Abstract
Bakgrunn
Oral plateepitelkarsinom (OSCC) er den sjette vanligste kreftformen globalt. Tobakk og HPV-infeksjon, begge er det viktig risikofaktor for utvikling av kreft i munnhulen og forårsaker mitokondriell dysfunksjon. Genetisk polymorfisme i xenobiotiske-metaboliserende enzymer endre effekten av miljømessige eksponeringer, og dermed spille en betydelig rolle i gen-miljø interaksjoner og dermed bidra til den enkeltes mottakelighet for kreft. Her har vi undersøkt sammenhengen av tobakk -. Betel pund tygge, HPV-infeksjon,
GSTM1-GSTT1
null genotyper, og kreft etapper med mitokondrie-DNA (mtDNA) innhold variasjon i muntlige kreftpasienter
metodikk /hovedfunnene
studiet består av 124 tilfeller av OSCC og 140 kontrollpersoner PCR basert gjenkjenning ble gjort for høyrisiko HPV ved hjelp av en konsensus primer og multipleks PCR ble gjort for påvisning av
GSTM1 -GSTT1
polymorfisme. En komparativ ΔCt metoden ble brukt for bestemmelse av mtDNA innhold. Risikoen for OSCC økt med opphørt mtDNA kopiantall (
P
trend
= 0,003). Sammenhengen mellom mtDNA kopiere nummer og OSCC risikoen var tydelig blant tobakk – betel quid chewers snarere enn tobakk – betel quid ikke chewers; samspillet mellom mtDNA kopiantall og tobakk – betel pund var signifikant (
P
= 0,0005). Det ble ikke observert signifikant forskjell mellom
GSTM1 Anmeldelser –
GSTT1
null genotyper (
P
= 0,04,
P =
0,001 henholdsvis) og HPV infeksjon (
P
0,001) med mtDNA innhold variasjon i saker og kontroller. Positiv korrelasjon ble funnet med nedgang i mtDNA innhold med økningen i tumorstadier (
P
0,001). Vi rapporterer for første gang foreningen av HPV-infeksjon og
GSTM1-GSTT1
null genotyper med mtDNA innhold i OSCC.
Konklusjon
Våre resultater tyder på at mtDNA innhold i tumorvev endringer med tumor stadium og tobakk-betel quid tygge vaner mens lave nivåer av mtDNA innhold antyder invasiv dermed tjene som en biomarkør i påvisning av OSCC
Citation. Mondal R, Ghosh SK, Choudhury JH, Seram A, Sinha K, Hussain M, et al. (2013) mtDNA Kopier nummer og risikoen for Oral Cancer: En rapport fra Nordøst-India. PLoS ONE 8 (3): e57771. doi: 10,1371 /journal.pone.0057771
Redaktør: Syed A. Aziz, Health Canada, Canada
mottatt: 19 november 2012; Godkjent: 24 januar 2013; Publisert: 04.03.2013
Copyright: © 2013 Mondal et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Infrastructural fasiliteter gitt av Institutt for bioteknologi, Govt. av India. Ingen ekstern fond for denne studien. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
OSCC, den hyppigste svulst i munnhulen, [1] og den sjette vanligste kreftformen globalt som står for om lag fem prosent av alle ondartede svulster over hele verden [2], [3]. Den statistiske analysen av International Agency for Research on Cancer (IARC) indikerte at leppe og munnhule er den tiende vanligste svulststedet i menneske [4]. Snus produkter og Betel pund med eller uten tobakk er de viktigste risikofaktorene for munnhule kreft i Taiwan, India og andre naboland [5] – [7]. I Nordøst-India, forekomsten av tobakksrelaterte oral cancer er ca 33% [8]. Røyking, alkohol, snus produkter, og HPV (humant papilloma virus) infeksjoner er de viktigste risikofaktorene for munnhule kreft, med røyking og alkohol ha synergieffekter [9], [10].
