plakater (v -Ki-ras2 Kirsten rotte sarkom viral onkogen homolog) -mutant metastatisk kolorektalcancer, vurdert vi 25 forskjellige subpopulasjoner av CD45
+ immunceller (T-celler, B-celler og NK-celler). Dette var en fase II multisenter, åpen studie som omfatter en sikkerhets innledende fase (fase IIa) for å bestemme den maksimale tolererte dose, og en randomisert proof of concept fase (fase IIb) for å bestemme svarprosent på lenalidomid pluss cetuximab kombinert terapi. Fase IIa behandling består muntlig lenalidomid (startdose 25 mg /dag) og intravenøs cetuximab (400 mg /m
2 etterfulgt av ukentlig 250 mg /m
2) i 28-dagers sykluser. I fase IIb pasienter ble randomisert til enten fase IIa behandlingsregimet av lenalidomid pluss cetuximab kombinasjonsterapi eller lenalidomid 25 mg /dag monoterapi. Kombinasjonen av lenalidomid og cetuximab syntes å være godt tolerert, men ikke har klinisk meningsfull aktivitet i
KRAS
-mutant metastatisk kolorektalcancer (12).
Materialer og metoder
Pasienter, materialer og metoder
Denne fase II, ble multisenter, åpen studie utført i samsvar med de etiske prinsippene i Helsinkideklarasjonen og Good Clinical Practice, og i henhold til den internasjonale konferansen om harmonisering av tekniske krav for registrering av legemidler til human bruk. Studien protokollen, den foreslåtte informert samtykke skjema og annen informasjon til pasienter, ble godkjent av Comitato Etico-Scientifico, Ospedale Niguarda Ca «Granda, Milano, Italia og riktig sammensatt Institutional Review Boards /Uavhengige etiske komiteer av alle deltakende institusjoner (Medical etikk Commission av UZ KULeuven, Leuven, Belgia, klinisk forskningsetiske komité for Universitetssykehuset Vall d’Hebron, Barcelona, Spania, Scientific Ethics Committee av Ospedale Niguarda Ca «Granda, Milano, Italia; etikkomiteen Azienda Ospedaliero-Universitaria San Martino, Genova, Italia; etikkomiteen Azienda Ospedaliero-Universitaria Ospedali Riuniti Umberto I – GM Lancisi – G. Salesi di Ancona, Torrette, Italia, Regional etisk Review Board Stockholm, Karolinska Institutet, Sverige, og Flinders klinisk forskningsetiske komité, Sør- Australia, Australia). Studien ble registrert ved Clinicaltrials.gov med identifikator NCT01032291. Protokollen for denne rettssaken og støtte CONSORT sjekkliste er tilgjengelig som tilleggsinformasjon; se Sjekkliste S1 og protokoll S1.
Skriftlig informert samtykke ble innhentet fra alle deltakerne i studien. Studien besto av en sikkerhets innledende fase (fase IIa), der det primære målet var å finne den høyeste tolererte dose av lenalidomid i kombinasjon med cetuximab hos pasienter med
KRAS
-mutant mCRC, og et bevis konsept (POC) fase (fase IIb), hvor det primære målet var å fastslå svarprosenten i disse fagene per responsen evalueringskriterier i solide tumorer (RECIST) versjon 1.1. Totalt 48 av 50 pasienter som fikk stoffet ble evaluert for immun flowcytometrisk analyse.
