Abstract
Bakgrunn
Tumor suppressor PTEN er kjent for å styre en rekke prosesser relatert til celle overlevelse, spredning og vekst. PTEN uttrykk er regnet som en prognostisk faktor i noen menneskelige svulster som bryst, prostata og skjoldbruskkjertelkreft.
metodikk /hovedfunnene
I denne studien analyserte vi påvirkning av PTEN uttrykk på utfallet av en randomisert klinisk studie av konvensjonelle versus 7-dager i uken postoperativ strålebehandling for plateepitelkreft i hode og nakke. Pasienter med kreft i munnhulen, orofarynx og strupehode ble randomisert til å få 63 Gy i fraksjoner på 1,8 Gy gitt 5 dager i uken (CF) eller 7 dager i uken (p-CAIR). Ut av 279 pasienter som deltok i studien, 147 parafinblokker var tilgjengelig for en immunhistokjemisk vurdering av PTEN. For å evaluere den prognostiske verdien av PTEN uttrykk og effekten av fraksjonering i forhold til PTEN, ble dataene på utfallet av en randomisert klinisk studie analysert. Svulster med høy intensitet av PTEN flekker hadde betydelig gevinst i lokoregionalt kontroll (LRC) fra p-CAIR (5-års LRC 92,7% vs. 70,8%, for p-CAIR vs. CF, p = 0,016, RR = 0,26). I motsetning til dette hadde tumorer med lav intensitet av PTEN ikke få fra p-CAIR (5-års LRC 56,2% vs. 47,2%, p = 0,49, RR = 0,94). Intensiteten av PTEN sterkt påvirket LRC i en hel gruppe av 147 pasienter (5-årig LRC 80,9% vs 52,3% for høy vs lav PTEN, p = 0,0007, RR = 0,32). I multivariat Cox analyse, inkludert nakke node engasjement, EGFR, nm23, Ki-67, p53, cyclin D1, tumor nettstedet og marginer, forble PTEN en uavhengig prediktor for LRC (RR = 2,8 p = 0,004).
konklusjoner /Betydning
Disse resultatene tyder på at PTEN kan tjene som en potent prognostisk og prediktiv markør i postoperativ strålebehandling for høy risiko plateepitelkreft i hode og nakke
Citation. Snietura M, Jaworska M, Młynarczyk-Liszka J, Goraj-Zajac A, Piglowski W, Lange D, et al. (2012) PTEN som en prognostisk og prediktiv markør i Postoperativ strålebehandling for plateepitelkreft i hode og nakke. PLoS ONE 7 (3): e33396. doi: 10,1371 /journal.pone.0033396
Redaktør: Torbjørn Ramqvist, Karolinska Institutet, Sverige
mottatt: 16 september 2011; Godkjent: 14 februar 2012; Publisert: 7 mars 2012 |
Copyright: © 2012 Snietura et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Denne forskningen ble støttet av forskningsstipend MN 402 108 134 levert av polske departementet for vitenskap og høyere Education.The Funder hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet.
Konkurrerer interesser: forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Tumor suppressor PTEN (fosfatase og tensin homolog slettet på kromosom 10) er en dual-spesifikke fosfatase som fungerer som en negativ regulator. av PI3K-AKT-mTOR veien, og dermed kontrollere en rekke prosesser knyttet til celleoverlevelse, proliferasjon og vekst. PTEN utfører en avgjørende rolle i stanse av signaloverføring fra membranen vekstfaktor-reseptorer (EGFR, HER-2, IGFR) gjennom AKT signalkaskade [1], [2].
Somatisk PTEN mutasjoner og slettinger eller epigenetisk stanse er vanlig i flere tumortyper, inkludert bryst, endometrium, og skjoldbruskkjertel, men også tumorer i sentralnervesystemet, prostata, lunge, melanom, leukemi og lymfom [3] – [11]. Tap av PTEN kan føre til vevsspesifikke effekter, inkludert raske eller langsomme svulster, eller ingen svulster. I mange neoplasmer PTEN sletting samvirker med andre genetiske alter å forbedre tumorgenese, og kan bestemme aggressiv klinisk virkemåten av tumoren (f.eks anaplastiske thyroid karsinom eller klasse IV invasiv astrocytomas) [12].