Utvikling av kreftutvikling på grunn av miljø-genet interaksjon har blitt godt illustrert av fase i og fase II enzymer som er involvert i metabolismen av kreftfremkallende. Fase I enzymer er CYPs (cytokrom P450) som er involvert i å aktivere miljø procarcinogens legge til eller utsette sine funksjonelle grupper mens fase II enzym som GST (glutation S-transferase) er involvert i detoxication av de aktiverte metabolitter av de kreftfremkallende [11] . Tobakksrøyk er en kompleks blanding av kreftfremkallende stoffer, og snus er rik på nitrosaminer. Videre kan samtidig bruk av betel pund fører til 50 ganger økning i reaktive oksygenarter generasjon (ROS) [12], [13]. Et strukturelt sletting i disse genene representerer en null genotype og har vært forbundet med en økt risiko for kreft i munnhulen [14].
MITOKONDRIELLE skader har lenge vært mistenkt for å spille en viktig rolle i utvikling og progresjon av kreft [ ,,,0],15], [16]. Mitokondrie respiratorisk aktivitet er forbundet med generering av ROS. Den mitokondrielle genomet er utsatt for ROS og andre typer av genotoksiske skade på grunn av mangel av beskyttende histoner og dets begrensede mtDNA reparasjonsmuligheter. MtDNA kopitall pr celle opprettholdes innenfor et konstant område for å dekke energibehovet av cellen for å opprettholde normale fysiologiske funksjoner. Det varierer betydelig blant befolkningen fra 1000 til 10.000 per celle [17] og også betydelig varierer etter celletype. Det er sannsynlig at variasjonene i kopiantallet av mitochondria reflekterer netto resultat av gen-miljø interaksjoner mellom ukjente arvelige faktorer og nivåene av oksidativt stress (en ubalanse mellom ROS produksjon og antioksidant kapasitet), forårsaket av en rekke av endogent og eksogene faktorer, så som hormoner, alder, kosttilskudd og miljømessige oksidanter /antioksidanter, og reaksjons til oksidativ skade, som alle antas å være risikofaktorer for forskjellige typer av kreftutvikling [18] -. [20]
MtDNA innholdet har blitt antydet som en potensiell biomarkør for flere krefttyper [21], [22]. Redusert mtDNA innhold hadde blitt rapportert for thyroid [21], nedsatt [23], [24], mage [25], bryst [26], tidligere behandlet hode og nakke [27], eggstokk [28] og leverkreft [29 ]. I kontrast, har flere studier vist på økt mtDNA innhold i prostata [30], ubehandlet hode og nakke [31], livmor [32], lunge [33], tykktarms [34], [35] og bukspyttkjertelkreft [36].
Formålet med denne studien var å undersøke sammenhengen av tobakk – betel pund tygge, HPV-infeksjon,
GSTM1-GSTT1
null genotyper, med mtDNA innhold. Vi evaluerte også mtDNA innholdet i tumoren og korrelert med tumorstadier. OSCC er en multifaktoriell og dynamisk hendelse hvor mange endringer bidrar til sykdomsutvikling. Derfor er risikoen for tobakk – betel pund tygging,
GSTM1-GSTT1
null genotyper, HPV infeksjon og mtDNA innhold forbundet med OSCC ble studert som kan tjene som en mulig molekylær biomarkør for tidlig deteksjon av kreft i munnhulen, som er den vanligste kreftsykdommen i Nordøst-regionen i India.
Materialer og metoder
fag og Prøvetaking
Ett hundre tjuefire OSCC pasientens etterbehandlet svulstvev /FFPE /muntlig pinne og 140 ikke-OSCC (uten kreft, har for vane å tygge tobakk-betelquid og heller ingen familiehistorie med kreft) alder og kjønn matchede kontroller vattpinne fra indre hulrom, ble samlet inn i løpet av juli 2010 til august 2012 fra sykehus og fra hjemmet med skriftlig informert samtykke og godkjent av IRB. Tilgjengeligheten av slike kontroller alene på sykehuset var umulig som de fleste av pasientene kommer med sine slektninger ikke passer innenfor kriteriene som er tildelt for å være kontroller i denne studien. Data om alder, kjønn, yrke og natur konsumere tobakk-betel quid vane (røyking eller røyksvakt) og alkohol inntak fra OSCC fagene ble abstrahert fra sykehus poster og på personlige intervjuer. Alle mulige forholdsregler ble tatt for å unngå krysskontaminering mens samle så vel som behandling av prøvene
Etikk uttalelse
Denne studien ble godkjent [No:.. IRB /CCHRC /01 /2010] av Institutional Review Board (IRB), Cachar Cancer Hospital and Research Centre (CCHRC) (https://cacharcancerhospital.org), Meherpur, Assam, India.