Prøvetaking
Blodprøve ble tatt ved baseline (syklus 1 dag 1 [C1D1]), sykle to dagers 1 (C2D1) og sykle tre dagers 1 (C3D1) i enten 5 ml Lavendel /Svart Cyto-Chex® BCT glassrør (Streck Innovations, Omaha, NE, USA) eller 2,6 ml gul topp syresitratdekstrose rør avhengig av hvor prøven ble mottatt og holdt ved omgivelsestemperatur inntil strømningscytometri ble utført ved IKON Central Laboratories (Farmingdale, NY, USA) i løpet av 72 timer etter prøvetaking. Stabilitet analyser ble gjennomført i analysen validering og støtter opp til 72 timer behandlingstid fra prøvetaking til analyse. Antistoffer (anti-CD3, CD4, CD8, CD16, CD19, CD25, CD45, CD45RA, CD45RO, CD62L, CD107a, CD127, granzyme B og HLA-DR, BD Biosciences, San Jose, CA, USA) og 100 ul pasient fullblod ble overført til 12 x 75 mm testrør (BD Falcon ™; BD Biosciences) etterfulgt av forsiktig virvling og 15 minutters inkubering ved romtemperatur. Til dette ble BD Pharm Lyse ™ lyseløsning (BD Biosciences) tilsatt i 10 min. Røret ble sentrifugert, vasket i PBA (Dulbeccos PBS /0,2%), og pelleten ble resuspendert i PBA forut for analysen av B, T- og NK-celleundergrupper på et FACSCanto ™ II strømningscytometer (BD Biosciences). For intracellulære protein-farging, ble en ytterligere permeabiliseringen trinn tilsettes etter den første tilsetningen av PBA med fiksering-permeabiliseringen arbeidsløsning (eBioscience, Inc., San Diego, CA, USA), etterfulgt av to vaskinger i permeabiliseringsbuffer (eBioscience, Inc.) inkubering med intracellulære antistoffer, og en annen permeabiliseringsbuffer vask. Egnede kompensasjon kontroller ble inkludert i hver analyse. Hver celle undergruppe befolkningen ble rapportert som en absolutt verdi per 1 mm
3 av blod eller som en prosentandel av CD45
+ celler.
Statistiske analyser
For å vurdere endringer i forskjellige immuncellepopulasjoner ved C2D1 og C3D1 versus grunnlinjen, idet hver av de 50 flowcytometri-målinger (dvs. en absolutt celletall og en prosentandel måling for hvert av de 25 subpopulasjoner av CD45 + immunceller) ble først log2 transformert og en lineær modell ble deretter montert med syklus nummer (dvs. C1D1, C2D1, og C3D1) som en tre-nivå uavhengig variabel og pasienten som en blokkerende variabel ved hjelp av R programvarepakken LIMMA [8]. Moderert t-statistikk og tilhørende p-verdier for de to kontraster interessert: C2D1 vs. C1D1 og C3D1 vs. C1D1 ble beregnet ved hjelp av empirisk Bayes metode implementert i LIMMA. Dette empirisk Bayes trinnet ble utført separat for absolutte celletall og prosentmålinger på grunn av deres svært forskjellige skalaer og varianter. For hver av de to kontraster, p-verdiene ble senere kombineres for absolutte celletall og prosentvise målinger og ble justert for multiple sammenligninger i henhold til den Benjamini-Hochberg metoden [9]. Justerte p-verdier ≤ 0,05 ble ansett som statistisk signifikant, noe som tilsvarer å kontrollere den falske funnrate på 5%. Vi har gjennomført ovennevnte analyser separat i tre ulike pasientgrupper, dvs. 20 pasienter fra lenalidomid arm, 28 pasienter fra lenalidomid pluss cetuximab arm, eller 48 pasienter fra de to armene kombinert (hoved analyser). Vi har også gjennomført analysene i de tre populasjonene, men med de 19 pasientene som var på en samtidig medisinering som kodet til en anatomisk terapeutisk kjemisk kategorien betegner en systemisk eller lokalt kortikosteroid fjernet (sensitivitetsanalyser, ikke resultatene vist). Alle statistiske analyser ble utført ved hjelp av R-programvare [10].
Resultater
I alt 48 av 50 pasienter som fikk studiemedisin ble evaluert for perifert blod immun celle analyse. Studien skjema er vist i figur 1 og pasient baseline karakteristika er oppsummert i tabell 1. Det var 20 pasienter i lenalidomid armen og 28 i lenalidomid pluss cetuximab arm. Den biomarkør og trene seg analyser utført og antall deltakere inkludert i hver analyse er oppført i tabell S1. Det absolutte antall og prosentandelen av 25 forskjellige undergrupper av T, B og NK-celler ble analysert i disse 48 pasientene og celle fenotyper er oppført i tabell 2. cellepopulasjoner med i det minste en p-verdi ≤ 0,05 i sammenligninger av C2D1 og C3D1 versus C1D1 i lenalidomid monoterapi arm, den lenalidomid pluss cetuximab arm, og på tvers av alle pasienter er vist i tabell 3, 4 og 5, henholdsvis.
