Abstract
epidermal vekstfaktor reseptor (EGFR) og cyklooksygenase-2 ( COX-2) spiller en avgjørende rolle i sykdomsutviklingen, tilbakefall og terapeutiske motstand av prostatakreft (PCA). I denne artikkelen, vi evaluert, for første gang, den terapeutiske fordelen av å blokkere EGRF og /eller COX-2 (ved bruk av gefitinib og NS-398, henholdsvis) når det gjelder å forbedre effektiviteten av det konvensjonelle kliniske kjemoterapeutisk medikament docetaxel in vitro og vivo. Vi viste at EGFR og COX-2 ekspresjon var høyere i metastatisk enn ikke-metastatiske PCA vev og celler. Docetaxel, alene eller i kombinasjon med gefitinib eller NS-398, resulterte i en liten reduksjon i celleviabilitet. De tre legemiddelkombinasjonen redusert cellelevedyktighet i større grad enn docetaxel alene eller i kombinasjon med gefitinib eller NS-398. Docetaxel resulterte i en beskjeden økning i apoptotisk celle med metastatisk og ikke-metastaserende cellelinjer. NS-398 markant forbedret docetaxel-indusert celle apoptose. Kombinasjonen av de tre stoffene som følge enda mer markert apoptose og resulterte i økt undertrykkelse av invasiv potensial enn docetaxel alene eller i assosiasjon med gefitinib eller NS-398. Kombinasjonen av alle tre medikamenter resulterte også i en mer markert nedgang i NF-kB, MMP-9 og VEGF nivåer i PC-3M celler. Disse in vitro funnene ble støttet av in vivo studier som viser at docetaxel i kombinasjon med gefitinib og NS-398 var signifikant mer effektiv enn noen individuell agent. Basert på tidligere preklinisk forskning, konkluderer vi med at samtidig blokkerer EGFR og COX-2 av gefitinib og NS-398 sensitizes avanserte PCA celler til docetaxel-indusert cytotoksisitet.
Citation: Lin J, Wu H, Shi H, Pan W, Yu H, Zhu J (2013) Kombinert hemming av epidermal vekstfaktor reseptor og syklooksygenase-2 fører til større anti-tumor aktivitet av Docetaxel i Avansert Prostatakreft. PLoS ONE 8 (10): e76169. doi: 10,1371 /journal.pone.0076169
Redaktør: Wendy J. Huss, Roswell Park Cancer Institute, USA
mottatt: 27 mars 2013; Akseptert: 21. august 2013, Publisert: 14 oktober 2013
Copyright: © 2013 Lin et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Arbeidet har støttet av vitenskap og teknologi planlegging prosjekt av Nanjing, Kina (201 201 088). Nettadressen til Funder nettsted er https://202.127.12.44/XMSB/Show_JBXXB.jsp?XMBH=2012sc315043 DJXH=20121069. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Prostatakreft (PCA) er den vanligste kreftformen, og er en av de viktigste årsakene til dødsfall blant eldre menn [1]. Svarprosenten til radikal prostatektomi og hormonbehandlede terapi er høy hos pasienter diagnostisert med lokaliserte og androgen-avhengige kreft. Imidlertid er progresjon til hormon-ildfast prostatakreft (HRPC) og /eller benmetastaser assosiert med sykdom tilbakefall og dårlig pasient overlevelse [2-4]. Faktisk, progresjon av prostatacancer til androgen uavhengighet forblir en primærbarriere for å forbedre pasientoverlevelse som det er forbundet med kompliserte underliggende celleforandringer.
Docetaxel er regnet som standard kjemoterapeutiske middel for pasienter med prostatakreft og i de med kliniske tegn på metastaser. Det har blitt rapportert å forbedre livskvaliteten og gir smertelindring, men det er forbundet med minimal en median overlevelse på bare 12 til 19 måneder fra behandlingsstart. Dette understreker behovet for studier som undersøker hvordan du kan optimalisere konvensjonelle kjemoterapeutiske regimer hos pasienter med prostatakreft eller avansert PCa.
Gransker de molekylære mekanismene som ligger til grunn PCa progresjon, vil bidra til å identifisere mulige terapeutiske målet gener som er involvert i apoptose. Det vil også bidra til å klargjøre den mekanismen som er ansvarlig for vekst og cellesignalisering [5-8]. EGFR og COX-2 har begge vist seg å bidra til vedvarende vekst i avansert hrpc enten i fravær eller nærvær av lave konsentrasjoner av androgen [9-11].