DNA Isolation
DNA ble isolert fra forvalgte regioner i svulstvev, formalinfiksert parafin innebygd vev (FFPE) og muntlig pinne. Vevene ble spaltet i TES (50 mM Tris-HCl pH 7,4, 25 mM EDTA, 150 mM NaCl) buffer og inkubert over natten ved 55 ° C vevet fordøyer. DNA ble deretter isolert ved hjelp av fenol /kloroform /isoamylalkohol metode etterfulgt av etanolutfelling og resuspendert i TE (10 mM Tris-HCl pH 8,0, 1 mM EDTA) buffer og lagret ved -20 ° C [37]. Bioline Isolate Genomisk DNA MINIKIT (Bioline, UK) ble brukt til isolering av genomisk DNA fra FFPE- svev etter produsentens anvisninger.
Multiplex PCR for
GSTM1 Hotell og
GSTT1
Analyse for
GSTM1 Anmeldelser –
GSTT1
genet polymorfisme ved hjelp av
CYP1A1
genet som intern kontroll ble gjort av multipleks PCR. Termin (F) og revers (R) primere som brukes til forsterkning
GSTT1
var F5′-TTCCTTACTGGTCCTCACATTCTC-3 «og R 5′-TCACGGGATCATGGCCAGCA-3»,
GSTM1
var F5 « -GAACTCCCTGAAAAGCTAAAGC-3 «og R5′-GTTGGGCTCAAATATACGGTGG-3»,
CYP1A1
var F5′- ACTGCCACTTCAGCTGTCT og R5′-GCTGCATTTGGAAGTGCTC henholdsvis [38], [39]. PCR programmet brukes til forsterkning var: innledende denatureringstrinn ved 94 ° C i 2 minutter; 30 sykluser med denaturering ved 94 ° C i 30 sekunder; annealing ved 59 ° C i 45s og forlengelse ved 72 ° C i 90-tallet. Det amplifiserte produkt ble observert i 1,5% agarose-gel.
HPV Deteksjon og genotyping
PCR-amplifikasjon for HPV-påvisning ble utført med konsensus primere GP5 + /+ GP6 fulgt av subtype påvisning av HPV 16 og 18 [40], [41]. Reaksjonsblandingen uten DNA-templat ble brukt som en negativ kontroll, og som med kjente DNA-templat ble brukt som en positiv kontroll som ga PCR-produktene med forventede resultater. PCR amplifisering ble utført med førti sykluser. PCR-produktene ble analysert ved elektroforese på 2% agarose-gel. En molekylvekt markør på 50 bp ble også kjøre samtidig for å identifisere molekylære størrelsen på PCR produktene.
Kvantitativ Real Time PCR
De StepOne ™ Real-Time PCR System (Applied Biosystems) ble brukes til å utføre PCR-amplifikasjon for mtDNA D-løkke (C-tarmkanalen) region.
GAPDH
ble brukt som en «husholdningsgenet» for å normalisere alle terskelsyklusen (Ct) verdier. Termin (F) og revers (R) primere brukes til forsterkning av C-tarmkanalen regionen var F5 «CAGGGTCATAAAGCCTAAATAG 3» og R5’GAGGTAAGCTACATAAACTGTG3 «(109 bp) og GAPDH var F5’GAAATCCCATCACCATCTTCC 3» og R5 «GAGCCCCAGCCTTCTCCATG 3» (125 bp) hhv. For hver 10 ul reaksjon, ble 1 pl av ukjent DNA amplifisert inneholdende 0,5 ul av hver primer (20 pmol /pl), 5 pl 2X SYBR grønn Mastermix (Applied Biosystems), og 3 ul nuklease fritt vann. Den sanntids-PCR-betingelsene besto av innledende denaturering og Taq polymerase aktivering ved 95 ° C i 10 minutter etterfulgt av 40 sykluser av 95 ° C i 45 sekunder, 54 ° C i 45 sekunder og 72 ° C i 1 minutt og deretter et smelte kurve analyse. Hver måling ble gjentatt i triplikat, og et ikke-templat kontroll ble inkludert i hvert eksperiment.