Study ble avsluttet før utvidelsen del av fase IIb. * En pasient ble randomisert til lenalidomid monoterapi, men avviklet før du tar noen studiemedisin og ble derfor ekskludert fra analysene. AE, bivirkning; ITT, intention to treat; PD, progressiv sykdom.
De viktigste funnene omfatter fire immun celle populasjoner med svært signifikant (p ≤ 0,0001) endringer fra C1D1 (baseline ) til C2D1 og til C3D1 i både den absolutte tall og prosentandelen av celler målt i begge behandlingsgruppene. Endringene i disse populasjonene er vist i figur 2 og omfatter en økning i totale minne cytotoksiske T-celler og aktiverte T-hjelperceller, samt en reduksjon i B-celler og totalt naive T-hjelperceller. Endringene i de resterende celle undergrupper tvers av alle fag er vist i figur S1.
signifikant (p ≤ 0,0001) endringer i prosent og absolutte tall i fire immuncelle undergrupper fra syklus 1 dag 1 (C1D1) til å sykle 2 dag 1 (C2D1) eller sykle 3 dag 1 (C3D1) i alle fag. Den øvre straffe betegner 75-persentilen, mens den nedre kanten betegner den 25. persentilen. Linjen inne hver boks er medianen. Linjene utvide til maksimum og minimum verdier eksklusive uteliggere. De grå linjene betegne enkelt fag data. Abs, absolutt.
Immunmodulerende effekter hos personer som får lenalidomid bare
I lenalidomid eneste armen (n = 20), 12 T-cellepopulasjoner, totalt NK-celler, totalt B-celler, og totalt lymfocytt celle populasjoner (enten prosent eller absolutt count) ble vesentlig endret (p≤0.05) i enten C2D1 eller C3D1 versus C1D1, eller begge deler. Disse T-cellepopulasjoner, som starter med det mest signifikante, inkluderer totale naive T-hjelperceller, aktiverte T-hjelperceller, aktiverte T-cytotoksiske celler, T regulatoriske celler, og den totale naive cytotoksiske T-celler, effektor-T-hjelperceller, effektor-T-cytotoksiske celler, total hukommelse cytotoksiske T-celler, effektor minne cytotoksiske T-celler, T-hjelperceller, cytotoksiske T-celler og T-celler totalt. Absolutte og prosent B-celler ble redusert 1.78- til 3,41 ganger. Prosentandelen av NK-celler betydelig økt ved C2D1 med 1,4 ganger på tvers av fag tar bare lenalidomid. De absolutte lymfocytter betydelig redusert 1,36 ganger på tvers av fag som tar lenalidomid bare (tabell 3). Av notatet, i motsetning til
in vitro
data viser lenalidomid hemmer Tregs utvidelse [11], lenalidomid betydelig økt andel av tregs av 4 til 12 ganger.
Immunmodulerende effekter i pasienter som fikk lenalidomid pluss cetuximab
i lenalidomid pluss cetuximab arm (n = 28), 15 T-cellepopulasjoner, en NK-cellepopulasjon, totalt B-celler, og totalt lymfocytt cellepopulasjoner (enten prosent eller absolutt count) ble vesentlig endret ( p ≤ 0,05) i enten C2D1 eller C3D1 versus C1D1, eller begge deler. Disse T-celle populasjoner, som starter med den mest betydningsfulle, inkluderer aktiverte T-hjelpeceller, totalt minne cytotoksiske T-celler, totalt naive T-hjelpeceller, totalt naive T cytotoksiske celler, effektor minne cytotoksiske T-celler, aktiverte cytotoksiske T-celler, effektor cytotoksiske T-celler , sentrale minne cytotoksiske T-celler, effektor T-hjelpeceller, effektor minne T-hjelpeceller, totalt minne T-hjelpeceller, sentrale minne T-hjelpeceller, naive cytotoksiske T-celler, cytotoksiske T-celler, og naive T-hjelpeceller. Absolutte og prosent B-celler ble redusert 2.01- til 3,6 ganger. Prosentandelen av granzyme B
+ NK-celler betydelig økt ved C2D1 ved 1.15-fold og C3D1 med 1,25 ganger hos pasienter som tok lenalidomid pluss cetuximab. Prosentandelen av lymfocytter økte betydelig 1.11- 1,45 ganger hos pasienter som tok lenalidomid pluss cetuximab (tabell 4). Av disse ble følgende syv subpopulasjoner betydelig modulert i lenalidomid pluss cetuximab arm, men ikke i lenalidomid arm bare: sentrale minne cytotoksiske T-celler, effektor minne T-hjelpeceller, totalt minne T-hjelpeceller, sentrale minne T-hjelpeceller, naive cytotoksiske T-celler, naive T-hjelpeceller og granzyme B
+ NK-celler. Av notatet, fikk tillegg av cetuximab til lenalidomid ikke resultere i en økning i Tregs som ble observert av lenalidomid alene.