EGFR er ofte overuttrykt i kreft hos mennesker. Prekliniske data tyder på at EGFR signalveier aktivere androgen reseptorer under forhold med klinisk androgen deprivasjon. Dette er knyttet til overgangen fra androgen-responsive til den hormon ildfaste fenotype, noe som resulterer i en mer aggressiv klinisk utfall [10,11]. EGFR er derfor antatt å være av primær terapeutisk viktighet, på grunn av dets overekspresjon i avanserte PCa og dens rolle som et medikament mål. Tidligere studier har vist at aktivering av EGFR forbedrer evnen til androgen-reseptorer for å øke PCa proliferasjon. I motsetning ble hemming av EGFR vist seg å forbedre effektiviteten av docetaxel i behandling av metastatisk PCa [12,13].
cyklo katalysere dannelsen av prostaglandiner som er involvert i startfasen og /eller progresjon. COX-2 er blitt vist å fremme betennelse, noe som direkte kan bidra til utvikling av PCa [14]. Det har også blitt vist at COX-2-indusert PGE2 aktiverer cellesignalering er involvert i proliferasjon og derved direkte fremmer tumorcellevekst. Andre studier har vist at COX-2 er overuttrykt ved PCA og at nivået av uttrykk korrelerer med Gleason score, kreft progresjon og tilbakefall [15,16]. I de senere årene har COX-2-hemmere i kombinasjon med cellegifter blitt evaluert i behandling av avansert PCa. Disse midler i betydelig grad øke effektiviteten av androgen tilbaketrekning og fremme oppløsningen av skjelett lesjoner [17,18]. Det er generelt akseptert at COX-2 bidrar til PCa og det er montering bevis som tyder på at COX-2-hemmere kan være nyttig i behandling av PCa.
Tidligere studier har bekreftet at høy COX-2-ekspresjon i PCa er korrelert med docetaxel motstand, og at inhibering av COX-2 bremser signifikant tumorvekst og forbedrer effektiviteten av docetaxel [19,20]. Basert på disse observasjoner, er det mulig at tilsetningen av selektive inhibitorer av EGFR og COX-2 kan representere en ny terapeutisk tilnærming for å forbedre behandling av metastatisk PCa. I denne studien har vi en hypotese om at samtidig blokade av EGFR og COX-2 trasé ved hjelp gefitinib og NS-398 kan forbedre den cytotoksiske effekten av docetaxel i avansert PCa in vitro og in vivo. Den anti-proliferative, anti-invasiv, og apoptose-induserende effekt av de tre midler, alene og i kombinasjon, ble bestemt in vitro og in vivo, og de underliggende molekylære mekanismene som ble undersøkt.
Materialer og Metoder
Etikk uttalelse
Alle forsøk med dyr ble gjennomført med godkjenning av Nanjing Medical University Ethics Committee. Den kliniske undersøkelsen ble godkjent av etikkomiteen av Nanjing Medical University. Skriftlig informert samtykke ble innhentet for alle fag før deltakelse i studien.
tumorprøver og cellelinjer
PCA prøver fra 37 primær adenokarsinom tilfeller ble inkludert i studien. I alle tilfeller to uavhengige patologer anmeldt prøvene for å utelukke andre patologiske typer. Alle prøver ble oppnådd ved transuretral reseksjon av prostata, radikal prostatektomi eller nål-biopsi ved Nanjing BenQ Hospital og Nanjing første sykehuset, mellom 2010 og 2012. Kirurgisk iscenesettelse av svulster ble utført i henhold til Jewett-Whitmore kriterier. Median alder for pasientene var 69 år (58 til 79 år).