På grunn av at AKT-reaksjonsveien bestemmer multiplum nedstrøms prosesser, inkludert hemming av apoptose, tumor-celle proliferasjon [13], og DNA-reparasjon [14], og er også kjent å være forbundet med radioresistance mekanismer, slik som indre radioresistance og hypoksi [15], inaktivering av PTEN kan påvirke effektiviteten av kreftbehandling.
Disse faktorene danner grunnlaget for en økt interesse i PTEN og andre elementer av AKT måte som de potensielle prognostiske og prediktive markører i kombinert modalitet behandling, samt målene for nye legemidler [16 ].
Mens de molekylære funksjonene PTEN i cellen er relativt godt etablert, er det bare noen få kliniske studier som ville ta sin prognostisk og prediktiv verdi i strålebehandling for kreft i hode og nakke. Vi har nylig publisert resultatene av en studie på molekylære prediktor for virkningen av akselerert (7 dager i uken) postoperativ strålebehandling. Det var basert på analyse av lokoregionalt kontroll priser innhentet i en p-CAIR (postoperativ kontinuerlig akselerert bestråling) rettssak i hode og nakke [17] i forhold til uttrykk av fem molekylære markører (EGFR, Ki-67, p-53 , nm23, og cyclin D) [18] og tilstedeværelse av HPV-infeksjon [19].
Metoder
mål
formålet med studien er å evaluere rollen PTEN som en prognostisk og prediktiv faktor i postoperativ strålebehandling for kreft i hode og nakke. I tillegg har vi også undersøke forholdet mellom uttrykket av PTEN og markører tidligere studert i denne krefttypen.
Klinisk bakgrunn av studien
p-CAIR studie ble utført mellom 2001 og 2004 , og rekrutterte 279 pasienter med høy risiko plateepitelkreft strupehodet (158 pasienter) eller kreft i munnhulen /orofarynx (121 pasienter). Kliniske kjennetegn hele gruppen av 279 pasienter, en detaljert presentasjon av risikovurderingen skala, behandling beskrivelse, og det kliniske utfallet har blitt presentert andre steder [17]. Pasientene ble randomisert til å få 63 Gy i fraksjoner på 1,8 Gy, gitt enten 5 dager i uken (140 pasienter: p-CF, postoperativ konvensjonell fraksjonering) eller 7 dager i uken (139 pasienter: p-CAIR).
Nylig presenterte vi analyse av immunohistochemically vurderes uttrykk for fem molekylære markører (EGFR, nm23, Ki-67, p53 og cyclin D1) [18] og real-Time PCR-vurdert tilstedeværelse av HPV-infeksjon [19] i forhold til utfallet av rettssaken. For hensikten med PTEN vurdering, var det mulig å få materiale fra 147 av 279 pasienter som opprinnelig ble meldt. Oppfølgingsdata har blitt oppdatert i denne studien og viser status for pasientene og med januar 2010 (median oppfølgingstid: 87 måneder).
Vi registrerer at oppdateringen ikke påvirker kvalitativ utfallet av analysen, fordi nye lokoregionalt tilbakefall ikke har blitt registrert siden forrige publisering.
Deltakere
Tabell 1 viser kliniske kjennetegn ved 147 pasienter inkludert i analysen. De generelle egenskapene til undergruppen analysert i denne studien ikke skiller seg vesentlig fra det av befolkningen med 279 pasienter [17].
De fleste individer som deltar i begge armene av studien var menn ( ~90%). Slike kjønns utbredelsen er representative for en befolkning på HNSCC i Polen og er assosiert med røykevaner og alkoholforbruk.
Viktigere, risikofaktorer for tilbakefall var jevnt fordelt mellom studiearmene. Den faktiske gjennomsnitts generelle strålebehandling tid blant 131 pasienter var 48,4 dager (SD = 6,3) i CF kontra 35,6 (SD = 6,8) i p-CAIR. Fire pasienter i p-CF og fire i p-CAIR mottatt totale stråledoser lavere enn planlagt, på grunn av forverrede generell ytelse før eller under strålebehandling. Fire pasienter i p-CF og tre i p-CAIR fikk totaldoser høyere enn i protokollen, på grunn av lokal /nodal tumorprogresjon under behandling eller behandling planlegging. En pasient i p-CAIR arm døde før strålebehandling ble startet. De andre 131 pasienter fikk 63 Gy i 1,8 Gy fraksjoner. Ingen av pasientene fikk kjemoterapi. Analysen, som vist, ble utført på en intention to treat basis.