For å bestemme mengdene av mtDNA og nDNA til stede i prøvene, det gjennomsnittlige antall terskelsyklusen (Ct) verdier av nDNA og mtDNA ble oppnådd fra hvert tilfelle. Nivået av mtDNA ble beregnet ved hjelp av deltaet Ct (ΔCt) av gjennomsnittlig Ct av mtDNA og nDNA (ΔCt = CtmtDNA-CtnDNA) i samme brønn som en eksponent for to (2
-ΔCt).
Statistisk analyse
Medianer og frekvenser av utvalgte egenskaper ble sammenlignet mellom saker og kontroller ved hjelp av Mann-Whitney U test for kontinuerlige og Pearson chi-kvadrat for alle andre kategoriske variabler. MtDNA kopiantall ble inndelt i kvartiler basert på fordelingen mellom kontrollene. Odds ratio (OR) og 95% konfidensintervall (CIS) ble estimert ved hjelp av logistiske regresjonsmodeller. En test for trend ble beregnet ved bruk av mtDNA kopiantallet som en kontinuerlig variabel. Ikke-parametrisk Mann-Whitney test ble brukt for å teste om mtDNA innhold endring i tumor er forskjellig i OSCC tilfeller og kontroller med eller uten HPV-infeksjon,
GSTT1 Kjøpe og
GSTM1
null genotyper.
P
-verdier mindre enn 0,05 er ansett som statistisk signifikant.
Resultater
Det som kjennetegner de OSCC fag og kontroller som beskrevet i tabell 1. Det var ingen statistisk signifikante forskjeller mellom tilfellene og styrer fag i forhold til alder (
P
= 0,82), kjønn (
P
= 0,2), inntak av dagens frukt (
P =
0,94) , saltet tørr fisk (
P
= 0,77) og gjæret fisk (
P
= 0,84). Det ble imidlertid betydelige forskjeller observert i daglig tobakks betel quid inntak (
P
= 0,01) og vegetabilske (
P
= 0,04). De individuelle risikofaktorer forbundet med oral cancer ble undersøkt. Økningen risiko for OSCC er 2.2- ganger (95% KI, 1,31 til 3,68;
P
= 0,002) mellom tobakk-betel quid chewers som er en av de viktigste medvirkende faktorer for kreft i munnhulen og i Nordøst-India tobakk tygging er en av de vanlige fremgangsmåter. PCR av det onkogene HPV-genomet ble utført ved anvendelse av konsensus-primere ble observert GP5 + /GP6 + og 450 bp bånd (figur 1A). Påvisningen av vanlig risiko HPV i individet ble observert å være høyere (figur 1B), og ble funnet 43,54% (54) i tilfeller, og 17,14% (24) i kontrollgruppen (tabell 2). Ved genotyping HPV-positive prøver ble funnet å være høy risiko subtype av HPV18. Infeksjon med HPV har vært innblandet som en av de mulige årsaksfaktorer for OSCC og i denne studien, er risikoen for OSCC økt 3,72 -folds (95% KI, 2,11 til 6,56;
P
0,0001) på grunn til HPV-infeksjon.
(A) Representative agarosegel farget med etidiumbromid for fragmentstørrelse bestemmelse (ved forventet størrelse på ~450 basepar) og polymerasekjedereaksjon (PCR) amplifikasjon utbytte for vanlige risiko humant papillomavirus (HPV ) genomer fra kontroller og muntlige kreftpasienter. (B) stolpediagram som viser den høye forekomsten av HPV i OSCC pasienter enn kontroller basert på PCR-påvisning av genomisk DNA isolert fra oral vattpinne og vev. (C) Multiplex PCR mønstre for
GSTM1
,
GSTT1
, og
CYP1A
gener separert ved agarosegelelektroforese, tilsvarende kontroller (spor 1-10) og kreft i munnhulen pasienter (sporene 11-20).
CYP1A1
-genet ble anvendt som en intern positiv kontroll. Lanes 1,4,5,7,10,11,12,13,15,11 og 18 representerer tilstedeværelse av både
GSTM1 Hotell og
GSTT1
gener, og lane 2, 6 og 14 representerer null genotyper for både
GSTM1 Hotell og
GSTT1
gener. Lanes 3 og 20 representerer nærvær av
GSTM1
genet og null genotyper for
GSTT1
genet. Lanes 4, 58, 16 og 19 representerer vill nærvær av
GSTT1
genet og null genotyper for
GSTM1
genet. (D) Bar Grafen viser fordelingen av
GSTM1 Hotell og
GSTT1
null genotyper blant OSCC pasienter og kontroller basert på multipleks PCR påvisning av genomisk DNA isolert fra oral pinne og vev.