Den menneskelige prostata kreft cellelinjer LNCaP, PC-3M og DU-145 som brukes i studien ble kjøpt fra American Type Culture Collection og ble opprettholdt i RPMI-1640 dyrkningsmedium inneholdende 10% føtalt bovint serum, 26 mmol /l NaH
2CO
3 (pH 7,4), 1% L-glutamin og antibiotika (100 IU /ml penicillin-100 ug /mL streptomycin) ved 37 ° C i 5% CO
2. RPMI 1640 og andre kultur materialer ble levert av Gibco.
Reagenser og antistoffer
Gefitinib, NS-398, docetaxel og MTT ble kjøpt fra Sigma. Annexin V-FITC ble levert av Gibco. Antistoffer mot human VEGF og MMP-9 ble oppnådd fra R 1 representert henholdsvis synergi, additivitet og antagonisme [21]
In vitro- og in vivo-data ble analysert ved anvendelse av Students t-test.. EGFR og COX-2 uttrykk i ikke-metastatisk og metastatisk PCA vev ble sammenlignet med Pearsons kji-kvadrat test .. Verdier av p 0,05 ble ansett som statistisk signifikant
Resultater
EGFR. og COX-2 protein nivåer i prostata kreft vev
EGFR uttrykk var positiv i syv ikke-metastatisk PCA vev (43,8%) og i 18 (85,7%) vevsprøver fra pasienter med metastatisk PCa (
P
0,01). Intensitet farging for COX-2 ble sett i 18 metastatisk (85,7%) og ni ikke-metastatisk PCA vev (56,3%; p = 0,11). EGFR og COX-2-positive koekspresjon ble funnet i 16 pasienter med metastatisk vev (76,2%) og i fire (25,0%) ikke-metastatiske PCA vev (P 0,01). Resultatene er vist i Figur 1 og Tabell 1.
Snittene ble undersøkt under et mikroskop, og immunoreaktivitet ble indikert ved mørk brun farging. Representative deler av prostatakreft vevsprøver fås originale forstørrelser av × 200 og × 400.
Stage
n
Antall (%) pasienter
EGFR + COX 2+
EGFR + COX-2-
EGFR-COX-2 +
EGFR-COX-2-
A + B164 (25,0%) 3 (18,8%) 5 (31,2%) 4 (25,0%) C + D2116 (76,2%) 2 (9.5%) 2 (9,5%) 1 (4,8%) Tabell 1. positiv ekspresjon av EGFR og COX-2 i ikke-metastaserende og metastatisk prostata kreft.
patologisk iscenesettelse av PCa ble definert i henhold til Whitmore-Jewett iscenesettelse system som followsA (forresten oppdaget PCA), B (begrenset PCA), C (invasjon til tilstøtende organer) D (fjernmetastaser eller spredning til lymfeknuter) .Jewett trinn A og B ble definert som ikke-metastatisk og scene C eller D som metastatisk. CSV Last ned CSV
Baseline uttrykk og aktivering av EGFR og COX-2 protein i PC-3M og DU-145 celler
Den basale nivået av total EGFR, p-EGFR og COX-2 ble målt i PC-3M og DU-145 celler. Vi deretter undersøkt om EGF var assosiert med en økning disse nivåene. Resultatene indikerte at aktivert /fosforylert EGFR (p-EGFR), EGFR og COX-2-protein ble uttrykt i begge cellelinjer (figur 2A). p-EGFR og COX-2 ekspresjon ble betydelig økt i de to cellelinjer ved tilsetning av EGF, men EGFR-ekspresjon var uforandret. Endringen i p-EGFR /EGFR forholdet var doseavhengig (figur 2B).
Celler dyrket i 1% FBS ble eksponert for 0, 10 og 100 ng /ml EGF i 24 timer som beskrevet i Materialer og Metoder. De resulterende cellulære proteiner ble underkastet SDS-PAGE og Western blot-analyse for å bestemme protein nivåer av p-EGFR, EGFR og COX-2 (Figur 2A). Western blot for β-aktin er vist som lasting kontroll. Den relative proteinnivået for p-EGFR /EGFR og COX-2 er vist i figur 2B.