Analysen av PTEN uttrykk
PTEN uttrykk mønsteret ble undersøkt immunohistochemically i formalinfiksert, parafininnebygd svulst prøver fra alle pasientene.
monoklonale, kanin anti-humant PTEN-antistoff, klon 138G6, reist mot de siste 100 C-terminale aminosyrer i proteinet, ble anvendt i alle analysene (Cell Signaling Technology, Denver ). PTEN spesifisitet dette antistoffet ble bekreftet ved hjelp av Western blotting og immunhistokjemi teknikker i flere cellelinjer med kjent PTEN status. Immunfarging ble utført ifølge standard retningslinjer: fire mikrometer snitt ble skåret, montert på objektglass, deparaffinized, og rehydrert i xylen og i en gradert serie av etanol. Epitop gjenfinning ble utført i 20 minutter ved 98 ° C i TRIS-buffer /EDTA 10 mmol /l, pH 9,0. Endogen peroksidaseaktivitet ble inaktivert med 3% oppløsning av H
2o
2 i 5 min. Deretter ble det primære antistoff påført på skinnene (1:100 fortynning i bakgrunn Reduksjon antistoffdiluent, Dako, Danmark) og inkubert over natten ved 4 ° C. Til slutt, en blanding av polymer konjugert med pepperrot peroksidase og affinitetsrenset geite-anti-kanin Fab «antistoffragmenter og DAB kromogen ble anvendt for å visualisere reaksjonen (EnVision + Dako, Danmark). Etter kontra i hematoksylin ble prøvene dekket med AquaMount (Dako, Danmark) monteringsmedium.
fargeintensitet ble evaluert av en patolog, som var blindet for den kliniske opplysninger som gjelder pasienter. Anledninger ble utført i henhold til en relativ semi-kvantifisering metoden beskrevet opprinnelig av Perren [20] og mye brukt i mange nyere undersøkelser vedrørende tumorer i hode og hals [21], melanom [22], bryst [3], [23], eggstokk [ ,,,0],24], og kolorektal [25] kreft. Representative områder av svulsten ble valgt, og scoret etter opprinnelig forstørrelse × 200. Objektglassene ble klassifisert i to grupper, avhengig av fargeintensitet av tumorceller i forhold til PTEN ekspresjon i tilstøtende normal-vises epitel eller stroma, som tjente også som en indre, positiv kontroll. Svulster som viser ingen farging eller med lavere fargeintensitet enn i tilsvarende normale vev ble klassifisert som LAV PTEN (Fig. 1B), mens de med øket eller lik ekspresjon ble ansett for å være HIGH PTEN (Fig. 1A).
Et utvalg av PTEN uttrykk i svulstvev: A – høy, B – lav. Synlig positiv farging av den omgivende grunnmasse i begge prøver. Original forstørrelse. 100 ×
En rekke histologiske preparater med kjent PTEN status tjente som positiv kontroll. Andre kreft seksjoner, behandlet som beskrevet før, men uten primære antistoff søknad, viste ingen farging (negativ kontroll).
Etikk
Den etiske komiteen av Maria Sklodowska-Curie Memorial Cancer Center og Institutt for onkologi, Gliwice Branch spesielt godkjent denne studien i henhold til nasjonale bestemmelser. En skriftlig, informert samtykke ble innhentet for alle deltakerne i studien.
Statistiske metoder
Loco-regional svikt ble definert som tilbakefall av kreft i primærtumor området, i halsen eller supraclavicularis noder, og fjernmetastaser som gjentakelse andre steder. Overlevelseskurven er plottet ved bruk av Kaplan-Meier-metoden og sammenlignet ved hjelp av Cox f test. Tatt i betraktning den utforskende formålet med denne forskning og det forholdsvis lite antall pasienter, ble Cox f testen anses å være mer egnet for å teste forskjeller mellom de to grupper, enn det som var mer vanlig brukte log-rank-test, som er utformet for bruk i større studier. For ytterligere å undersøke prognostisk betydning av variable som er av betydning, ble en univariat og multivariat Cox proporsjonal fare regresjonsanalyse utført. Bare de variablene som vist statistisk signifikant i univariat analyse ble inkludert i den multivariate modell. Modellen ble optimalisert ved hjelp av en baklengs trinnvis regresjon.