Immunmodulerende effekter i alle fag
I alle 48 fag, 16 T-cellepopulasjoner, 1 NK celle populasjoner, totalt B-celler, og totale lymfocytter (enten prosent eller absolutt count) ble signifikant modulert (p ≤ 0,05) i enten C2D1 eller C3D1 versus C1D1, eller begge deler. Disse T-celle populasjoner, som starter med den mest betydningsfulle, inkluderer aktiverte T-hjelpeceller, totalt naive T-hjelpeceller, totalt minne cytotoksiske T-celler, totalt naive cytotoksiske T-celler, aktiverte cytotoksiske T-celler, effektor minne T cytotoksiske celler, effektor T-hjelpeceller , effektor cytotoksiske T-celler, sentral minne cytotoksiske T-celler, effektor minne T-hjelpeceller, T regulatoriske celler, sentrale minne T-hjelpeceller, naive cytotoksiske T-celler, totalt minne T-hjelpeceller, cytotoksiske T-celler, og naive T-hjelpeceller. Absolutte og prosent B-celler ble redusert mellom 2.35- og 3.05-fold. Prosentandelen av granzyme B
+ NK-celler betydelig økt 1,21 ganger på C3D1, mens andelen av lymfocytter økte 1,33 ganger på C3D1 i alle fag (tabell 5).
Effekter av immunsuppressive midler
Totalt 19 av de 48 pasientene ble identifisert som å være på enten daglig eller intermitterende, samtidige systemiske eller topikale kortikosteroider. Av disse 19 pasienter som samtidig kortikosteroider for ulike tidsperioder, 5 mottatte deksametason (som varierer fra 8 mg daglig til 10 mg ukentlig), 10 fikk prednison (som varierer fra 25 mg to ganger daglig i 4 mg daglig), 5 mottatte betametason (varierende fra 4 mg daglig til 4 mg ved behov), og fem fikk ultrapotent topikale kortikosteroider. For å utelukke en eventuell effekt av disse immunsuppressive kortikosteroid behandling på uttrykk for noen av cellepopulasjoner, ble en sensitivitetsanalyse utført med unntak av pasienter på immunsuppressive legemidler og analysen ble reperformed. I sensitivitetsanalyser, de samme fire celle populasjoner konsekvent viste signifikant (p ≤ 0,0001) endringer fra C1D1 (baseline) til C2D1 eller C3D1 i begge målingene vurderes (absolutte tall og prosent) betegner disse effektene er ikke på grunn av steroid bruk. Faktisk, pasienter som immunosuppressive samtidig medisinering hadde samme størrelsesorden av immun effekter (T-celleaktivering og B-celle-hemming), og et større antall av immuncelleundergrupper modulert, sammenlignet med pasienter som ikke på annen behandling. I tillegg ble en analyse av immun endringer i samtidige steroid brukere versus nonusers utført og resultatene var sammenlignbare (data ikke vist).
Korrelasjoner av immunmodulerende effekter med klinisk respons
Som rapportert av Siena et al. [12], 8 pasienter ble tatt inn i fase IIa høyeste tolererte dose del av studien og 43 pasienter ble inkludert i en fase IIb POC del. Best responderte med stabil sykdom (SD) i 9 pasienter og studere innmelding ble avsluttet for tidlig på grunn av manglende effekt i noen av behandlingsarmene og unnlatelse av å oppnå den planlagte responsen målet. Det var ingen signifikant (p ≤ 0,05) sammenhenger mellom endringer fra baseline (C1D1) til C2D1 eller C3D1 av enhver immuncellepopulasjon i total overlevelse (OS) uavhengig av behandlingsgruppen (data ikke vist).