Anti-proliferativ effekt indusert ved docetaxel alene eller i kombinasjon med gefitinib og NS-398
MTT-analyser ble brukt for å evaluere den anti-proliferative effekt av de tre stoffene alene eller i kombinasjoner, i PC-3M og DU-145-celler. I preliminære eksperimenter, vi etablert konsentrasjons-responskurver for hvert medikament for å bestemme den konsentrasjon som produserte mindre enn 30% veksthemming i PCA-cellelinjer (data ikke vist). Basert på disse kurvene, har vi bestemt at konsentrasjonene av docetaxel (0,01 umol /L), gefitinib (20 umol /L), eller NS-398 (100 umol /L) var egnet for anvendelse i kombinasjonsterapiene eksperimenter. Co-inkubasjon med gefitinib eller NS-398 litt forsterket den cytotoksiske effekten av docetaxel. Men de tre legemiddelkombinasjonen induserte en større enn additiv effekt på cellevekst-inhibering i begge cellelinjene som var mye mer markert enn det som sees med ett eller to medikamenter kombinasjoner (figur 3). Analyse av kombinasjonsbehandlingen i PC-3M og DU-145-celler indikerte at kombinasjonsindeksen for de tre midlene kombinasjonen var mindre enn en tyder på en synergistisk effekt (tabell 2 og 3)
konsentrasjons-respons respons for. hvert medikament ble anvendt for å bestemme konsentrasjonen som induserte en passende anti-proliferativ effekt for anvendelse i kombinasjonsterapi (data ikke vist). Celler ble utsatt for docetaxel (0,01 umol /L), NS-398 (100 umol /l) og gefitinib (20 umol /l) alene eller i kombinasjon i 24 timer. Verdier er gjennomsnitt ± SD av fire uavhengige forsøk. * P 0,05, ** P 0,005 ***, P 0,001 sammenlignet med kontrollverdier.
Cellelinjer
G (mm)
D (nM)
Fa
CI
N (mm)
D (nM)
Fa
CI
PC-3M1050.2151.1535050.2110.98220100.2801.049100100.3080.72640200.3631.118200200.3881.023DU-1451050.1861.8395050.2640.96620100.2651.114100100.3830.92440200.3251.092200200.5850.956Table 2. Effekt av gefitinib (G) eller NS-398 (N) i kombinasjon med docetaxel (D) i PC-3M og DU-145 celler.
CSV ned CSV Cellelinjer
G (mm)
N (mm)
Dl (nM)
Fa
CI
PC-3M105050.3020.74520100100.4650.71240200200.6610.699DU-145105050.2640.96620100100.4230.78340200200.6210.872Table 3. Effekt av gefitinib (G), NS-398 (N) og docetaxel (D) kombinasjon i PC-3M og DU-145 celler.
Kombinasjonsbehandling med gefitinib (10, 20 og 40 mm), NS- 398 (50, 100, og 200 uM) og docetaxel (5, 10, og 20 nM) i PC-3M og DU-145. Cellelinjer ble evaluert ved MTT-analyse. Fa: Fraksjon av vekst påvirke av legemiddel utsatt celler sammenlignet med kontroller. CI, kombinert indeks. Fa og CI ble beregnet ved hjelp CalcuSyn programvare. CSV Last ned CSV
cytotoksiske effekten indusert av docetaxel, gefitinib, og NS-398
flowcytometrisk analyser ble benyttet for å bestemme celle apoptose indusert av noe narkotika alene eller i kombinasjon. Antallet av apoptotiske celler ble kvantifisert (figur 4A og C). Både docetaxel og gefitinib, men ikke NS-398, noe økt antall apoptotiske celler i forhold til det man ser i ubehandlede PCA celler (Figur 4B og D). Docetaksel i kombinasjon med gefitinib eller NS-398, var assosiert med en økning i antallet av apoptotiske celler sammenlignet med docetaxel alene (figur 4B og D). De tre legemiddelkombinasjonen i et signifikant høyere antall apoptotiske celler enn en enkelt medikament eller to medikamenter kombinasjon (figur 4B og D).
Etter inkubasjon med ulike medikamenter, cellene ble fremstilt som beskrevet i Materialer og Metoder og apoptotisk hastigheten ble bestemt ved FACS-analyser. A og C: Representative dot plots illustrerer dataene nær middelverdien av grupper i B og D. B og D. apoptose hastigheten ble beregnet fra UR (ikke-levedyktige apoptotiske eller nekrose celle hastighet) og LR (tidlig apoptotisk celle rate) krets. Representative resultater fra tre separate forsøk. * P 0,05, ** P 0,005 ***, P . 0.001 sammenlignet med kontrollverdiene
Tap av invasiv evne indusert av docetaxel, gefitinib, og NS-398
en in vitro invasjon assay ble anvendt for å evaluere evnen til invasiv i PC-3M og DU145-celler. Den invasive potensiale ble bestemt ved å beregne antall celler som trengte en Matrigel invasjonen kammer. Som vist i figur 5A og C, utsette cellene til 0,005 umol /L docetaxel, 10 umol /L gefitinib, eller 50 umol /L NS-398 inhiberte signifikant deres invasive egenskaper (figur 5B og D).