Resultater
Den prognostiske verdien av PTEN uttrykk
Lav PTEN uttrykk ble oppdaget i 88/147 svulster (59,9%). Blant 74 pasienter med strupekreft, 46 (62,2%) hadde lav uttrykk for PTEN forhold til 42/73 (57,3%) pasienter med kreft i munnhulen /orofarynx. Verken T scenen (p = 0,10), og heller N scenen på diagnose (p = 0,86) var knyttet til PTEN uttrykk, som evalueres av U-Mann Whitney test. PTEN uttrykk ble imidlertid betydelig påvirket av kjønn av pasientene. Lav PTEN uttrykk ble funnet i 4/15 (26,7%) kvinner, sammenlignet med 84/132 (63,6%) menn (p = 0,006, U-Mann Whitney test).
Loco-regional tumorkontroll var svært påvirkes av PTEN uttrykk: 5-års LRC var 52,3% hos pasienter med lav PTEN uttrykk, sammenlignet med 80,9% hos pasienter med høyt PTEN uttrykk (p = 0,0007, figur 2A.). Den prognostiske betydningen av PTEN var tydelig både for lokal styring (5-års LC 63,9% vs. 84,8% for lav vs høy PTEN, p = 0,01) og for regional (nodal) kontroll (5-års NC 74,6% vs. 87,9 % for lav vs høy PTEN, p = 0,05).
Loco-regional kontroll (A), fjernmetastaser overlevelse (B), og frihet fra sekundær kreft (C), ifølge PTEN uttrykk i 147 pasienter med høy risiko HNSCC behandlet i p-CAIR rettssaken.
Fem års metastaser overlevelse var 81,4% hos pasienter med lav PTEN uttrykk, vs. 84,3% hos pasienter med høyt PTEN uttrykk ; forskjellen synes ikke signifikant (p = 0.49, fig. 2B). Også den akkumulerte frekvensen av metachronous svulster ble ikke signifikant påvirket av PTEN uttrykk (p = 0,15, Fig. 2C).
Den prediktive verdien av PTEN uttrykk
Fordi p-CAIR studie ble utformet sammenligne lokoregionalt tumorkontroll i akselerert vs. vanlig postoperativ strålebehandling, var det mulig å vurdere den prediktive potensialet i PTEN uttrykk i forhold til fraksjonering. Det kliniske resultatet i en undergruppe av 147 pasienter dukket representant for utfallet observert i alle 279 pasienter: 5 år lokoregionalt tumorkontroll var 57,6% i CF, sammenlignet med 70,6% i p-CAIR; om forskjellen ikke var statistisk signifikant (fig. 3A, p = 0,19).
lokoregionalt kontroll (LRC), i henhold til fraksjonering i undergruppe av 147 pasienter fra p-handlingen i prøve anvendt i denne studien ( A), LRC henhold til fraksjonering og uttrykk for PTEN i undergruppe av 147 pasienter fra p-CAIR rettssaken brukt i denne studien. HIGH PTEN uttrykk (B), LAV PTEN uttrykk (C)
i en undergruppe av 88 pasienter med lav PTEN uttrykk, 5-årig LRC var 47,2% i CF, sammenlignet med 56,2% i p-CAIR (fig. 3C, p = 0,19). I en undergruppe av 59 pasienter med høyt PTEN uttrykk, 5-årig LRC var 70,8% i CF, sammenlignet med 92,7% i p-CAIR (Fig. 3B, p = 0,016). Dermed ble lav PTEN uttrykk relatert ikke bare til ugunstige LRC, men også mangel på bedring i LRC fra akselerert fraksjonering.