Multiplex PCR ble gjennomført blant alle sakene og null genotype av
GSTT1
eller
GSTM1
eller begge ble oppdaget av fravær av bandet når observert i 1,5% agarose-gel (figur 1C). Vi observerte
GSTM1
null genotype i 47,58% (59) saker og 26,42% (37) kontroller,
GSTT1
null genotype i 41,12% (51) saker og 22,85% (32) kontroller, både
GSTT1 Hotell og
GSTM1
null genotyper var 28,22% (35) saker og 5% (7) styrer henholdsvis (figur 1D).
GSTM1
null genotype har økt oral kreftrisiko ved 2.52-gangers (95% KI, 1,50 til 4,22;
P
= 0,0003) som null genotyper av denne klassen genet har blitt koblet med tall av kreft, trolig på grunn av en økt mottakelighet for miljøgifter og kreftfremkallende, mens risikoen sammenslutning av
GSTT1
null genotype med OSCC funnet å være statistisk signifikant (OR 2,35; 95% CI, 1,38 til 4,01;
P
= 0,001) (tabell 2). Ytterligere risiko øker med 7,7 ganger for OSCC med både
GSTM1-GSTT1
null genotyper (95% KI, 3,17 til 18,67;
P
0,0001).
Ved hjelp av kvantitative PCR-teknikker, bestemt vi den relative innholdet av mtDNA i forhold til
GAPDH
genet i 124 OSCC pasienter med forskjellige tumorstadium og i normale munnslimhinnen celler i 140 personer uten sykdom (figur 2A). Totalt sett den relative median av mtDNA innholdet er betydelig lavere i tilfeller (0,22 relative eksemplarer) enn kontrollene (0,89 relative eksemplarer) (
P
0,009). Fordelingen av mtDNA-innhold i kasser og kontroller som ble vist i figur 2B. OSCC tilfeller i laveste kvartil av kopiantallet mtDNA opplevd en betydelig økt risiko for 2,92 ganger til munnhulekreft (95% KI, 1,32 til 6,43) sammenlignet med de i høyeste kvartil (tabell 3). Vi observerte at risikoen for OSCC økt med opphørt mtDNA kopiantall (
P
trend
= 0,003).
(A) Kvantitativ PCR av D-loopen regionen og
GAPDH
genet (representant kurve). D-loop-regionen og
GAPDH
er allestedsnærværende gener funnet i mitokondrie og kjernefysiske genomer, henholdsvis. Ved hjelp av kvantitativ PCR i prøver fra pasienten, og kontroll, ble det relative mitochondrial innholdet beregnet. (B) Fordeling av mtDNA kopiere nummer i OSCC og kontroller. (C) mitokondrie innhold avtar med økning i tumorstadiet: de ulike stadier av OSCC prøver fra scenen 0 til scene IVB med hensyn til å logge 2 RQ (log ganger endring)
Foreningen. mellom mtDNA kopiere nummer og OSCC risikoen var tydelig blant tobakk – betel quid tygger fremfor tobakk – betel quid ikke tygger (tabell 4); samspillet mellom mtDNA kopiantall og tobakk – betel pund var signifikant (
P
= 0,0005). Lignende resultater ble observert når saker og kontroller ble klassifisert som tobakks betel quid tygger og ikke tygger basert på lav (≤1) og høy ( 1) mtDNA kopiantall, tobakk-betel quid chewers med de lave mtDNA kopiere nummer har 3,54 ganger økt risiko for OSCC (95% KI, 1,59 til 7,87). Videre ble en signifikant forskjell funnet med mtDNA innhold i saker og kontroller med eller uten HPV-infeksjon (
P
0,001). Tilsvarende fant vi en signifikant forskjell mellom
GSTM1 Hotell og
GSTT1
null genotyper med mtDNA innhold i saker og kontroller (
P
= 0,04 og
P =
0,001 henholdsvis)
mtDNA innholdet i tumorvev var betydelig høyere i fase 0 og 1 svulster enn i stadium IV svulster,
P .