Diskusjoner
Lenalidomid er godkjent for bruk i både MM og MDS, og har rapportert klinisk aktivitet i kronisk lymfatisk leukemi (KLL) og NHL [13], [14]. Mye av aktiviteten til lenalidomid i disse hematologiske maligniteter har blitt tilskrevet til cellestyrte draps effekter. I en klinisk studie rapportert av Siena et al (12) forsøkte å vurdere effekt og sikkerhet av kombinasjonsbehandling med lenalidomid og cetuximab i
KRAS plakater (v-Ki-ras2 Kirsten rotte sarkom viral onkogen homolog) -mutant metastatisk pasienter med kolorektal kreft, vurdert vi 25 forskjellige subpopulasjoner av CD45
+ immunceller (T-celler, B-celler og NK-celler) i denne pasientgruppen som ikke har konfunderende hematologiske abnormaliteter. De viktigste funnene er signifikante (p ≤ 0,0001) endringer fra baseline til C2D1 og til C3D1 i følgende fire lymfocyttpopulasjoner: B-celler (redusert), aktiverte T-hjelpeceller (økt), totalt minne cytotoksiske T-celler (økt), og total naive T-hjelperceller (redusert). En mulig kliniske relevansen av disse funnene implisere lenalidomid er en aktivator av T-celler som kan spille en rolle i sin anti-tumor aktivitet. I tillegg kan nedregulering av B-celletall bli koblet til sin aktivitet i B-celle maligniteter. Disse effektene ble påvist i begge behandlingsarmer. Som alle fag ble behandlet med lenalidomid, kan disse endringene skyldes de farmakodynamiske effektene av lenalidomid. Correlative Analysene viste at endringer i cellepopulasjoner (absolutte tall eller prosent) testet ikke korrelerer med behandling arm, respons per RECIST versjon 1.1 kriterier, eller OS. De kliniske svar fra denne studien er vist i detalj av Siena et al. [12].
Videre lenalidomid pluss cetuximab hadde bemerkelsesverdige effekter (opp til 60-fold økning) i sentrale minne og naive T-celler tankevekkende at cetuximab i seg selv kan spille en rolle i T-celleaktivering og funksjon. Lignende effekter ble rapportert av Botta et al. [15] i en cetuximab basert polychemotherapy diett hos pasienter med avansert mCRC. Dette er den første studien, til vår kunnskap, for å rapportere en omfattende profil av sirkulerende immuncelle undergrupper hos pasienter som mottar lenalidomid og vise bevis på T-celle aktivering funksjon av lenalidomid pluss cetuximab.
Pasienter med mCRC administrert med B-celle tappe agenten rituximab har vist både regresjon av metastaser og oppnåelse av SD [16]. I vår studie, selv om de fleste pasienter behandlet med lenalidomid viste betydelig nedgang i B-celler, dette farmakodynamiske effekten korrelerte ikke med OS. Tilsvarende er en forbindelse analog pomalidomide, har blitt rapportert å redusere CD 19
+ perifere blod B-celler hos pasienter med MM mottar alternative dag dosering på 1-10 mg [17].
prekliniske og kliniske data tyder på at lenalidomid aktiverer T-celler. Bartlett et al. [7] viste at pasienter med langtkomne solide tumorer behandling med lenalidomid i 4-5 uker reduserte prosenter av naive hjelpe og cytotoksiske T-celler, og økt prosentandelen av minnet hjelper og cytotoksiske celler, både av disse funnene ble bekreftet i denne studien. Pomalidomide har også blitt rapportert å øke perifert blod CD3
+ og CD8
+ T celler i pasienter med MM [17]
In vitro
hemmer lenalidomid Tregs.; Men i denne studien en oppadgående trend (p 0,05) ble observert både i absolutte tall og i prosent av sirkulerende Tregs i perifert blod på både C2D1 og C3D1 i fag som tar lenalidomid alene. Tilsvarende ble nivået av sirkulerende Tregs økt hos pasienter med MM innen 2 uker etter at lenalidomid [18]. Disse pasienter med MM viste en signifikant økning av HLA-DR
+ T-celler (både CD4
+ og CD8
+ -undergrupper). Økningen i CD4
+ FOX-P3
+ regulatoriske T-celler ble observert etter 9 sykluser (9 måneder) lenalidomid vedlikeholdsbehandling. Derfor kan økningen av regulatoriske T-celler være en sen respons til økt effektor-T-celletall og aktivitet.