PTEN versus andre variabler og markører
Uttrykket av PTEN korrelert verken med HPV-infeksjon, og heller ikke med ekspresjon av hvilken som helst av fem tidligere studert markører (EGFR, nm23, Ki-67, P53, cyklin D1), som angitt av p . 0,05 i alle utført U-Mann Whitney tester
A multivariat modell designet for å vurdere en uavhengig prognostisk betydning av variabler av potensielle betydning for LRC opprinnelig innarbeidet flere faktorer, blant annet uttrykk for PTEN, EGFR, nm23, Ki-67, p-53, og cyclin D1; kliniske variabler som alder, kjønn, funksjonsnivå, svulststedet; og klassiske patologiske risikofaktorer, som for eksempel nakke node engasjement, marginer, og svulst klasse. HPV-infeksjon er ikke innarbeidet i modellen fordi bare ni pasienter viste seg å være HPV-positive i denne gruppen, og alle var lokalt styrt (ingen usensurerte data i HPV-positive gruppe) [19].
Etter at vi elimineres ikke-signifikante og ledsagende variabler fra modellen, bare fire variabler som syntes å være betydelig, uavhengig relatert til LRC: PTEN uttrykket (RR = 2,84, p = 0,004), hals node engasjement (RR = 2,05, p = 0,035), EGFR uttrykket (RR = 1,91, p = 0,033) og nm23 uttrykk (RR = 1,88, p = 0,041, Tabell 2).
diskusjon
PTEN som en prognostisk markør
Flere kliniske og patologiske faktorer har blitt identifisert til prognose risiko for tilbakefall etter kirurgi for lokalt avansert HNSCC [26], [27]. Disse faktorer blir brukt til å velge kandidater for postoperativ radioterapi og for å optimalisere strålingsdose. Flere nylig, basert på resultater fra store randomiserte kliniske studier [28], [29], er pasienter med høy risiko for tilbakefall anses for postoperativ radiochemotherapy. De «vanlige» risikofaktorer som positive kirurgiske marginer, invasjon av mer enn en hals node, extracapsular spredning av nodal sykdom og munnhule /orofaryngeal primære svulsten nettstedet, unntatt T1N0, ble inkludert blant utvalgskriterier for en p-CAIR rettssaken [ ,,,0],17].
Nylige fremskritt i immunkjemi og molekylær biologi har muliggjort identifisering av nye markører som bidrar til å prognose risiko for tilbakefall. I det minste to av dem (HPV-infeksjon og EGFR-ekspresjon) er progressivt mer anerkjent i et rutinemessig klinisk praksis [30], [31]. Resultatene av denne studien tyder på at PTEN kan bli en annen markør av stor klinisk betydning.
I vår studie vi gikk videre og testet en multivariat modell, inkludert andre potensielle markører (tabell 2). PTEN syntes å ha en sterkere prognostisk verdi enn noen av de andre variablene vurderes, herunder nakke node engasjement og EGFR uttrykk. Bare én av de variablene som brukes i en «vanlig» evaluering av risikofaktorer forble betydelig når de blir konfrontert med nye markører. Vi kunne ikke sammenligne den prognostiske verdien av PTEN og HPV-infeksjon i denne studien, fordi mangel på usensurerte data i HPV-positive gruppen utelukket en slik analyse. Likevel, mangel på sammenheng mellom PTEN uttrykk og HPV infeksjon indikerer at disse to variablene er uavhengige.
Analysen, som vist, se vår nylig publiserte resultater på prognostisk og prediktiv verdi av fem molekylære markører (EGFR, Ki-67, P53, nm23, og cyklin D) [18], og tilstedeværelsen av HPV-infeksjon [19]. Vi hadde foreslått en prognostisk indeks for tilbakefall etter postoperativ strålebehandling som innlemmet tre faktorer av størst betydning: uttrykk for EGFR, uttrykk for nm23, og invasjonen i nakke noder [18]. Resultatene av denne analysen og de nye data om HPV-infeksjon [19], [30] ber oss om å foreslå en ny, forbedret poengsum som ville innlemme fem risikofaktorene fremst betydning for utfallet av postoperativ strålebehandling for HNSCC:
fravær av HPV-infeksjon i tumor
lav PTEN uttrykk
halsen node engasjement
høy EGFR uttrykk
høy nm23 uttrykk
Figur 4 illustrerer LRC i p-CAIR prøving, i henhold til antallet av slike definerte risikofaktorer. Ettersom ikke alle pasientene i denne studien hadde etablert HPV status, bare dataene fra 123 pasienter med kjent status for alle fem markører ble anvendt til å plotte grafen. Ingen av pasientene hadde null risikofaktorer i det analyserte gruppen, mest fordi utbredelsen av HPV-infeksjon var lav (6,9%) i denne gruppen. Vi forventer at pågående forskning på molekylære markører i kreft utført av andre forskere vil bidra til å validere og ytterligere forbedre dette prognostisk poengsum
Loco-regional kontroll i henhold til antall følgende risikofaktorer:. Fravær av HPV-infeksjon i tumor , lav PTEN uttrykk, nakke node engasjement, høy EGFR uttrykk, og høy nm23 uttrykk. Analysen ble begrenset til 123 pasienter fra p-CAIR studie med kjent HPV status og kjente status for de 4 andre markører.