0,001. Ut av 124 tilfeller 18,5% (23) ble stadium 0, 25% (31) av tumorene ble stadium I, 27,4% (34) trinn III, 29% (36) ble stadium IV henholdsvis. Det var ingen prøver tilgjengelig på tumor stadium II. Den mtDNA innhold korrelert med tumor stadium, hvor vi observert at mtDNA innhold avtar med økning i tumorstadiet (
P
0,001). (Figur 2C)
Diskusjoner
den vane å tygge tobakk og betelquid er en endemisk vane hele det indiske subkontinentet. Den Betel pund er ofte referert til som «paan» i sørasiatiske land. De viktigste bestanddelene i en betel pund er Piper betel blader og areca mutter (frø av Areca catechu plante). Den er laget ved å pakke hakket areca mutter i en Piper betel blad, og litt kalk (kalsiumhydroksid) og tobakksblader eller Zarda (flavored tobakk) kan inkluderes for å forbedre smaken; kombinasjoner av ingredienser er endret i henhold til individuelle preferanser. Tobakksforbruket av røyking eller tygging er antatt å være de viktigste etiologiske risikofaktorer for utvikling av munnhulekreft forårsaket av irritasjon fra direkte kontakt med slimhinnene i munnen.
Den forhøyede antallet tobakksrelaterte OSCC tilfeller er et stort problem Nordøst-regionen i India. Alle former for tobakks produsere frie radikaler som bryter antioksidanter og forårsake oksidativ skade på DNA, proteiner og lipider [42], [43]. Antioksidant-rik mat som grønne bladgrønnsaker og frukt som kan bidra til å redusere oksidativt stress forårsaket av tobakk [44], [45] er vanligvis mangler i kostholdet [46], [47], årsakene kan være dårlig sosio -economic tilstand og også vanlig praksis i muntlig forbruk.
i denne studien har vi undersøkt høy risiko HPV-infeksjon, en kjent uavhengig utløsende agent for kreft i munnhulen i OSCC pasienter og en betydelig forskjell med mtDNA innhold i tilfeller og kontroller med eller uten HPV-infeksjon (
P
0,001) oppnås. Men ingen rapporter om sammenslutning av HPV infeksjon med kopi nummer mtDNA er der, selv om korrelasjonen av HPV-infeksjon med mitokondrie-mutasjonen ble rapportert i en studie av livmorhalskreft [48]. Bak protein er pro-apoptotiske medlem som lokaliserer i mitokondriene, og funksjoner for å indusere apoptose. Eliminering av Bak protein av HPV
E6
fremmer overlevelse av HPV-infiserte celler ved å forsinke apoptose og dermed tilrettelegge for svulst utvikling med tilsvarende variasjon i mtDNA innhold, som den eksakte mekanismen er ennå ikke avslørt. Vi rapporterer for første gang foreningen av HPV-infeksjon med mtDNA innhold variasjon.
En vesentlig forskjell mellom
GSTT1 Hotell og
GSTM1
null genotyper med mtDNA innhold i saker og kontrollene (
P
= 0,04 og
P =
0,001) ble observert. Tilstedeværelsen av både
GSTM1 Hotell og
GSTT1
er avgjørende for detoxication av kreftfremkallende sammensatte. Den viktigste risikofaktoren for kreft i munnhulen er røyking, tobakk tygging og betel pund. Samtidig bruk av betel pund fører til en 50-dobling av reaktive oksygenforbindelser generert [12]. Den økte risikoen faktor på null
GST
med opphopning av mtDNA mutasjoner enzym som fordi muligens spiller inne i mitokondrie matrise som mtDNA beskyttelsesfaktor om skader forårsaket av reaktive oksygenforbindelser som igjen påvirker mtDNA innhold og kan føre til årsakssammenheng av OSCC så vel [39]. De sammenslutninger av GST null genotyper og mtDNA innhold er ennå ikke blitt rapportert.