aktivering av NK-celler ved lenalidomids har vist seg
in vitro
av både økt NK celle cytokin produksjon, så vel som i funksjonelle studier. I en perifert blod mononukleær celle /tumorcelle ko-kulturmodell, fører T-celle ko-stimulering til økt NK-celle-mediert lyse av forskjellige tumorceller, inkludert prostata og eggstokk-kreft celler [19]. Lenalidomide forbedrer NK-celle og monocytt-formidlet antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet (ADCC) i rituximab mot en rekke hematologiske cellelinjer
in vitro
, inkludert NHL og B-CLL [20], samt øke NK-celleformidlet lyse av cetuximab og trastuzumab belagt kolorektal og brystkreft celler, henholdsvis [21]. I denne studien, selv om ingen signifikante effekter ble observert i endringer av perifere NK-celler, ble en ikke-signifikant økende trend observert i både absolutte tall og i prosent av samlede NK-celler og aktiverte NK-celler (granzyme B
+ og NKD
+) etter 28 dager med dosering baseline. Disse dataene ikke utelukke muligheten for at lenalidomid økt NK-celler og ADCC på stedet av svulsten. Våre data tidligere indikert at deksametason motvirker den stimulerende kapasitet av lenalidomid på begge NK og T-cellene
in vitro product: [22]. Effekten av deksametason på lenalidomids aktivering av NK-celler i pasienter med MM indikerer at selv om antallet sirkulerende NK-celler øker etter lenalidomids tillegg til deksametason behandling, blir den cytotoksiske kapasiteten på NK-celler svekket på grunn av dexamethason-indusert suppresjon av IL-2-produksjon fra CD4
+ T-celler [23]. For å kontrollere for mulige farmakodynamiske effektene av samtidig steroider på endringer fra baseline på bestandene av CD45
+ celler analysert i denne studien, analyser følsomhet ble utført for å utelukke data for pasienter som hadde brukt en systemisk kortikosteroid eller en potent aktuell kortikosteroid i løpet av studien. Resultatene av følsomhetsanalyser var i samsvar med de av hovedanalysen, noe som indikerer at inhibering av B-celler er en sann farmakodynamisk virkning av lenalidomids og denne effekten er ikke forekom ved intermitterende samtidig administrerte immunundertrykkende terapi. Dosene og hyppigheten av deksametason tatt i denne studien var ikke tilstrekkelig til å motvirke T-celle virkningene av lenalidomid, i tråd med tidligere funn om at lavdose deksametason gir større T-celleaktivering av lenalidomid.
I konklusjonen, til tross for preklinisk bevis, dagens kliniske data fra Siena et al (12) tyder på det modulerende effekt av lenalidomid er i stand til å overvinne primærmotstand på
KRAS
-mutant mCRC til EGFR målrettet hemming av cetuximab. Viktigere, disse dataene illustrerer immunmodulerende effekter av lenalidomid som hjelper i å forstå stoffet mekanisme og potensiell anvendbarhet til andre krefttyper.
Hjelpemiddel Informasjon
Figur S1.
Endringer i prosent eller absolutte tall i de resterende 21 immun celle undergrupper fra syklus 1 dag 1 (C1D1) å sykle 2 dag 1 (C2D1) eller sykle 3 dag 1 (C3D1) i alle fag. Den øvre straffe betegner 75
th persentil mens den nedre kant betegner 25
th persentil. Linjen inne hver boks er medianen. Linjene utvide til maksimum og minimum verdier eksklusive uteliggere. De grå linjene betegne enkelt fag data. Forkortelse: Abs. Absolutte
doi: 10,1371 /journal.pone.0080437.s001 plakater (DOC)
Tabell S1.
Biomarker og trene seg utførte analyser og antall deltakere inkludert i hver analyse.
a1 pasienten ble registrert, men har ikke fått studiemedisin. Forkortelse: Len. Lenalidomid
doi: 10,1371 /journal.pone.0080437.s002 plakater (DOC)
Sjekkliste S1.
CONSORT Sjekkliste
doi:. 10,1371 /journal.pone.0080437.s003 plakater (DOC)
Protocol S1.
Trial Protocol
doi:. 10,1371 /journal.pone.0080437.s004 product: (PDF)