PTEN som en prediktiv markør
Flere kliniske studier har vist potensialet av molekylære profiler for å forutsi nytte av akselerert strålebehandling [31] -. [33], inkludert vår forrige rapport om molekylære markører i p-CAIR rettssaken [18]
resultatene fra denne studien indikerer at ekspresjon av PTEN kan være nyttig for å forutsi nytte akselerert strålebehandling.: pasienter med høy PTEN uttrykk har et positivt resultat etter akselerert postoperativ strålebehandling, sammenlignet med pasienter behandlet med konvensjonell fraksjonering og til de med lav PTEN ekspresjon (fig 3B C)
Den kliniske betydningen av dette funnet er begrenset av dagens kunnskapsbasert forskrivningspraksis som ville favorisere postoperativ radiochemotherapy løpet postoperativ strålebehandling alene høyrisiko HNSCC [27] -. [29]. Men de nye data om molekylære markører og HPV-infeksjon heve flere spørsmål enn faktiske behov av kjemoradioterapi hos pasienter som vil, sannsynligvis, har gunstig utfall etter postoperativ strålebehandling alene. Vi håper at fremtidige kliniske studier og forskning på molekylære markører vil ytterligere løse dette viktig.
Den biologiske bakgrunnen for denne studien
En mulig rolle PTEN tap i patogenesen av HNSCC har vært beskrevet av Califano [34] i hans trinnvis modell for kreftutvikling. Senere ble et helt spekter av funksjonelle og strukturelle dysfunksjoner av PTEN i HNSCC demonstrert, inkludert mutasjoner, tap av heterozygocity (LOH) og epigenetisk stanse [35] – [38]. De fleste av disse lidelsene føre til en reduksjon eller tap av protein uttrykk, og dermed gi begrunnelsen for defekte PTEN deteksjon av immunhistokjemi.
Nylig har en ny modell av PTEN rolle i kreftutvikling er foreslått og verifisert in vivo . Ifølge denne modellen, subtile reduksjon (20%) i dose på PTEN, endret biologi av kreft og uttrykket profiler av gener som er involvert i en kreftcelle proliferasjon [39], [40].
På grunn av diverse ekspresjon av PTEN i normale vev og individuelle tumorer, så vel som den avgjørende rollen av subtile variasjoner av PTEN-konsentrasjon mot kreft fenotype utvikling [12], er det et behov for en mer sofistikert immunhistokjemi scoring metode. En strategi, foreslått av Perren og kolleger [20], til å bruke normal vev eller stroma som en felles referanse som gir en cut-off point for normal /dysfunksjonelle PTEN, sikrer sak-til-sak sammenlignbare resultater og ble gjennomført i vår studie. Den samme metode ble brukt av Lee og medarbeidere [21], som undersøkte PTEN ekspresjon hos pasienter med kreft tunge og viste at tap av PTEN er forbundet med kortere total overlevelse og overlevelse tid. Videre forble PTEN status en uavhengig prediktor for dårlig resultat sammenlignet med tumorstadium og knutepunktstatus. Tilsvarende har betydningen av PTEN uttrykk som en markør for gunstig utfall i kombinerte modaliteter som omfatter bestråling blitt rapportert for mange andre kreftformer, inkludert astrocytomas [41], cervical [4], [42] og brystkreft [20], prostata [7 ], [8] og endetarmskreft [43].