cellene ble ubehandlet (kontroll) eller eksponert i 24 timer til 0,005 umol /L docetaxel (D), 10 umol /L gefitinib (G) eller 50 umol /LNS-398 (N), alene eller i kombinasjon i løpet av in vitro invasjons analyser utført ved anvendelse av Transwell bikammer kamre som beskrevet i Materialer og Metoder. Ved slutten av den 24 timer analysen ble de invaderende celler farget og tellet ved fasekontrastmikroskopi (x 200). Representative resultater viser det midlere antall celler invaderer gjennom Matrigel sette membranen i fem tilfeldige mikroskopfelt. * P 0,05, ** P 0.005, ***, P . 0.001 sammenlignet med kontrollverdiene
Eksponering for docetaxel i kombinasjon med gefitinib eller NS-398 markant redusert antall av DU-145 celler trenger inn i Matrigel sammenlignet med docetaxel alene (figur 5D), men ingen forskjell ble sett i PC-3M celler (figur 5B). De tre legemiddelkombinasjonen viste en supra-additiv hemmende effekt på celle invasjon evne som var sterkere enn noen to-legemiddelkombinasjonen (figur 5B og D).
NF-kB, MMP-9 og VEGF uttrykk endringer indusert av docetaxel, gefitinib, og NS-398
Protein og mRNA og ble kvantifisert å undersøke om NF-kB, MMP-9 og VEGF, var involvert i cellulære responser til docetaxel, gefitinib eller NS-398. Resultatene i figur 6A og 6B viser at docetaxel, gefitinib og NS-398 hver for seg downregulated NF-kB, MMP-9 og VEGF-mRNA-ekspresjon i både PCA cellelinjer. NF-kB-mRNA-ekspresjon var mer markert nedreguleres når cellene ble utsatt for legemiddelkombinasjoner. De tre medikamentkombinasjoner viste en sterkere inhiberende virkning enn de to medikamentkombinasjoner (Figur 6A og B).
Celler dyrket i 1% FBS ble eksponert til 0,01 umol /L docetaxel (D), 20 umol /L gefitinib (G) or100 umol /LNS-398 (N), alene eller i kombinasjon, eller med DMSO som kontroll i 24 timer. NF-KB, MMP-9 og VEGF mRNA (A og B) og proteinnivåer (C og D) ble målt som beskrevet i materialer og metoder. Verdiene er angitt som middelverdi ± SD fra tre uavhengige eksperimenter.
Hverken gefitinib eller NS-398 hadde noen additiv effekt på docetaxel-indusert nedregulering av MMP-9 og VEGF mRNA ekspresjon (figur 6A og B ). Men co-inkubasjon med alle tre agenter resulterte i mer markert hemming av MMP-9 og VEGF nivåer sammenlignet med enkelt eller to narkotika kombinasjon i PC-3M celler (Figur 6A), men ikke i DU-145 celler (Figur 6b),
Western blotting ble gjennomført for å beregne protein nivåene av NF-kB MMP-9 og VEGF etter eksponering for hvert av medikamentene. Som vist i figur 6C og 6D, til tilsetningen av docetaxel gefitinib og /eller NS-398 i dobbelt- og trippelkombinasjon endret NF-kB, MMP-9 og VEGF-proteinnivåer i begge cellelinjer. Disse resultater er generelt i samsvar med de endringer bortsett fra mRNA for endringer i NF-kB-protein etter eksponering for en kombinasjon av docetaxel og NS-398, (figur 6C og D). Samlet utgjør disse resultatene tyder på at den reelle responsen fra PC-3M celler til eksponering for docetaxel, gefitinib og NS-398 kombinasjon, er påvirket av en reduksjon i NF-kB, MMP-9 og VEGF (figur 6C).
Effekter av gefitinib, NS-398 og docetaxel på prostata tumorvekst in vivo
docetaxel i kombinasjon med gefitinib eller NS-398 hemmet tumorvekst og til en betydelig større grad enn i ubehandlede kontroller eller dyr behandlet med et enkelt medikament (figur 7). I disse dobbeltkombinasjonsgruppene bare en beskjeden økning i tumorstørrelse ble registrert i slutten av eksperimentet 6 uker etter tumorcelle injeksjon og 2 uker etter avsluttet behandling. Kombinert behandling med eventuelle to medikamenter eller med alle tre medikamenter ble godt tolerert; ingen vekttap eller andre tegn på akutt eller forsinket toksisitet ble observert.