Lave nivåer av mtDNA kopiere nummer i tobakks betel quid chewers funnet i vår studie er knyttet til høy risiko for OSCC grunn av frigjøring av betydelige mengder av ROS. [49] som i sin tur øke mtDNA mutasjon i menneskelige orale vev. Oppbyggingen av mtDNA slettinger og påfølgende cytoplasma segregering av disse mutasjonene under celledeling kan være viktige bidragsytere til den tidlige fasen av OSCC [50], [51]. Uttømming i mtDNA kan være resultat av undertrykkelse av mitokondriell biogenesis. Den mtDNA kopiantall i kreft sannsynligvis avhenger av flere faktorer, blant annet stedet av mutasjon i mitokondrielle genomet som demonstrert i D-loop-regionen, et svært utsatt område for oksidativ skade sammenlignet med andre regioner av mtDNA [52]. Funnene i denne studien også viser risikoen for OSCC og mtDNA kopiantall til tobakk-betel quid chewers i denne regionen. Vi gjorde ikke evaluere kreft vevsprøver for mtDNA besluttsomhet før behandling på grunn av sin ikke tilgjengeligheten fra biorepositary. Dermed kunne vi ikke fastslå mtDNA endringene før kjemoterapi. Dette kan være en begrensning i denne typen studier, selv om det ville tilby oss ytterligere informasjon.
Den inverse korrelasjonen av mtDNA innhold korrelert med histopatologiske tumorstadium og observert i vår studie ble støttet av lignende funn i etterbehandling spytt skyller i hode og nakke plateepitelkarsinom [27]. Men reduksjon av mtDNA kopitall i tumorvev, har blitt rapportert i en rekke humane kreftformer, inkludert HCC [53], [54], bryst [55], [56], gastrisk [57], osteosarkom [58] og annen -kreft [59], [60]. Den underliggende mekanismen bak det lave nivået av mtDNA innhold med økt tumorstørrelse er ikke klart. Videre ble det rapportert at redusert mtDNA innhold kan føre til redusert oksidativ fosforylering kapasitet som i sin tur kan favorisere raskere vekst eller økt invasivitet [61]. Generelt er redusert mitokondriell aktivitet ser ut til å være en tilpasning til hypoksisk miljø av faste tumorer i løpet av deres utvikling siden lavt oksygen initierer lavere oksidativt stress i henhold hypoksiske tilstander og hypoksi induserbar faktor (HIF) hemmer mitokondriell biogenese [62] eller forstyrrer mitokondria ved mitophagy [63 ] .Når svulsten vokser i størrelse, blir cellene blir mer hypoksisk, er mitokondrie biogenesis redusert [63]. Alternativt kan nedgang på mtDNA etter behandlingsperioden gjenspeiler en effekt av stråling som påvirker mtDNA innhold eller mitokondriell tall i celler, noe som kan være ansvarlig for å redusere mtDNA.
Den byrden av orale sykdommer som kreft i munnhulen, periodontal sykdom, og tann tap kan reduseres ved å ta vanlige risikofaktorer, som inkluderer unngå røyking og forbruk av tobakk-relaterte produkter og også inntak av alkohol. Videre praktisere god munnhygiene liker riktig børste og tanntråd daglig sammen med rutinemessig rengjøring og undersøkelse av tannlege kan redusere risikoen for orale sykdommer. Inntaket av frukt og grønnsaker kan også beskytte mot kreft i munnhulen som de er rike på antioksidanter. HPV er en av de risikofaktor for kreft i munnhulen og den mest pålitelige måten å hindre smitte med enten høy risiko eller lav risiko HPV er ved å unngå noen hud-til-hud oral, anal eller genital kontakt med en annen person. De som er seksuelt aktiv, langsiktig, sikt, gjensidig monogamt forhold med en infisert partner er strategien mest sannsynlig å hindre HPV-infeksjon.
Konklusjon
Våre resultater tyder på at mtDNA innhold i tumor vev endringer med tumorstadium og tobakk-betel quid tyggevaner. Signifikant avvik fra middels rekkevidde er assosiert med dårlig overlevelse. Høye nivåer av mtDNA innhold kan tyde på at svulster kan gjennomgå rask tumorvekst, mens lave nivåer av mtDNA innhold antyder invasiv dermed tjene som en biomarkør i påvisning av OSCC.
Takk
Vår ydmyke erkjennelse går til Institutt for bioteknologi (DBT), Govt. fra India for å gi infra-strukturtjenester (BT /MED /NE-SFC /2009) for å drive forskning på kreft. Vår oppriktige takk går til Cachar Cancer Hospital and Research Centre biorepository, Assam; Agartalata Regjeringen Medical College, Tripura og Naga Hospital Kohima, Nagaland, Silchar medisinske universitet og sykehus, Assam for å samle inn prøver.