Mer tvetydige resultater har blitt vist av Tsutsui [23] og Perez-Tonorio [3] i sammenheng med brystkreft. De viste at prognosen mer tydelig avhengig av den kombinerte status for PTEN /P53 og PTEN /S-fase brøkdel hhv.
I motsetning Pattje og kolleger [44] nylig viste at det er en økt risiko for lokoregionalt svikt etter postoperativ strålebehandling hos pasienter med hode- og nakke plateepitelkreft uttrykker PTEN. Som et bevis på konseptet, forfatterne viste en redusert Radiosensitivity i en human embryonisk nyrecellelinje (HEK293) med et overuttrykt PTEN-genet. Til tross for den overfladiske likheter til de foreliggende studier, inkludert tumor områder, behandlingsform eller HPV-infeksjon frekvens, er det mange vesentlige forskjeller i forsøksgruppen og utforming, mellom vår tilnærming og den ovenfor nevnte forskning. Den foreliggende studien ble utført i en potensiell klinisk studie omgivelser, noe som sikrer strengt definerte kriterier for rekruttering av pasienter, ensartethet av doser, og fraksjonering blant pasientene. Også kjønn individer som deltar i begge armene av rettssaken var tungt skjevt mot menn (~90%) og korrelert med tobakksrøyking, i motsetning til den siterte papir, der begge kjønn ble jevnt fordelt.
En annen metodikk for immunhistokjemi scoring er en annen vesentlig forskjell som kan bidra til et motstridende resultat. Pattje og kolleger brukt en mindre populær, absolutt metode for semi-kvantifisering [44], [45], der enhver positiv farging ovenfor bakgrunn ble ansett som positivt. Dette faktum er av avgjørende betydning i lys av nye bevis, som viser at selv en liten nedgang på PTEN aktivitet kan endre biologi av svulsten og at fullstendig tap av funksjonalitet kan føre til det motsatte effekter, deretter en subtil variasjon [40] i sin aktivitet. Metodikken implementert av Pattje kan føre til, at bare tilfeller med fullstendig tap av protein uttrykk er klassifisert som PTEN-dysfunksjonell. I foreliggende studie ble en relativ semi-kvantifisering metode utnyttet; dermed svulster med redusert PTEN uttrykk i forhold til normalt vev ble ansett som PTEN-dysfunksjonell. En slik tilnærming synes å være i samsvar med nye konsepter av PTEN fungerer. Det er også verdt å merke seg at relativt semi-kvantifisering kan være vanskelig å gjennomføre i tilfelle av vevet matrise som brukes i Pattje undersøkelse, på grunn av den knappe innholdet i normalt vev i TMA-kjerner.
Et interessant konsept, nemlig «PTEN paradigmet» eller «obligat haplogruppene-insuffisiens» introduserte nylig, kan gi en ekstra forklaring på disse motstridende resultater. Ifølge denne teorien, PTEN cellulære funksjoner er tett bundet til P53 status. I tilfelle av fullstendig tap PTEN, dirigerer funksjonell P53 cellen til akutt cellulær begynnende alderdom. Således er heterozygot tap av PTEN mer enn tumorigent fullstendig tap av PTEN i sammenheng med vill-type P53. Dette mønsteret endrer i innstillingen av mutert p53 celler som er i stand til å aktivere P53 ikke gjennomgår PTEN tap-indusert mobilnettet senescence [46]. Som et resultat av fullstendig tap av PTEN samarbeider synergistisk med delvis eller fullstendig tap av P53 [47]. Mest sannsynlig på grunn av det høye forbruk av tobakk og lav andel av HPV-positive tilfeller (som er gjensidig utelukkende til P53 mutasjoner), en utbredelse av p53 mutasjoner i den undersøkte pasientgruppene var høy (75,4%, noe som bekreftes ved immunhistokjemi) [18]. I samsvar med PTEN paradigme, kunne synergistiske effekter kan forventes i et tilfelle av PTEN /P53-defekt pasienter, som fører til gunstig prognose i PTEN-positive individer.
Som konklusjon, resultatene av denne undersøkelsen og andre studier viser at den kliniske nytten av PTEN som prognostisk eller prediktiv markør for stråleterapi ikke er ennå robust definert. Derfor er det et klart behov for ny forskning som vil videre ta opp disse interessante spørsmålene med referanse til kombinerte behandlingsmetoder.