Mus ble injisert i ryggsiden med PC3M celler. Etter 7 dager (gjennomsnittlig tumorstørrelse: 0,2 cm
3), ble musene behandlet som beskrevet i avsnittet Materialer og metoder. Endringen i tumorvolum ble evaluert etter eksponering for Doc, gefitinib og NS-398 alene eller i kombinasjon. Data er vist som gjennomsnitt ± SD.
Diskusjoner
Docetaxel spiller en viktig rolle i behandling av avansert PCa. Imidlertid langtidsbehandling ofte resulterer i bivirkninger og kjemoterapi motstand, som resulterer i tilbakevendende sykdom og dårlig overlevelse. I et forsøk på å overvinne resistens, har nyere studier fokusert på lav-dose docetaxel i kombinasjon med andre rusmidler eller på å kneble noen gener [22-25].
EGFR og COX-2 er over-uttrykt i et antall av maligniteter, inkludert PCa. En voksende mengde bevis viser at EGFR og COX-2 signal aktiviteter spiller en avgjørende rolle i utviklingen av ondartede sykdommer. Begge veier, derfor gir attraktive mål for kreftbehandling og chemoprevention [5-8,26,27]. Derfor EGFR og COX-2-hemmere har blitt undersøkt for kjemoterapi og kreft forebygging [28-31].
Over-uttrykk av EGFR og COX-2 og samspillet mellom EGFR-signalering og COX-2 aktivitet har vært innblandet som årsaksfaktorer for kreft [32,33]. I in vitro og in vivo-studier, viste vi betydelig oppregulering av EGFR og COX-2 ekspresjon i avansert PCa vev (tabell 1) og i tilsvarende cellelinjer (figur 2). Det har tidligere blitt rapportert at aktivering eller overekspresjon av EGFR [12,13] og COX-2 [20] er korrelert med docetaxel motstand. Dette førte oss til å spekulere i at samtidig rettet mot EGFR og COX-2 kan være en mer effektiv terapeutisk strategi for å overvinne docetaxel motstand enn målretting enten signalveien separat.
Våre resultater viser at samtidig blokkerer EGFR med gefitinib og COX-2 med NS-398 i PCA-celler utsatt for lav-dose docetaxel resulterte i en gunstig virkning på hemming av cellevekst (figur 3). Median-effekt-analyse ved bruk av CI fremgangsmåten ifølge Chou og Talalay bekreftet en moderat synergistisk interaksjon mellom disse tre stoffene i begge PCA cellelinjer (tabell 2 og 3). I celle apoptose og invasjon assays den kombinerte virkning av de tre stoffene var noe større enn additiv i de to cellelinjene. Disse resultatene er i samsvar med resultatene av testen MTT spredning, noe som tyder på at denne nye kombinasjonen av medikamenter kan være effektive i å forebygge tumorvekst og fjernmetastaser.
Vi viste også at de tre legemiddelkombinasjonen var forbundet med markert celle apoptose (figur 4) og tap av invasiv evne (figur 5). I en tidligere studie gefitinib hadde ingen mono aktivitet, men dens kombinasjon med docetaxel var assosiert med samme svarprosenten i avansert PCa som docetaxel monoterapi [7]. Det har også blitt vist at cyklooksygenase-2-inhibering forsterker docetaxel-indusert apoptose [17] som er i samsvar med resultatene i vårt studium. Men på lang sikt, høydose behandling med denne kombinasjonen er assosiert med toksisitet og bivirkninger som hindrer bruk i klinisk praksis. Høy dose docetaxel er forbundet med nervesystemet skade, blodkreft undertrykkelse og chemoresistance som gjør det un egnet for mange pasienter med avansert sykdom
Viktigere, vi viste at å legge en EGFR-hemmer og COX-2 spesifikk hemmer til lavdose docetaxel regimer kan gi en strategi for å redusere doserelaterte bivirkninger. Samtidig rettet mot EGFR og COX-2 viste seg å sensibilisere PCA-celler for virkningene av docetaxel in vitro. Våre resultater in vivo var i samsvar med disse in vitro funnene indikerer at kombinasjonsbehandling er bedre enn enkelt- eller dobbeltagent terapi. Kombinasjonen av eventuelle to medikamenter, eller alle tre medikamenter, ble godt tolerert. Ingen akutt eller forsinket toksisitet ble observert i noen av dyrene.
